№AN5

Общий анализ крови (флуоресцентная проточная цитометрия + микроскопия мазка при наличии патологических сдвигов)

Срок исполнения
1 день (плюс 1-2 для регионов)* указанный срок не включает день взятия биоматериала
Исследуемый материал
кровь с ЭДТА
Метод определения
флуоресцентная проточная цитометрия + микроскопия мазка при наличии патологических сдвигов

Общеклинический анализ крови (ОКА) – это один из важнейших диагностических методов и включает в себя множество гематологических тестов, которые позволяют получить подробную информацию о состоянии периферической крови. Это относительно дешевый, легко доступный скрининговый тест, в результате которого можно выявить воспаление, анемию, коагулопатию или новообразование гемопоэтических органов. Многие из этих тестов проводят автоматизированные гематологические анализаторы, а дополнительную информацию получают при микроскопическом исследовании мазка крови, а также комментарии ветеринарного гематолога по морфологии популяций эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. В некоторых случаях, микроскопическое исследование окрашенного мазка крови, само по себе позволяет поставить диагноз. Но чаще всего интерпретация общего анализа крови осуществляется в сочетании с биохимическим исследованием крови, анализом мочи, данных анамнеза и физикального обследования, что и будет в дальнейшем направлять клинициста при постановке диагноза и выборе последующих действий.

Исследуемые параметры клинического анализа крови:

·  Определение количества эритроцитов и их морфологические особенности;

· Определение количества лейкоцитов, выведение лейкоцитарной формулы и морфологические особенности лейкоцитов;

· Определение количества нейтрофилов и палочкоядерных нейтрофилов;

· Определение количества лимфоцитов;

· Определение количества моноцитов;

· Определение количества эозинофилов;

· Определение количества базофилов;

· Определение количества гемоглобина;

· Гематокрит (или объем осажденных эритроцитов);

· Эритроцитарные индексы (среднее содержание гемоглобина, средняя концентрация корпускулярного гемоглобина и средний объем эритроцита);

· Подсчет или оценка количества тромбоцитов.

В нашей лаборатории общеклиническое исследование крови проводится с помощью двух автоматизированных  геманализаторов: 1)  ветеринарный автоматический гематологический анализатор МЕК-6550К, специально разработанный для  анализа ветеринарных образцов. Обеспечивает получение результатов уже через 60 секунд. Вся информация по анализу, включая 21 параметр для собак, кошек, крупного рогатого скота и лошадей плюс три гистограммы, отображается на большом цветном экране. Сводит до минимума подсчет клеток глазами. Шесть предустановленных типов животных – собака, кошка, крупный рогаты скот, лошадь, крыса и мышь, плюс три свободные типа животных позволяют проводить автоматический подсчет клеток для многих видов животных. Когда регистрируется новый вид животного, режим поиска оптимального порога позволяет выбрать  необходимые  параметры измерения , а также  уменьшить количество мазков крови и подсчет клеток глазами под микроскопом.

Когда результат измерения выходит за границы высоких или низких референсных значений, образец может быть измерен еще раз с другим разведением. Это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Полностью автоматическая очистка и заполнение реагентами ведет к постоянной готовности анализатора.

2) SYSMEX XN-1000 – базовый аналитический модуль серии, полностью автоматизированный и характеризующийся повышенной производительностью и надежностью. Гематологические анализаторы серии XN для крупных лабораторий по праву считаются многофункциональными системами, которые отличаются своей повышенной способностью к модификации даже в пределах небольшого по размерам пространства. Цельнокорпусная платформа, в которую может входить как один анализатор, так и сразу 9 модулей. В основе работы лежит метод проточной флуоресцентной цитометрии.

При использовании всех гематологических анализаторов рекомендуется проводить микроскопическое исследование мазка крови для перекрестной проверки точности подсчета лейкоцитов и тромбоцитов, выдаваемого анализатором, для проверки подсчета лейкоцитарной формулы и для исключения наличия скоплений тромбоцитов. Микроскопическое  исследование часто необходимо для идентификации важных дополнительных патологических изменений, таких как сфероцитоз или присутствие телец Хайнца, а также наличия бластов, мастоцитов, микрофилярий или паразитов в эритроцитах.

Количество эритроцитов и их морфологические характеристики (RBC,Red Blood Cells).

