Поиск анализа

№AN505ГИЭ, Цитологическое исследование стандартное (ТИБ/ТИАБ, глубокий соскоб, мазок-отпечаток, жидкость с ЭДТА (не подходящая для AN501)

Срок исполнения

до 4 дней (плюс 1-2 дня для регионов)

*указанный срок не включает день взятия биоматериала

Исследуемый материал

содержимое гематом, сером, кист; бронхиальный секрет, пунктат из новообразований паренхиматозных органов и кожи, клетки эпидермиса и дермы

Метод определения

микроскопическое исследование мазков (на стекле) после окраски

            

Микроскопия мазка крови является одним из методов диагностики векторных (трансмиссивных заболеваний), зачастую на приеме в клинике. Наиболее распространенные из них: анаплазмоз, эрлихиоз, бабезиоз, гепатозооноз, цитозооноз кошек, дирофиляриоз, гематропные микоплазмозы. Реже чума собак, токсоплазмоз, лейшманиоз.

  1. Подготовка пациента
  2. Показания и противопоказания
  3. Интерпретация и форма выдачи результата

Цитологическое исследование проводится из поражений и новообразований кожи и внутренних органов с целью выявления и дифференциации воспалительного и опухолевого процессов. Несмотря на то, что в определенных случаях требуется проведение дополнительных исследований (например, гистологического), часто оно позволяет быстро поставить окончательный диагноз. В качестве биоматериала исследуют : пунктаты лимфатических узлов, новообразований в разных локализациях , бронхиальный секрет , цереброспинальную жидкость, содержимое кист , гематом , сером, и пр.

Для отбора материала на цитологическое исследование применяют несколько методов:

  • тонкоигольная биопсия – с аспирацией или без аспирации
  • соскоб
  • поверхностный мазок-отпечаток

Тонкоигольная биопсия:

Различают тонкоигольную биопсию с аспирацией и без аспирации (ТИАБ/ТИБ). ТИБ является предпочтительным методом получения материала, так как позволяет получить максимальное количество клеток с минимальной примесью крови. ТИАБ применяют при получении материала из плотного поражения, так как ТИБ может в этом случае дать материал очень низкой клеточности, недостаточной для постановки диагноза. Является единственной практической техникой для отбора проб подкожных новообразований или внутренних органов.

Соскоб:

Не следует путать данный метод получения материала на цитологию с соскобом на обнаружение клещей.

Подразумевает мазок или отпечаток со скарифицированной (лезвием скальпеля, до появления капель крови) поверхности. Метод оптимален для получения материала из разлитых плохо отграниченных, но в то же время довольно глубоких поражений (чаще всего, кожных), когда выполнение ТИБ нецелесообразно/невозможно. Хорошо подходит для корректной оценки воспалительного инфильтрата верхних слоев дермы.

Мазок-отпечаток:

Подразумевает отбор материала непосредственно с интактной поверхности поражения. Метод оптимален для получения материала из рыхлых и влажных поверхностных поражений (чаще всего, кожи и слизистых оболочек), когда выполнение ТИБ или глубокого соскоба нецелесообразно/невозможно. Не подходит для «сухих» поражений - в этом случае информативный материал в препарат практически не отделяется. Мазки – отпечатки могут быть сделаны из язв или экссудативных поверхностные поражений или с поверхности органа во время операции или вскрытия . Информативные мазки могут быть получены с поверхностных поражений в случае наличия в них клеток воспаления , даже если воспаление является вторичным процессом. Опухолевые клетки могут не обнаруживаться в экссудатах или мазках -отпечатках из некротизированной массы. Мазки-отпечатки экссудатов с поверхности язв наиболее полезны для обнаружения бактерий или грибков. Необходимо иметь ввиду, что бактерии могут отражают только вторичную бактериальную инфекцию. Мазок – отпечаток с поверхности язвы необходимо сделать до того, как она будет очищена от корочек. Затем поражение следует очистить с помощью салфетки, смоченной физраствором , повторить мазок - отпечаток или сделать соскоб с поверхности язвы.

По сути, мазок и отпечаток - это одно и то же. Термин «отпечаток» используется в тех случаях, когда пораженная поверхность более-менее ровная и к ней можно приложить предметное стекло. Термин «мазок» используется в тех случаях, когда анатомия поражения не позволяет сделать прямой отпечаток (напр., носовые ходы, слизистые оболочки половых органов и т.д.) и материал отбирается с поверхности вспомогательным инструментом (чаще всего, цитощеткой).

