Поиск анализа

№AN119LF, Лейкоцитарная формула (микроскопия мазка крови)

Срок исполнения

1 день (плюс 1-2 для регионов)

*указанный срок не включает день взятия биоматериала

Исследуемый материал

Цельная кровь

Метод определения

Микроскопия мазка цельной крови

            

Общее количество лейкоцитов является совокупностью количества всех субпопуляций лейкоцитов; может сильно варьировать в зависимости от особенностей кинетики каждой из них, поэтому всегда требуется дифференциальный подсчет. Двумя компонентами подсчета лейкоцитов являются общее количество лейкоцитов и подсчет лейкоцитарной формулы.

  1. Подготовка пациента
  2. Показания и противопоказания
  3. Интерпретация и форма выдачи результата

Общее количество лейкоцитов, определяемых в периферической циркуляции, выражают в количестве лейкоцитов на единицу объема крови. Количество лейкоцитов зависит от баланса между образованием в костном мозге и потреблением в тканях, хотя у взрослых животных количество циркулирующих лимфоцитов относительно независимо от активности костного мозга, поскольку большинство лимфоцитов образуется в периферической лимфоидной ткани. Перераспределение лейкоцитов между циркулирующим и маргинальным (пристеночным) пулами в ответ на введение глюкокортикоидов или поступление эндотоксина может влиять на определяемое количество отдельных категорий лейкоцитов и их общее количество, хотя действительное количество клеток не изменяется. Количество клеток, выявляемых в периферической циркуляции, отражает клетки, которые переносятся кровью в один отдельный момент времени, и не всегда точно отражает тканевую концентрацию, в особенности для эозинофилов. Для определения общего количества используются различные методы.

К ручным методам относятся подсчет в камере гемоцитометра или оценка количества лейкоцитов при микроскопическом анализе мазка крови. Предложена формула оценки количества лейкоцитов – среднее количество лейкоцитов при 10х увеличении х100. Важно исследовать не менее 10 полей зрения из всех частей мазка, в том числе конца (зазубренного края) и начала (ровного края) мазка.

В обычной пробе крови можно выявить лейкоциты пяти типов: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы, базофилы. Все эти типы клеток (а также эритроциты и тромбоциты) развиваются из плюрипотентных стволовых клеток костного мозга. Повышение образования лейкоцитов путем воздействия цитокинов и факторов роста может запускаться различными состояниями, в том числе инфекциями, повреждением тканей, аллергическими реакциями и иммуноопосредованными заболеваниями. Кроме того, повреждение ДНК может приводить к неконтролируемой пролиферации гемопоэтических клеток, что приводит либо к лимфоме, либо к лейкозу. Острый лейкоз (лимфобластный или миелоидный) возникает, когда пролиферирующие клетки-предшественники не способны дифференцироваться, и их развитие останавливается на уровне бластов.

Лейкоциты разделяют на гранулоциты и агранулоциты. Гранулоциты, включая нейтрофилы, эозинофилы и базофилы, имеют цитоплазматические гранулы и дольчатые ядра. К агранулоцитам относятся моноциты и лимфоциты. У этих клеток отсутствуют цитоплазматические гранулы, в целом они имеют круглые или бобовидные ядра с неровными контурами.

Нейтрофилы являются первой линией защиты организма при реакции почти на любой воспалительный стимул, но в основном на бактериальные агенты. Способны к активному хемотаксису, связыванию, фагоцитозу и лизису бактериальных клеток. Содержание гранул является медиатором дальнейшего воспаления. Все нейтрофилы в периферическом кровотоке подразделяются на циркулирующий и маргинальный пул (в покое 50\50). Маргинальный пул- скопление нейтрофилов в сосудах легких, в меньшей степени селезенке, печени и красном костном мозге, не связанные напрямую с адгезией к капиллярной стенке. При гематологическом исследовании учитывают только циркулирующий пул. Нормальные колебания количества нейтрофилов в кровотоке могут являться отражением периодического перераспределения нейтрофилов между пулами.

Эозинофилы являются важным компонентом цитокин- опосредованных реакций против крупных паразитов. При контакте с возбудителями, не фагоцитируют его, а дегранулируют с высвобождением большого количества внеклеточных оксидантов, катионного протеина и нейротоксина. Являются главными медиаторами реакций гиперчувствительности 1 типа. Также, эозинофилы участвуют в модуляции Т-клеточного ответа.

Базофилия крайне редка, обычно сопровождает эозинофилию, ассоциирована с IgE- опоросредованными заболеваниями. Описана как паранеопластический синдром при мастоцитоме, эссенциальной тромбоцитемии у собак. Крайне редко встречается базофильноклеточный рак.

Моноциты - циркулирующие клетки мононуклеарно-фагоцитарной системы, после миграции в ткани дифференцируются до тканевых марофагов, которые отличаются большой продолжительностью жизни.

Лимфоциты - клетки с наиболее высоким ядерно-цитоплазматическим отношением. Размеры, окраска цитоплазмы и ядра могут значительно варьировать. Гранулы обычно не визуализируются. На основании морфологии нельзя различить Т- и В- лимфоциты и NK- клетки.