Эритроциты - красные кровяные тельца, форменные элементы, участвующие в газообмене, поддержании КЩС, гликолизе и т.д. Наибольшее их количество содержится в крови млекопитающих. Между количеством эритроцитов в единице объема крови и их собственным объемом существует обратно пропорциональная зависимость: эритроциты млекопитающих - самые маленькие. Отличаются они и по форме у разных видов животных. Морфологические признаки зрелых эритроцитов кошек, собак , лошадей и жвачных в основном схожи: у всех у них в эритроцитах отсутствует ядро, окрашиваются они ацидофильно и имеют форму двояковогнутого диска, что увеличивает  контактную поверхность клетки и способствует более продуктивному транспорту кислорода и углекислого газа. Основные отличия заключаются в размерах и интенсивности центральной зоны просветления.

Эритроциты содержат до 95 % гемоглобина, который обеспечивает транспортировку кислорода. Продолжительность жизни эритроцитов у собак, в  среднем до 120 дней, у кошек 70 дней. Разрушаются они в норме преимущественно в селезенке.

Для клинической практики имеет значение определение количества эритроцитов в мм³, в 1 мкл ( в 1 л по международной системе единиц СИ), изменение их формы (пойкилоцитоз), интенсивности окрашивания (гиперхромия, гипохромия, нормохромия), наличие полихромазии (полихроматофилии) и различных включений в цитоплазме эритроцитов или патологической зернистости.

Количество эритроцитов, концентрация гемоглобина и гематокрит – показатели количества эритроцитов и обычно повышаются одновременно, хотя изменения могут быть не строго пропорциональными при нарушении размера эритроцитов и/или содержания гемоглобина в эритроцитах. Снижение количества эритроцитов (анемия) может возникать при кровопотере, повышенном разрушении эритроцитов (гемолизе) или при уменьшении образования эритроцитов в костном мозге. Повышение количества эритроцитов, часто обусловлено гемоконцентрацией (относительный эритроцитоз) и наблюдается при массивных и длительных диареях,  при образовании транссудатов и экссудатов, при непроходимости кишечника, после интенсивной мышечной работы ( из-за перемещения плазмы из сосудов в ткани). При гемоконцентрации вязкость возрастает, что приводит к нарушению кровообращения в микроциркуляторном русле, и клинически проявляется нарушением зрения, гипертензией, и пр.

Истинный эритроцитоз (полицитемия) может быть первичной и вторичной и, соответственно, обусловлен следующими причинами: автономным ростом и созреванием клеток - предшественников  эритроидного ряда, вне зависимости от регуляторных механизмов; тканевой гипоксией и/или избыточной выработкой эритропоэтина. Истинный эритроцитоз может носить приспособительный характер и наблюдаться в физиологических условиях. Подобный механизм развития эритроцитоза (полицитемии) действует и у пациентов с хронической гипоксемией, возникающей в результате патологии органов дыхания, кровообращения и при хроническом отравлении угарным газом, а также в высокогорных районах.

Эритропения – понижение количества эритроцитов наблюдается при: анемиях, обусловленных недостаточным или неполноценным кормлением, инфекционных заболеваниях, интоксикациях, отравлениях гемолитическими ядами, инвазионных болезнях,  гемопаразитозов, лейкозах, злокачественных новообразованиях , обильных кровопотерях.

Изменения морфологии эритроцитов могут относиться к их величине, форме и окраске. При описании изменений эритроцитов используется следующая терминология:

- анизоцитоз- выявление в крови эритроцитов различных диаметров. Наблюдается при анемиях различного генеза;

- анизохромия – выявление в мазках крови эритроцитов, окрашенных с неравномерной интенсивностью. Наблюдается при анемиях различного генеза;

- гиперхромия – повышенная интенсивность окраски эритроцитов, связанная с повышенным насыщением их гемоглобином;

- гипохромия – снижение интенсивности окраски эритроцитов, обусловленное снижением содержания в них гемоглобина. Наблюдается при железодефицитной анемии, сильных отравлениях, кровепаразитах.

- пойкилоцитоз –наличие в периферической крови большого разнообразия эритроцитов по форме.

