№AN305БАЛ

Бордетелла (Bordetella bronchiseptica)

Срок исполнения
1 день (плюс 1-2 дня для регионов)* указанный срок не включает день взятия биоматериала
Исследуемый материал
жидкость, полученная в результате бронхо-альвеолярного лаважа (БАЛ)
Метод определения
ПЦР в режиме Real time

B. bronchiseptica - грамотрицательная коккоподобная подвижная палочка, размером 0,4-0,6; 1,5-2,5 мкм, аэроб, спор и капсул не образует, но вирулентные штаммы образуют микрокапсулу. Основными факторами вирулентности возбудителя являются липополисахариды клеточной стенки, фимбрии, токсины, микрокапсула, пертактин подобные белки. К основным токсинам, продуцируемым B. Bronchiseptica относятся: трахеальный цитотоксин, дермонекротический токсин, аденилатциклаза-гемолизин, эндотоксин. Клинически заболевание проявляется кашлем, усиливающимся при волнении, физических нагрузках, пальпации гортани или трахеи. При отсутствии лечения достаточно быстро развивается респираторная инфекция с выделениями из носа и глаз, конъюнктивитом, рвотой, температурой и общим угнетением. К инфекции также восприимчивы человек и некоторые другие животные, такие как дикие хищники, свиньи, грызуны, а также лошади. Существует много штаммов B. bronchiseptica, которые различаются вирулентностью и кругом хозяев. Bordetella bronchiseptica может сохраняться во внешней среде в течение минимум 10 дней, а также размножаться в естественных водоемах, однако микроорганизм восприимчив к действию большинства дезинфектантов.

 Основным путем передачи инфекции B. bronchiseptica является воздушно-капельный, однако возможна передача возбудителя через контаминированные предметы или воду. Микроорганизм характеризуется высокой контагиозностью. При вдыхании B. bronchiseptica прикрепляется к ворсинкам эпителия дыхательных путей и секретирует токсины, вызывающие повреждение респираторного эпителия. Капсула защищает бациллу от фагоцитоза и действия системы комплемента. Инфекция B. bronchiseptica сопровождается нарушением функции клеток, повышенной секрецией слизистого секрета, а также нарушением иммунного барьера, что способствует развитию оппортунистических вирусных и бактериальных инфекций. Выраженность клинических симптомов болезни может варьировать в зависимости от штамма возбудителя, особенностей иммунного ответа хозяина, а также наличия сопутствующих инфекций. Инкубационный период составляет от двух до десяти дней. Могут наблюдаться ринит и ринотрахеит, серозные и слизисто-гнойные выделения из носа, чихание, хрипы при дыхании и персистирующий тяжелый кашель.

 Выделение B. bronchiseptica инфицированными животными происходит периодически в течение минимум одного месяца, иногда – нескольких месяцев после инфицирования. Персистенция инфекции может быть связана со способностью микроорганизма избегать действия факторов иммунной системы и выживать в фагоцитах.

Подготовка пациента: утром перед исследованием животное не кормить. Так как процедура бронхо-альвеолярного лаважа проводится под общей седацией, пациента необходимо подготовить в соответствии с соблюдением всех требований, в зависимости от группы анестезиологического риска. Биоматериал отбирается до применения местных и системных лекарственных препаратов. Техника взятия должна проводиться с соблюдением правил асептики/антисептики для минимизирования возможной контаминации из верхних дыхательных путей.

Показания:

- взятие образца у лошадей во время бронхоскопии, а также для диагностики в тех случаях, когда у животного наблюдается кашель, затрудненное дыхание, выявляются патологические изменения в легких при рентгенографическом исследовании или другие признаки заболевания респираторного тракта;

- при необходимости получения образцов у животных с признаками таких респираторных заболеваний, при которых результат других, менее инвазивных процедур (соскоб эпителиальных клеток из носовой полости), оказался не информативен.

Противопоказания: неизвестны.

Метод отбора биоматериала: Бронхо-альвеолярный лаваж (БАЛ) – это метод получения образца жидкости с диагностической целью из мелких дыхательных путей – альвеол и в некоторых случаях из интерстициальных тканей. Лаваж (смыв) обычно выполняют во время бронхоскопии , что позволяет провести визуальный осмотр дыхательных путей и осуществить прицельный смыв с определенных долей легких. Кроме того, БАЛ можно выполнять и без бронхоскопа. Стерильный физиологический раствор вводят в легкие в достаточном объеме, чтобы он заполнил альвеолы. Затем раствор вместе с клетками и жидкостью с эпителиальной выстилки легких аспирируют обратно.

Преаналитика:

1. Провести процедуру взятия бронхоальвеолярного лаважа.

2. Перенести полученную жидкость в пробирку с сиреневой крышкой / Калий ЭДТА.

3. После внесения жидкости, осторожно перевернуть пробирку 6-7 раз для перемешивания материала с антикоагулянтом.

4. Заморозить в вертикальном положении при -17°С…-23°С.

5. Пробирку маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, указать локализацию.

6. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.   

7. Температурный режим транспортировки в лабораторию -17℃… -23℃ (красный пакет).

ВНИМАНИЕ! Минимальный объем БАЛ необходимый для исследования - 1 мл                                                                 

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: качественный метод. Обнаружение/ не обнаружение в исследуемой пробе ДНК   Bordetella bronchiseptica или концентрация ДНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

Литература:

1) Veterinary Clinical Parasitology. Eighth Edition. Anne M. Zajac; Gary A. Conboy. 2012 by John Wiley & Sons, Inc;

2) Equine Clinical Pathology. Edited by Raquel M. Walton. C 2014 by John Wiley & Sons, Inc;

3) Interpretation of Equine Laboratory Diagnostics. Edited by Nicola Pusterla, Jill Higgins/ 2018 John Wiley & Sons, Inc.