Сроки исполнения: срок исполнения до 4 дней (плюс 1-2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: содержимое гематом, сером, кист; бронхиальный секрет, пунктат из новообразований паренхиматозных органов и кожи, клетки эпидермиса и дермы.

Метод исследования: микроскопическое исследование мазков (на стекле) после окраски.

Подготовка пациента: для проведения процедуры БАЛ - утром перед исследованием животное не кормить. Так как процедура бронхо-альвеолярного лаважа проводится под общей седацией , пациента необходимо подготовить в соответствии с соблюдением всех требований, в зависимости от группы анестезиологического риска . Техника взятия должна проводиться с соблюдением правил асептики/антисептики для минимизирования возможной контаминации из верхних дыхательных путей. Также, для пациентов с повышенным анестезиологическим риском можно провести взятие материала методом трахеального смыва (после применения местного анестетика).

Подготовка пациента к проведению люмбальной пункции следующая:

  • биоматериал отбирается до введения контраста при миелографии или не ранее чем через 5 дней после проведения процедуры;
  • для проведения процедуры необходима общая анестезия;

Также, общая анестезия требуется при проведениии ТИАБ/ТИБ из внутренних органов или объемных образований в полостях тела (напр., во время лапаротомии или чрескожно, под контролем УЗИ), однако при этом повышаются риски получения неинформативного материала и его контаминации (напр., кровью) в день процедуры животное не следует кормить.

Для проведения других исследований специальная подготовка не требуется.

Показания: пункция и/или биопсия лимфоузлов показана, когда наблюдается местное или генерализованное увеличение лимфатических узлов. Увеличение лимфоузлов всегда предполагает возможность опухолевого процесса, либо первичного, либо метастатического.

Показания для цитологического исследования ликвора: пациент с признаками поражения ЦНС.

Для проведения БАЛ: взятие образца у собак и кошек проводят в тех случаях, когда у животного наблюдается кашель,затрудненное дыхание, выявляются патологические изменения в легких при рентгенологическом исследовании или другие признаки заболевания респираторного тракта. При необходимости получения образцов у животных с признаками таких заболеваний, при которых результат других, менее инвазивных, процедур (смыв с трахеи и др.) , вероятнее всего, окажется неинформативным (или уже неинформативен).

Показанием для ТИБ/ТИАБ являются: оценка объемных образований кожи и подкожных тканей; обследование при лимфаденопатии; обследование узелков или объемных образований, либо других изменений, обнаруженных в органах.

Противопоказания: для исследования ликвора – противопоказания для общей анестезии: повышенное внутричерепное давление, новообразования и воспаления кожи в области пункции, тенториальная грыжа. После трех неудачных попыток следует прекратить процедуру.

Противопоказанием в проведению БАЛ являются:

  • отсутствие в клинике условий для обеспечения животного дополнительным кислородом в течение нескольких часов после проведения БАЛ.
  • исследование противопоказано тем животным, у которых наблюдается затруднение дыхания даже на фоне назначения им кислородотерапии;
  • любые противопоказания для проведения общей анестезии.

Также, анестезиологические риски оцениваются при проведении процедуры ТИАБ/ТИБ из внутренних органов или объемных образований в полостях тела (напр., во время лапаротомии или чрескожно, под контролем УЗИ). Многие животные хорошо переносят эту процедуру без выполнения анестезии, седации или использования местных анестетиков. При необходимости выполнения анестезии или седации могут использоваться стандартные режимы, соответствующие характеристикам животного. Следует отметить, что режимы, вызывающие учащение дыхания или выраженное увеличение селезенки, могут затруднить выполнение вмешательства. Также, необходимо оценить риск развития кровотечения во время проведения процедуры у животных с заболеваниями, течение которых может сопровождаться выраженными кровотечениями, а также при выраженной тромбоцитопении или коагулопатии. Выполнение ТАБ очень мелких образований затруднено.