Изменения морфологических характеристик эритроцитов определяются в процессе микроскопии мазка периферической крови. К основным патологическим формам эритроцитам относятся: акантоцит, агглютинация, базофильная зернистость, кодоцит (мишеневидная клетка), дакроцит, полутень эритроцита (эксцентроцит) , эхиноцит ( шишковидная клетка; ягодоподобная клетка; зубчатая клетка) , эллиптоцит (овалоцит), тень эритроцита (гемолизированная клетка), тельца Хайнца, кристаллы гемоглобина, тельца Жолли, гипохромазия, макроцит, микроцит, эритроциты с ядром, грибовидные клетки, полихромазия, эритроцитарные паразиты или вирусные включения, монетные столбики, шистоциты (в том числе фрагменты эритроцитов, шизоциты, пузыревидные клетки, кератоциты), сидеротические включения (тельца Паппенгеймера), сфероцит, стоматоцит, тороцит.

Определение количества лейкоцитов, выведение лейкоцитарной формулы и морфологические особенности лейкоцитов(WBC,White Blood Cells).

Двумя компонентами подсчета лейкоцитов являются общее количество лейкоцитов и подсчет лейкоцитарной формулы. Общее количество лейкоцитов, определяемых в периферической циркуляции, выражают в количестве лейкоцитов на единицу объема крови. Количество лейкоцитов зависит от баланса между образованием в косном мозге и потреблением в тканях, хотя у взрослых животных количество циркулирующих лимфоцитов относительно, независимо от активности костного мозга, поскольку большинство лимфоцитов образуется в периферической лимфоидной ткани. Перераспределение между циркулирующим и маргинальным (пристеночным) пулами в ответ на введение глюкокортикоидов или поступление эндотоксина может влиять на определяемое количество отдельных категорий лейкоцитов, хотя действительное количество клеток не изменяется. Количество клеток, выявляемых в периферической циркуляции, отражает клетки, которые переносятся кровью в один отдельный момент времени, и не всегда точно отражает тканевую концентрацию, в особенности для эозинофилов.

Для определения количества общего количества лейкоцитов используются различные методы. Автоматизированные анализаторы  могут использовать импедансный, оптический метод или метод  количественного анализа лейкоцитарной пленки. Отдельные аппараты сообщают общее количество ядерных клеток, которые могут включать ядерные предшественники эритропоэза; в этом случае количество  лейкоцитов нужно корректировать математически. Другие анализаторы производят эту коррекцию автоматически и регистрируют истинное количество лейкоцитов. К ручным методам относятся подсчет в камере гемоцитометра или оценка количества лейкоцитов при микроскопическом анализе мазка крови. Предложена формула оценки количества лейкоцитов – среднее количество лейкоцитов при 10 х увеличении х 100 . Важно исследовать по меньшей мере 10 полей зрения из всех частей мазка, в том числе конца (зазубренного края) и начала (ровного края) мазка.

В обычной пробе крови можно выявить лейкоциты пяти типов: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы. Все эти типы клеток (а также эритроциты и тромбоциты) развиваются из плюрипотентных стволовых клеток костного мозга. Лейкоциты разделяют на гранулоциты и агранулоциты. Гранулоциты, включая нейтрофилы, эозинофилы и базофилы, имеют цитоплазматические гранулы и дольчатые ядра. К агранулоцитам относятся моноциты и лимфоциты. У этих клеток отсутствуют цитоплазматические гранулы, в целом они имеют круглые или бобовидные ядра с неровными контурами.

При выведении лейкоцитарной формулы определяется относительная доля лейкоцитов каждого типа, выражаемая в процентах. Повышение процентного содержания 1 типа лейкоцитов приводит к снижению процентного содержания лейкоцитов других типов, поэтому результаты, выраженные в виде процентов, может быть сложно интерпретировать. Абсолютные количества лейкоцитов определяют, умножая общее количество лейкоцитов на процент клеток каждого типа в лейкоцитарной формуле. Абсолютные количества – наиболее надежные в отношении клинической интерпретации значения. Для проверки точности автоматизированного подсчета лейкоцитов и лейкоцитарной формулы рекомендуется, как минимум, сканирование мазка крови.

Диагностическое значение имеет морфология лейкоцитов.

