Поиск анализа

№AN210FELV, Определение антигена р27 FeLv (Feline leukemia virus) (тИФА)

Срок исполнения

*указанный срок не включает день взятия биоматериала

Исследуемый материал

Метод определения

            

ОПИСАНИЕ

Вирусная лейкемия кошек вызывается FeLV (Feline Leukemia Virus) – оболочечным РНК-содержащим вирусом рода Gammaretrovirus, принадлежащим семейству Retroviridae. Инфекция FeLV является одной из ведущих причин смерти кошек, вызывая иммуносупрессию, патологии костного мозга и развитие опухолей гематопоэтической ткани.
Инфекция FeLV прогрессирует быстрее, чем FIV, и является более патогенной, поэтому кошки с прогрессирующими инфекциями обычно погибают вследствие осложнений. В отличие от FIV, у многих кошек на ранней стадии инфекции FeLV наблюдается регресс до начальной стадии латентного вирусоносительства («регрессирующая инфекция»).
Передача FeLV-A происходит преимущественно при контакте со слюной больного животного, например, при вылизывании, взаимном груминге и совместном использовании мисок для корма и воды. Также возможна передача при укусах (в том числе блошиных), переливании крови от больных животных, с молоком.
Вирус неустойчив к действию факторов внешней среды и быстро инактивируется дезинфектантами, мылом и при высушивании. Общая распространенность инфекции FeLV снизилась за последнее время благодаря широкому внедрению в практику специальных методов исследования и вакцинации. Риск развития инфекции повышен у животных, имеющих доступ на улицу, контактирующих с другими кошками, интактных котов, отличающихся агрессивностью, а также кошек с коинфекцией FIV.
Болезнь чаще отмечается у взрослых кошек, чем у молодых животных в возрасте до шести месяцев. Средний возраст инфицированных животных составляет три года, что меньше, чем для FIV.
Варианты исхода инфекции FeLV могут быть разнообразными и зависят от штамма и дозы вируса, путей передачи инфекции, факторов, влияющих на функцию иммунной системы хозяина (возраста, генетики, наличия коинфекций, стресса, применения иммуносупрессивных препаратов).
Вирус проникает в организм ороназальным путем, репликация происходит в лимфоидной ткани ротовой полости, поражая моноциты и лимфоциты. Затем инфекционный агент попадает в циркуляторное русло. В этот период у некоторых кошек могут развиваться симптомы системной патологии, такие как лихорадка, летаргия и/или лимфаденопатия. Небольшое число пораженных лимфоцитов проникает в костный мозг, где вирус быстро инфицирует делящиеся клетки-предшественницы гемопоэза, а затем – лимфоидные и эпителиальные клетки различных органов. Поражение костного мозга считается критическим этапом патогенеза инфекции FeLV. После инфицирования эпителиальных клеток слюнных желез вирус в больших количествах выводится со слюной; небольшие количества вируса могут выводиться с мочой и фекалиями.
У некоторых кошек репликация вируса подавляется иммунной системой в течение нескольких недель после инфицирования, затем происходит поражение костного мозга. У таких животных развивается регрессирующая инфекция, при которой провирусная ДНК обнаруживается в геноме клеток хозяина, но размножения и выделения вируса не происходит. Развитие регрессирующей инфекции возможно после периода виремии, также допустимо отсутствие вирусемии. Регрессирующая инфекция может персистировать в течение всей жизни животного и активироваться при иммуносупресии, например, в период беременности или при использовании иммуносупрессивных препаратов. Впоследствии у некоторых кошек с регрессирующей инфекцией могут развиться FeLV-негативные новообразования. При абортивной инфекции виремия не наблюдается, вирус не обнаруживается лабораторными методами. Инфицирование кошек абортивной инфекцией происходит небольшими дозами вируса, поэтому, несмотря на отсутствие виремии, у них отмечается наличие антител к вирусу. Развитие прогрессирующей инфекции у животных происходит после включения в патологический процесс костного мозга, а интенсивность разрушения клеток инфекционным агентом ограничивает способность иммунной системы хозяина подавлять репликацию вируса.
Инфекция FeLV часто диагностируется во время скрининговых обследований клинически здоровых кошек. Скрининг проводится с использованием ИФА или иммунохроматографических методов обнаружения антигена FeLV в сыворотке крови ввиду их высокой чувствительности, специфичности, быстроте выполнения и доступности.
Несмотря на то, что у многих кошек, у которых обнаруживают антиген, клинические признаки отсутствуют, необходимо проведение клинического и биохимического исследований крови, исследования мочи для выявления нарушений, которые могут указывать на наличие патологий, вызванных инфекцией FeLV. Слабо выраженные изменения состава крови, такие как эритроцитарный макроцитоз или моноцитопения, могут иметь место при отсутствии выраженных клинических симптомов и указывать на неблагоприятный исход болезни в долгосрочной перспективе.
К дополнительным тестам, рекомендованным к проведению у кошек с анемией, относятся определение количества ретикулоцитов, проба Кумбса и ПЦР на наличие гемоплазм. Для животных с панцитопенией и персистирующими нерегенеративными анемиями рекомендовано исследование аспирата костного мозга и кор-биоптата.
Существует ряд тест-систем ПЦР для обнаружения нуклеиновой кислоты FeLV. В настоящее время основными показаниями к проведению ПЦР являются: 1) скрининг потенциальных доноров крови наряду с тестированием на наличие антигена; 2) выявление регрессирующей инфекции при подозрении на наличие FeLV как причины неоплазии при получении отрицательных результатов тестирования на наличие антигена.
С помощью ПЦР (в реальном времени с обратной транскрипцией) возможно обнаружение РНК FeLV или провирусной ДНК. При проведении скрининга или диагностики FeLV необходимо избегать применения ПЦР без тестирования на наличие антигена. Врач-клиницист должен знать, используется обнаружение провирусной ДНК, вирусной РНК или обеих нуклеиновых кислот ввиду того, что клиническая значимость положительного результата на наличие вирусной РНК отличается от таковой для провирусной ДНК (которая позволяет предположить наличие непродуктивной инфекции у кошек с отрицательными результатами теста на антиген). После инфицирования возможно получение положительных результатов исследования методом ПЦР в реальном времени в течение нескольких недель до того, как могут быть получены положительные результаты теста на антиген и выделение вируса. Таким образом, ПЦР является более чувствительным методом, чем тест на наличие растворимого антигена. Высокая концентрация вирусной РНК в крови и слюне обычно наблюдается при прогрессирующей инфекции, а низкая – при регрессирующей.
Для определения провирусной ДНК методом ПЦР используются образцы крови, лейкотромбоцитарного слоя, костного мозга или иных тканей кошек, негативных на антиген FeLV.