Метод отбора биоматериала: тонкоигольная биопсия – с аспирацией или без аспирации

  1. Подготовить иглу (чем плотнее поражение, тем толще игла: 20-23 G), шприц 5-10 мл, предметные стекла, спирт.
  2. Выбрить или подстричь шерсть, обработать поверхность спиртом.
  3. Ввести иглу в поражение и, не вынимая кончика иглы из кожи, сделать несколько вколов, меняя направление иглы.
  4. Извлечь иглу, присоединить шприц с поднятым поршнем и выдавить материал на стекло.
  5. В случае ТИАБ в кожу вставляется игла с присоединенным шприцем, после вкола делается несколько насасывающих движений поршнем. Игла со шприцем вынимается из кожи. Иглу отделяют от шприца, шприц заполняют воздухом, снова присоединяют иглу и выдавливают материал на стекло.
  6. Распределить материал по стеклу другим стеклом. Такой метод позволяет получить материал сразу на двух стеклах.
  7. На предметном стекле написать вид, кличку животного, фамилию и место взятия материала, если материал получают из разных мест. Например, если материал взят из разных лимфатических узлов (подчелюстного и подколенного): «с. Барбос, Петрова, п/чел. ЛУ» и «с. Барбос, Петрова, п/кол. ЛУ»
  8. Высушить на воздухе и поместить стекло в пластиковый транспортный контейнер.

Соскоб

Не следует путать данный метод получения материала на цитологию с соскобом на обнаружение клещей.

Порядок манипуляций:

  1. Подготовить: тупое лезвие скальпеля, предметные стекла.
  2. Шерсть выстригают.
  3. Лезвие скальпеля разместить под прямым углом к поверхности поражения и сделать несколько соскабливающих движений.
  4. Материал с лезвия распределить по стеклу, подписать, убрать в транспортный контейнер.

Мазок-отпечаток

Порядок манипуляций:

  1. Подготовить предметные стекла.
  2. Прислонить стекло к поверхности поражения, затем дать высохнуть, подписать, убрать в транспортный контейнер.

Важно! Возможна контаминация препарата кровью (напр., при выраженной васкуляризации поражения)

- картина может оказаться неспецифической

- категорически не рекомендовано использовать для взятия материала ватные палочки.

Люмбальная пункция: самотеком из атланто-окципитальной или люмбальной цистерны.

Бронхиальный секрет: бронхоальвелярный лаваж (БАЛ) – это метод получения образца жидкости с диагностической целью из мелких дыхательных путей – альвеол и в некоторых случаях из интерстициальных тканей. Лаваж (смыв) обычно выполняют во время бронхоскопии, что позволяет провести визуальный осмотр дыхательных путей и осуществить прицельный смыв с определенных долей легких. Кроме того, БАЛ можно выполнять и без бронхоскопа. Стерильный физиологический раствор вводят в легкие в достаточном объеме, чтобы он заполнил альвеолы. Затем раствор вместе с клетками и жидкостью с эпителиальной выстилки легких аспирируют обратно. Объем полученного образца бывает достаточно большим, чтобы можно было произвести несколько исследований.

Процедура ТИАБ/ТИБ органов брюшной полости под контролем УЗИ: возможна тремя способами. В любом случае следует выбирать кратчайшую траекторию введения иглы между кожей и интересующим образованием. За одну процедуру не следует пунктировать более одной полости тела. Дополнительно к этому следует подобрать оптимальный ультразвуковой датчик, характеристики которого максимально упрощают проведение процедуры.

  • Непрямой метод – в данном случае интересующее образование находится в процессе УЗИ , определяются его проекции на кожу и глубина залегания. Затем ультразвуковой датчик убирается , и производится пункция образования вслепую , исходя из определенных ранее его характеристик. Данный метод может использоваться при пункциях образований большого размера , что исключает необходимость верификации попадания в них кончика иглы.
  • Метод «свободной руки» - в данном случае игла удерживается одной рукой специалиста, выполняющего процедуру, датчик - другой рукой. Путем перемещения датчика четко визуализируется область интереса, подлежащая биопсии. Кожа прокалывается иглой на расстоянии в несколько миллиметров от датчика, что позволяет облегчить ее визуализацию во время процедуры, а также предотвратить повреждение ею датчика. Целью процедуры является совместить плоскость расположения иглы, плоскость сканирования датчика и одну из плоскостей, проходящих через интересующее образование. Не следует вводить иглу перпендикулярно плоскости сканирования, поскольку в данной ситуации игла не будет видна на всем протяжении. Более того, чем меньше угол наклона иглы относительно направления распространения звуковых колебаний, тем сложнее визуализировать иглу, поэтому минимальное значение данного угла для оптимальной визуализации иглы должно составлять 45 ◦. Затем под непосредственным ультразвуковым контролем игла вводится в глубжележащие ткани, вплоть до интересующего образования.
  • Метод с использованием биопсийной насадки: в данном случае игла удерживается специальной биопсийной насадкой, помещаемой на датчик. Большинство ультразвуковых систем имеют специальное программное обеспечение, демонстрирующее траекторию иглы при использовании биопсийной насадки, поэтому для выполнения процедуры путем перемещения датчика визуализируется область интереса таким образом, чтобы она пересекала отображаемую траекторию биопсийной иглы. Затем игла вводится в специальный канал биопсийной насадки, после чего продвигается в интересующее образование.