Гемоглобин (Hb, Hemoglobin) представляет собой железо-порфириновый белковый комплекс, который занимает центральную  позицию в физиологии как молекула, связывающая, транспортирующая и доставляющая кислород к тканям. Также гемоглобин способен связывать углекислый газ и доставлять его в легкие. Гемоглобин синтезируется в развивающихся эритроцитах, его синтез согласовывается со стадией развития предшественников эритроцитов. Гемоглобин состоит из двух альфа- и двух бета-полипептидных цепей, каждая из которых содержит небелковую простетическую группу (гем), прочно удерживающуюся в гидрофобной впадине молекулы гемоглобина. Синтез цепей гема и глобина тонко скоординирован так, что свободного гема или глобина в цитоплазме развивающихся эритроидных клеток мало или вообще нет. Повторное использование гемоглобина происходит после разрушения эритроцитов внутри или вне сосудистого русла. В физиологических условиях осуществляется внесосудистый гемолиз старых эритроцитов, которые в дальнейшем попадают в селезенку, где фагоцитируются макрофагами.  При внутрисосудистом гемолизе эритроцитов гемоглобин высвобождается в кровоток в свободной форме. Такой гемоглобин обладает высокой окислительной способностью. Плазма крови быстро «очищается» от свободного гемоглобина с помощью нескольких механизмов. Наиболее важным является связывание гемоглобина с гаптоглобином с последующим захватом этого комплекса клетками ретикулоэндотелиальной системы (РЭС). Период полувыведения гемоглобина составляет 20-30 минут. К менее значимым путям обезвреживания свободного гемоглобина относятся:

- окисление гемоглобина в метгемоглобин, который выводится из организма;

- гидролиз метгемоглобина с выходом гемина (гема, содержащего трехвалентное железо – гематин), который образует комплекс с гемопексином, с помощью которого транспортируется в систему мононуклеарных фагоцитов (СМФ);

- связывание гемина с альбумином (метгемальбумин) для транспортировки в СМФ.

При значительном внутрисосудистом гемолизе и при превышении связывающей способности гаптоглобина гемоглобин удаляется из плазмы крови почками путем клубочковой фильтрации. В клетках проксимальных почечных канальцев происходит катаболизм гемоглобина. При превышении порога реабсорбции проксимальными канальцами гемоглобин выводится с мочой (гемоглобинурия). Гемоглобин в макрофагах разрушается путем гидролиза на глобин и гем-фрагменты. Затем цепи глобина расщепляются протеолитическими ферментами до аминокислот. В ходе катаболизма гема образуется биливердин, который в дальнейшем восстанавливается до билирубина. Освободившиеся ионы железа могут быть использованы для синтеза новых молекул гемоглобина или для синтеза других железосодержащих белков.

Гематокрит (НСТ, Hematocrit) – это процентное содержание эритроцитов в крови. Измерение гематокрита можно осуществить методом центрифугирования с использованием микрогематокритных капилляров. Погрешность такого измерения составляет всего ± 1%. Одним из преимуществ гематологических приборов является то, что уровень гематокрита может можно определить расчетным путем с использованием концентрации эритроцитов (RBC) и среднего объема эритроцитов (MCV): HCT (%) = MCV (фл)×RBC (1012 л)/10.

В ответ на стимуляцию симпатической нервной системы, вызванную физической нагрузкой, гипоксией, кровоизлияниями или волнением, происходит сокращение селезенки. Поскольку НСТ в селезенке значительно выше (около 80-90%), чем в периферической крови, то может произойти увеличение этого показателя до 1,3-1,5 раз относительно состояния покоя у кошек, собак, лошадей и некоторых морских млекопитающих. Небольшое постпрандиальное увеличение гематокрита отмечается у собак и овец, и сохраняется в течение нескольких часов, что также объясняется сокращением селезенки. Анестезия (особенно барбитуратами) может приводить к расширению селезенки, в результате чего НСТ опускается ниже референсного предела. Сопоставление результатов содержания гемоглобина и концентрации белка в плазме крови может быть максимально информативным. Определение гематокрита – это самый простой и самый точный метод для выявления анемии.