При выведении лейкоцитарной формулы определяется относительная доля лейкоцитов каждого типа, выражаемая в процентах. Повышение процентного содержания 1 типа лейкоцитов приводит к снижению процентного снижения лейкоцитов содержания лейкоцитов других типов, поэтому результаты, выраженные в виде процентов, может быть сложно интерпретировать. Абсолютные количества лейкоцитов определяют, умножая общее количество лейкоцитов на процент клеток каждого типа в лейкоцитарной формуле. Абсолютные количества – наиболее надежные в отношении клинической интерпретации значения.

Сроки исполнения: 1 день (плюс 1-2 для регионов).

Исследуемый аналит: цельная кровь.

Метод исследования: микроскопия мазка цельной крови.

Показания:

  • маркер воспаления или аллергических реакций;
  • маркер новообразования кроветворной ткани/лейкоза;
  • оценка на наличие признаков иммуносупрессии;
  • оценка функции костного мозга.

Противопоказания: неизвестны.

Подготовка пациента: перед проведением исследования животное должно быть выдержано на голодной диете минимум 12 часов.

Метод отбора: венепункция.

Преаналитика:

  • взятие крови - пробирка с розовой крышкой (с ЭДТА) 0,5 мл; для крупных собак можно использовать пробирку с сиреневой крышкой (с ЭДТА) 2 мл;
  • заполнить пробирку кровью СТРОГО до отметки на этикетке;
  • осторожно перевернуть пробирку 7-10 раз для перемешивания крови с антикоагулянтом;
  • стабильность пробы 3 дня при температуре +2℃…+8℃;
  • заполнить направительный бланк, указав код клиента;
  • температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃…+8℃.

Количество лейкоцитов может быть ложно завышено при гиперлипидемии или наличии агрегации тромбоцитов.

Использование плохо перемешанной крови или крови со сгустками может занижать количество лейкоцитов.

Артефакты, связанные со старением образца при длительном или неправильном хранении, могут влиять на токсичность микроскопической классификации лейкоцитов.

Интерпретация: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Наиболее часто при интерпретации общего анализа крови мы сталкиваемся с лейкоцитозом. Лейкопении встречаются реже и связаны, как правило, с вирусными заболеваниями. Понимая, что из всех лейкоцитов наибольшая доля приходится на нейтрофилы, то вполне корректно применение определения лейкоцитоза, что это увеличение нейтрофилов в крови. По механизму развития различают абсолютный и относительный лейкоцитозы. Соответственно один вид будет подаваться лечению антибиотиками, а второй нет.

Повышение уровня:

  • Воспаление.
  • Некроз тканей.
  • Влияние кортикостериодов (гиперадренокортицизм,терапия глюкокортикоидами,эндогенное высвобождение кортизола в результате стресса или заболевания).
  • Острый лимфобластный лейкоз.
  • Хронический лимфоцитарный лейкоз.
  • Острый, хронический миелоидный лейкоз.
  • Дефицит молекул адгезии лейкоцитов.

Понижение уровня:

  • Чрезмерная потребность в клетках (например, сильное воспаление и/или эндотоксемия).
  • Снижение продукции (апластическая анемия, иммунообусловленное разрушение клеток-предшественников).
  • Алейкемический (сублейкемический) острый лейкоз.
  • Инфекционные заболевания (парвовироз, FeLV, FIV, чума плотоядных и др.).
  • Действие некоторых лекарственных веществ.
  • Миелодиспластический синдром.
  • Как вариант нормы у собак породы бельгийская овчарка и грейхаунд.
  • Циклическая нейтропения (гемопоэз).

Форма выдачи результата: количественный

Единицы измерения: тыс/мкл.

Референсные значения:

  • Собаки: 5,5-16,0 тыс/мкл
  • Кошки: 5,5-18,0 тыс/мкл
  • Лошадь-6,0-13,0 тыс/мкл
  • Хорек- самка-3,5-8,6; самец-5,5-17,0 тыс/мкл
  • МРС-4,0-13,0 тыс/мкл
  • КРС-4,0-12,0 тыс/мкл
  • Кролик-5,0-12,0 тыс/мкл
  • Крыса-5,0-23,0 тыс/мкл
  • Морская свинка-7,0-14,0 тыс/мкл
  • Мышь-4,0-12,0 тыс/мкл
  • Песчанка-7,5-10,9 тыс/мкл
  • Хомяк-7,0-10,0 тыс/мкл
  • Шиншилла-5,4-15,6 тыс/мкл
  • Тигр-6,2-11,05 тыс/мкл
  • Леопард-8,0-17,0 тыс/мкл

Список источников:

  • Clinical Pathology for the Veterinary Team. Andrew J. Rosenfeld. Sharon M. Dial. Edition first published 2010;
  • Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Mary Anna Thrall. Glade Weiser. Robin W. Allison. Terry W. Campbell. Second Edition, 2012;
  • Ш.Ваден,Д.Нолл, Ф. Смит, Л.Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.