№AN517, Иммуногистохимия (дополнительное антитело)

Иммуногистохимия является дополнительным методом исследования, применяемым в патологической анатомии при диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований, когда постановка диагноза по гистологическим препаратам не представляется возможной или требуется уточнение клинически важных молекулярных параметров опухоли.

1. Сроки исполнения
2. Показания и противопоказания
3. Форма выдачи результата

В основе иммуногистохимических (ИГХ) методов лежит принцип специфического взаимодействия тканевых и клеточных антигенов со специально полученными антителами, имеющими на себе разнообразные метки. Т.е. это метод исследования, основанный на выявлении наличия и локализации определенных антигенов в клетках и тканях при помощи специфических антител.

В ряде случаев проведения обычного гистологического исследования биопсии бывает недостаточно, что объясняется следующими причинами:

• опухоль имеет крайне неспецифичное микроскопическое строение, которое не позволяет поставить окончательный диагноз.

Например, диагноз практически всех лимфом и лейкозов (более 70 видов!) ставится после ИГХ исследования, а в части случаев дополнительно требуется молекулярно-генетическое исследование; в свою очередь, за гистологическим диагнозом «мелкокруглоклеточная опухоль» может скрываться до 13 различных злокачественных опухолей, каждая из которых имеет свой прогноз и требует индивидуального плана химиолучевого лечения – единственным методом, способным помочь врачу в дифференцировании этой группы опухолей, является ИГХ исследование.

Для ИГХ-анализа опухолей и их метастазов применяется широкий спектр маркеров, к которым можно отнести:

• Тканеспецифичные (белки промежуточных филаментов, компоненты базальной мембраны, рецепторы и др.).
• Цитоспецифичные (CD-антигены лейкоцитов, миоглобин, гладкомышечный актин и др.).
• Опухолеассоциированные антигены.
• Опухолевые маркеры.
• Гормоны.
• Ферменты и белковые продукты клеточных онкогенов, генов-супрессоров и т.д.

Некоторые ИГХ-маркеры имеют специфическую ультраструктурную локализацию, другие – располагаются либо на различных органеллах, либо в цитозоле или внеклеточно.

Сроки исполнения: до 2-х месяцев.

Исследуемый аналит: биоптаты тканей и органов, либо готовый парафиновый блок.

Метод исследования: иммуногистохимический (обработка срезов маркированными специфическими антителами к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном).

Показания:

1. Диагностика:
• окончательное (реже промежуточное) установление диагноза опухолевого процесса (различные варианты рака, саркомы мягких тканей, меланома, типирование лимфом и лейкозов),
• уточнение степени злокачественности опухоли (напр., нейроэндокринной опухоли), что будет определять прогноз заболевания,
• дифференциальная диагностика опухолей и неопухолевых процессов,
• определение органной принадлежности метастаза с неизвестной первичной локализацией (применимо не для всех опухолей!),
• дифференцирование множественных опухолевых процессов (наличие у пациента 2 и более разных опухолей).
2. Лекарственная чувствительность:
• рецепторы стероидных гормонов (рецепторы эстрогенов, рецепторы прогестерона, рецепторы андрогенов) – рак молочной железы, рак тела матки (эндометрия), другие опухоли;
• белок Her2/neu – рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря;
• рецепторы соматостатина 2А и 5 типов – нейроэндокринные опухоли (карциноиды);
• PD-L1 – немелкоклеточный рак легкого, беспигментная меланома, другие опухоли;
• ALK – немелкоклеточный рак легкого;
• ROS1 – немелкоклеточный рак легкого;
• микросателлитная нестабильность (MSI) – рак толстой кишки, другие опухоли;
• индекс пролиферативной активности (Ki-67) – различные виды злокачественных опухолей.

Противопоказания: общие противопоказания для седации (в случае невозможности проведения процедуры без ее применения). Ограничениями для проведения гистологического исследования могут стать нарушения свертываемости крови и аллергия на анестетики (эти факторы не позволят провести биопсию), тромбоцитопения, сердечная недостаточность.

Преаналитика:

Биоптат поместить в контейнер (гистопот), заполненный соответствующим объемом забуференного 10% раствора формалина (* либо прислать 1 готовый парафиновый блок).

Соотношение биоматериал: формалин должно быть не менее 1:10.

Подписать контейнер – вид, кличка животного, фамилия владельца. Заполнить все графы направительного бланка с ОБЕИХ сторон!

Обязательно указать перечень антител, с которыми необходимо провести ИГХ.

Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃...+8℃ (синий пакет). Не замораживать!

Форма выдачи результата: бланк с макроописанием присланного биоптата, готовые гистологические препараты – парафиновые блоки, стекла с окрашенными срезами (с необходимыми маркерами).