НСТ

Белок общий

Повышен

Норма

Понижен

Повышен

Дегидратация

Увеличение синтеза глобулинов;

анемия, маскированная дегидратацией

Анемия при воспалительных заболеваниях;

множественная миелома;

лимфопролиферативные заболевания

Норма

Сокращение селезенки;

первичный или вторичный эритроцитоз;

гипопротеинемия на фоне дегидратации

Норма

Повышенное разрушение эритроцитов;

снижение продукции эритроцитов;

хроническая потеря крови

Понижен

Сочетание сокращения селезенки и причин, ведущих к потере белка

Потеря белка через ЖКТ;

протеинурия;

тяжелые заболевания печени;

васкулит

Массивная текущая или недавняя потеря крови;

чрезмерная гидратация

Значение гематокрита следует сопоставлять с состоянием гидратации пациента и с учетом любого возможного влияния на сокращение селезенки.

Эритроцитарные индексы (MCV, MCH, MCHC)

MCV (Mean Cell Volume) представляет собой средний объем эритроцита, измеренный в фемтолитрах (фл). Расчетный показатель: MCV (фл) = (НСТ × 10) ÷ RBC (млн.)

Ретикулоцитоз является наиболее распространенной причиной макроцитоза (увеличения MCV), особенно при появлении в крови ранних форм ретикулоцитов (более крупных клеток). Молодые животные большинства видов имеют небольшие эритроциты, т. е. отмечается микроцитоз (низкий MCV). Микроцитоз может развиваться при дефиците железа, который чаще встречается у молодых животных. Дополнительное деление клеток происходит до достижения критической концентрации гемоглобина в цитоплазме, необходимой для прекращения синтеза ДНК и деления клеток. Впоследствии образуются более мелкие клетки. Микроцитоз  наблюдается у собак при наличии портосистемных венозных шунтов. У здоровых собак «азиатских» пород (акита-ину, чау-чау, шарпей и шиба-ину) часто обнаруживаются микроцитарные эритроциты. Собаки породы грейхаунд обычно имеют более высокое значение MCV, по сравнению с другими породами борзых, что может быть обусловлено значительным сокращением продолжительности жизни эритроцитов (приблизительно 55 дней). Факторы, препятствующие синтезу нуклеиновых кислот, приводят к ингибированию клеточного деления и, таким образом, образованию более крупных клеток. У собак породы ризеншнауцер была обнаружена наследственная макроцитарная анемия, селективная мальабсорбция кобаламина (витамина B12). Врожденный макроцитоз зарегистрирован у пуделей.

MCH (Mean Cell Hemoglobin) – среднее содержание гемоглобина в эритроцитах, рассчитанное в пикограммах (пг). Расчетный показатель: MCH (пг) = (концентрация Hb × 10) ÷ RBC (млн.)

MCH не дает дополнительных преимуществ при интерпретации клинического анализа, так как зависит от MCV и МСНС. Например, более мелкие эритроциты содержат меньше Hb, таким образом, значение MCH будет снижено. Величина MCH, как правило, прямо коррелирует с величиной MCV, за исключением животных, у которых имеются макроцитарные гипохромные эритроциты. В некоторых случаях при железодефицитной анемии MCH может уменьшаться до снижения МСНС. MCH обычно не используется в классификации анемий. Если динамика значений МСНС и MCH отличается, то интерпретация концентрации гемоглобина должна основываться на значении МСНС, поскольку этот индекс корректируется исходя из объема клеток.

МСНС (Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration) – средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах. Расчетный показатель: МСHС (г/дл) = (Концентрация Hb (пг)×100) ÷ HСT (%)

МСНС является наиболее точным эритроцитарным индексом, поскольку его расчет не зависит от количества эритроцитов. Тем не менее, если НСТ является расчетным значением (как это происходит в автоматических гематологических анализаторах), то точность МСНС может снижаться. Значение МСНС используется при классификации анемий. Увеличение МСНС, как правило, происходит в результате гемолиза (in vitro или in vivo). В процессе определения концентрации гемоглобина учитывается как внутри- так и внеклеточный гемоглобин, но в формуле расчета МСНС предполагается, что весь Hb является внутриклеточным, что приводит к ложному завышению показателя. Истинный рост значения МСНС обычно не происходит, поскольку содержание гемоглобина в клетке является ограниченной величиной. МСНС может снижаться при ретикулоцитозе, потому что в ретикулоцитах содержится меньше гемоглобина. Гипохромия (то есть низкое значение МСНС) имеет место в некоторых случаях при дефиците железа. У кошек при дефиците железа могут не обнаруживаться гипохромные эритроциты. Значение МСНС может не снижаться у собак при дефиците железа (при измерении на некоторых анализаторах).