ПРЕАНАЛИТИКА

Диагностический тест доступен в следующих локализациях:

  • AN326ЛИК — ликвор, образец берут в пробирку с ЭДТА. Хранение при температуре +2. + 8 ℃ до 3-х дней;
  • AN 326 КР- цельная кровь, образец берут в пробирку с ЭДТА. Хранение при температуре +2.+8 ℃ до 3- х дней;
  • AN 326 КМ — костный мозг, образец берут в пробирку с ЭДТА. Хранение при температуре +2.+8 ℃ до 3-х дней;
  • AN 326 БТК — биоптат ткани (кусочек лимфоузла) замораживают в микропробирке с транспортной средой при температуре — 17…- 23 ℃. Сохранность биоматерала до месяца.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

У кошек с положительным результатом исследования методом ПЦР на наличие провирусной ДНК и отрицательным результатом на наличие растворимого антигена имеет место регрессирующая инфекция. Такие кошки не являются источником инфекции, однако возобновление выделения вируса может наблюдаться у них после стресса или иммуносупрессии, передача вируса возможна при переливании крови от таких животных. У кошек с регрессирующей инфекцией провирусная ДНК обычно присутствует в гораздо меньшей концентрации, чем у кошек с прогрессирующей формой. Использование для исследования образцов костного мозга вместо образцов цельной крови позволяет повысить чувствительность обнаружения провирусной ДНК.
Интерпретация результатов исследования методом ПЦР должна проводиться с осторожностью. Ретровирусы характеризуются высокой интенсивностью мутаций, наличие вариаций последовательностей может привести к получению ложноотрицательных результатов. Ввиду того, что в вакцине против FeLV используется инактивированный или рекомбинантный вирус, получение ложноположительных результатов у вакцинированных животных невозможно.

РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ
ПЦР
Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе провирусной ДНК FeLV.