Тромбоциты (PLT, Platelets)– это безъядерные кровяные пластинки (осколки мегакариоцитов), являющиеся одним из факторов первой линии защиты от кровотечения в местах повреждения сосудов. Также тромбоциты являются основными компонентами крови, участвующими в образовании тромба, в воспалительных реакциях и неопластических процессах за счет своей способности к синтезу белков. Тромбоциты имеют рецепторы на клеточной мембране, которые воспринимают внешние сигналы и передают их по сложной системе взаимодействия биомолекул. Эта система включает в себя ионы, белки, нуклеотиды и фосфолипиды. В результате тромбоциты приобретают способность к адгезии, агрегации, а затем к высвобождению гранул и прокоагулянтной активности. Когда молекулы, специфически распознаваемые тромбоцитами (агонисты), связываются с их рецепторами, то они вызывают передачу сигналов, приводящую к структурным изменениям гликопротеинов на поверхности мембран тромбоцитов, которые затем способствуют связыванию белков, опосредующих адгезию и агрегацию тромбоцитов. В свою очередь, связывание адгезивных протеинов с рецепторами приводит к увеличению высвобождения гранул из тромбоцитов, образованию фибрина и ретракции сгустка. Перекрестное взаимодействие между рецепторами тромбоцитов и сигнальными молекулами является ключевым фактором активации тромбоцитов.

У кошек размер тромбоцитов почти в два раза больше, чем у других видов животных. Кроме того, макротромбоциты обнаруживаются при многих гематологических нарушениях у кошек. Появление в крови макротромбоцитов не является патогномоничным признаком, но это приводит к ложному занижению числа тромбоцитов при автоматическом подсчете. В случаях уменьшения количества тромбоцитов ниже референсных значений производится дополнительное микроскопическое исследование мазка крови. При этом ветеринарный гематолог обязательно указывает наличие макротромбоцитов.

При агрегации тромбоцитов также может происходить ложное занижение результатов при автоматическом подсчете тромбоцитов. Хотя агрегация может происходить у любых видов животных, данное явление наиболее характерно для кошек.

При исследовании количества тромбоцитов в качестве антикоагулянта обычно используется ЭДТА . Сбор образцов крови от кошек в контейнеры, с цитратом в качестве антикоагулянта, содержащие ингибиторы тромбоцитов, такие как теофиллин, аденозин и дипиридамол, уменьшает агрегацию тромбоцитов и позволяют избежать занижения количества тромбоцитов, но при этом может происходить изменение морфологии других клеток крови, что ведет к некорректному их подсчету.

Гигантские тромбоциты можно обнаружить в мазках крови при тромбоцитопении, вызванной чрезмерным потреблением или разрушением тромбоцитов без изменения костномозговой продукции. Фрагменты тромбоцитов (микротромбоциты) менее чем 1 мкм в диаметре отмечаются при железодефицитной анемии (часто сопровождаемой тромбоцитозом), аплазии костного мозга, иммуноопосредованной тромбоцитопении (ассоциировано с активацией тромбоцитов у собак) или как артефакт (in vitro) при хранении крови в контейнере с ЭДТА в течение более 24 часов.

Тромбоциты с пониженной грануляцией, вакуолизацией или с менее интенсивной окраской можно обнаружить в тех ситуациях, когда активация тромбоцитов уже произошла in vivo (например, при FeLV, ДВС-синдроме) или in vitro (например, при нарушении условий получения или хранения образца).

У собак породы грейхаунд, как правило, наблюдается более низкое количество тромбоцитов в крови по сравнению с другими породами собак. Спонтанные петехии или экхимозы обычно не происходят до тех пор, пока количество тромбоцитов ниже 20х109л. Превышение референсного предела количества тромбоцитов (как правило, более чем 800х109л) указывает на тромбоцитоз. Тромбоцитоз, связанный с воспалительным процессом (реактивный тромбоцитоз), как правило, не связан с высоким риском развития тромбоза. Однако тромбоцитоз, связанный с миелопролиферативными заболеваниями, может увеличить риск развития тромбоэмболических заболеваний.

Подготовка пациента: Перед проведением исследования животное должно быть выдержано на голодной диете минимум 12 часов.

Показания: является одним из общих настоятельно рекомендуемых исследований, проводимых для любого больного животного; является одним из общих исследований, проводимых с целью профилактического скрининга любого стареющего животного.

Противопоказания: не известны.

Метод отбора биоматериала: венепункция.

Преаналитика:

1. Взятие крови – пробирка с сиреневой крышкой / Калий ЭДТА. Для мелких животных можно использовать пробирку с розовой крышкой.

2. Заполнить пробирку кровью СТРОГО до отметки на этикетке.

3. Осторожно перевернуть пробирку 7-10 раз для перемешивания крови с антикоагулянтом.

4. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.

 5. Стабильность пробы: 3 дня при +2°С…+8° С.

6. Температурный режим транспортировки  +2℃…+8℃ (синий пакет)

Интерпретация результата: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Гемоглобин - повышение уровня:

Относительное:

• гемоконцентрация;

• сокращение селезенки.

Абсолютное:

• гипоксия (заболевания сердца, легких);

• эритропоэтин-продуцирующие опухоли;

• первичный эритроцитоз (истинная полицитемия).

Понижение уровня:

Анемия хронических заболеваний.

Снижение синтеза эритропоэтина (хроническая болезнь почек).

Потеря крови (травма, хирургическое вмешательство, неоплазия, язвы желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), наличие гельминтов, нарушение системы гемостаза).

Гемолиз (иммунообусловленный – первичный или вторичный, инвазия гемопаразитов, отравление цинком и медью, фрагментация эритроцитов (в т. ч. при ДВС-синдроме), действие змеиного яда).

Дефицит железа.

Эндокринные заболевания (гипотиреоз).

Заболевания костного мозга (апластическая анемия, инфекционные заболевания, токсическое повреждение костного мозга, истинная эритроцитарная анемия, миелопролиферативные заболевания).

Голодание (редко).

Гематокрит - повышение уровня:

Относительное:

• гемоконцентрация;

• сокращение селезенки.

Абсолютное:

• гипоксия (заболевания сердца, легких);

• эритропоэтин-продуцирующие опухоли;

• первичный эритроцитоз (истинная полицитемия).

Понижение уровня:

Анемия хронических заболеваний.

Снижение синтеза эритропоэтина (хроническая болезнь почек).

Потеря крови (травма, хирургическое вмешательство, неоплазия, язвы ЖКТ, инвазии гельминтов, нарушения системы гемостаза).

Гемолиз (иммунообусловленный – первичный или вторичный, инвазия гемопаразитов, отравление цинком и медью, фрагментация эритроцитов (в т. ч. при ДВС-синдроме), действие змеиного яда).

Дефицит железа.

Эндокринные заболевания (гипотиреоз).

Заболевания костного мозга (апластическая анемия, инфекционные заболевания, токсическое повреждение костного мозга, истинная эритроцитарная анемия, миелопролиферативные заболевания).

Голодание (редко).

Эритроциты- повышение уровня:

Относительное:

• гемоконцентрация;

• сокращение селезенки.

Абсолютное:

• характерно для некоторых пород собак (грейхаунд);

• гипоксия (сердечно-легочные заболевания);

• опухоли, продуцирующие эритропоэтин;

• первичный эритроцитоз (истинная полицитемия).

Понижение уровня:

Физиологическое (пожилые и новорожденные животные).

Анемия хронических заболеваний.

Снижение синтеза эритропоэтина (хроническая болезнь почек).

Кровопотеря (травма, хирургическое вмешательство, неоплазия, язвы ЖКТ, наличие гельминтов, нарушение системы гемостаза).

Гемолиз (иммунообусловленный – первичный или вторичный, инвазия гемопаразитов, отравление цинком и медью, фрагментация эритроцитов (в т. ч. при ДВС-синдроме), действие змеиного яда).

Дефицит железа.

Эндокринные заболевания (гипотиреоидизм).

Заболевания костного мозга (апластическая анемия, инфекционные заболевания, токсическое повреждение костного мозга, истинная эритроцитарная анемия, миелопролиферативные заболевания).

Голодание (редко).

Эритроцитарные индексы – МСV. Повышение показателей:

Ретикулоцитоз.

Инфекционные заболевания (FeLV).

Как вариант нормы у грейхаундов.

Наследственный макроцитоз у собак породы пудель.

Ложное завышение (при аглютинации эритроцитов, повышение осмолярности in vivo).

MCHC

Ложное завышение:

• внутрисосудистый гемолиз или гемолиз in vitro;

• хилез;

• непропорционально количество антикоагулянта (ЭДТА);

• присутствие большого количества телец Гейнца;

• значительный лейкоцитоз;

• снижение осмолярности (in vivo).

Выраженный сфероцитоз.

Понижение показателей:

МСV

Дефицит железа.

Наличие портосистемного шунта.

Печеночная недостаточность.

Как вариант нормы у «азиатских» пород собак.

Молодой возраст.

Ложное занижение (непропорционально количество ЭДТА, снижение осмолярности in vivo).

MCHC

Ретикулоцитоз (необходимо повышение > 20% для заметного снижения МСНС).

Дефицит железа.

Печеночная недостаточность (редко).

Тромбоциты - повышение уровня:

Реактивный тромбоцитоз (воспалительный процесс, дефицит железа, травма или хирургическое вмешательство рецидивирующий тромбоцитоз).

Неоплазии.

Гиперадренокортицизм.

Спленэктомия.

Понижение уровня:

Иммунообусловленое разрушение тромбоцитов.

Повышенное потребление (кровотечение, инфекционные заболевания, тромбоэмболическая болезнь в т. ч. ДВС-синдром).

Гемодилюция.

Нарушение образования тромбоцитов (заболевания костного мозга).

Лейкоциты - повышение уровня:

Воспаление.

Некроз тканей.

Влияние кориткостероидов (гиперадренокортицизм, терапия глюкокортикоидами, эндогенное высвобождение кортизола в результате стресса или заболевания).

Острый лимфобластный лейкоз.

Хронический лимфоцитарный лейкоз.

Острый, хронический миелоидный лейкоз.

Дефицит молекул адгезии лейкоцитов.

Понижение уровня:

Чрезмерная потребность в клетках (например, сильное воспаление и/или эндотоксемия).

Снижение продукции (апластическая анемия, иммунообусловленное разрушение клеток-предшественников).

Алейкемический (сублейкемический) острый лейкоз.

Инфекционные заболевания (парвовироз, FeLV, FIV, чума плотоядных и др.).

Действие некоторых лекарственных веществ.

Миелодиспластический синдром.

Как вариант нормы у собак породы бельгийская овчарка и грейхаунд.

Циклическая нейтропения (гемопоэз).

Форма выдачи результата: количественный тест

Единицы измерения:

 Гемоглобин - г/л.

Лейкоциты-  тыс/мкл.

Тромбоциты - тыс/мкл.

Эритроцитарные индексы: MCV – фл, MCH – пг, MCHC – г/дл.

Эритроциты -  млн/мкл

Гематокрит –  %.

Референсные значения:  

гемоглобин

Собаки старше 1 года- 120-190; собаки 0-3 мес- 90-120 ; собаки – 3-12 мес;

Кошки старше 1 года 80-150 ; кошки 0-3 мес; кошки 3-12 мес – 98-120

 Гематокрит

Собаки старше года – 37-54 ;  собаки 0-3 мес. – 29-37 ; собаки 3-12 мес.  – 37-48;

Кошки старше года – 28-47; кошки 0-3 мес. – 25-35; кошки 3-12 мес. – 34-37

Эритроциты  

Собаки старше 1 года – 5,5-8,5 ; собаки 0-3 мес. – 3,6-5,1 ; собаки 3-12 мес. – 5,3 -7,4;

Кошки старше 1 года – 5,0-10,0 ; кошки  0-3 мес. – 4,7-6,95 ; кошки 3-12 мес. – 7,2 - 8,1

Эритроцитарные индексы-

Собаки: MCV – 62-73 фл, MCH – 21-25 пг, MCHC – 32-38 г/дл; Кошки: MCV – 39-53 фл, MCH – 13-20 пг, MCHC – 30-36 г/дл

Тромбоциты

Собаки: 140-480; Кошки: 151-600

Лейкоциты:

Собаки: 5,5-16,0; Кошки: 5,5-18,0.

Источники:

1) Veterinary hematology and clinical chemistry / edited by Mary Anna Thrall ... [et al.]. – 2nd ed.

2) Clinical pathology for the veterinary team / Andrew J. Rosenfeld, Sharon Dial.

3) Ш.Ваден, Д.Нолл, Ф. Смит, Л.Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.