Вне зависимости от используемой методики биопсии улучшение визуализации иглы достигается путем ее легкого вращения в разные стороны или периодических возвратно- поступательных движений; кроме того, полезно несколько скорректировать плоскость сканирования датчика таким образом, чтобы обеспечить наилучшую визуализацию иглы. Также при использовании любого метода введения иглы получение образцов возможно путем непосредственной аспирации (за счет использования шприца, создающего разрешение в просвете иглы) или путем неаспирационной техники, когда кончик иглы, находящийся в интересующем образовании, смещается несколько раз вверх и вниз; после этого иглу извлекают. Путем использования данных методик возможно выполнение аспирационной биопсии любого органа или образования. При подозрении на наличие диффузных процессов печени обычно лучше пунктировать левую ее долю, чтобы избежать повреждения во время процедуры желчного пузыря. Биопсия селезенки обычно выполняется с использованием не аспирационной техники, чтобы избежать разведения образца кровью. Обычно (за исключением аспирационной биопсии селезенки) целесообразно получение минимум одного образца с использованием аспирационной техники и одного образца – путем не аспирационной техники, поскольку это повышает вероятность получения адекватных образцов для цитологического исследования. При активной аспирации возможно разрушение некоторых хрупких клеток, например при лимфомах.

Преаналитика: взятие биоматериала согласно рекомендациям выше, с соблюдением правил асептики/антисептики. Приготовить цитологический препарат и высушить на воздухе в течение 15 минут. Стекло с высушенным цитологическим мазком поместить в пластиковый транспортный контейнер. Сохранность образца 5 дней. До отправки в лабораторию хранить при +20°С…+25°С. Заполнить все графы направительного бланка с ОБЕИХ сторон! Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С…+8°С (синий пакет).

В случае направления жидкости, не попадающей под AN501 (ликвор, содержимое кист, гематом и пр.), помимо мазка на стекле , поместить ее в пробирку с сиреневой крышкой с ЭДТА . Сохранность образца 3 дня при +2°С …+8°С. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

Жидкость, полученная в результате БАЛ и ликвора, должна быть исследована по возможности быстро (не более 30 мин) . Если быстрая отправка в лабораторию невозможна, из всех проб надо приготовить мазки на стекле!

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Основная цель цитологического исследования ликвора - определить тип воспаления, выявить кровотечение, диагностика новообразований в ЦНС. В норме в СМЖ присутствуют мононуклеарные клетки (малые лимфоциты, макрофаги , эпендимальные клетки). Также < 25 % недегенеративные нейтрофилы, клетки эпиндимы ,сосудистого сплетения, мозговых оболочек, эндотелия (считается артефактом при взятии), макрофаги. Нейтрофильный ответ может быть при: бактериальном менингите или энцефалите, грибковых или некоторых вирусных заболеваниях (FIP), кровотечениях в СМЖ (при этом, количество нейтрофилов ниже, чем при инфекции), при иммуноопосредованном менингите, менингиоме.

Мононуклеарная реакция наблюдается при: воспалении, вызванном вирусами, любом хроническом заболевании, после кровотечения (внутри них эритроциты), после припадка (небольшое увеличение), первичной опухоли ЦНС, дегенеративных изменениях. Эозинофильный ответ (>10%) наблюдается при аллергии, паразитарных заболеваниях, реакции на препараты. Опухолевые клетки – ЦНС редко является местом локализации злокачественной лимфомы, но когда она присутствует, в ЦСЖ иногда можно обнаружить плеоморфные лимфоидные клетки. Также , можно диагностировать гистиоцитарную саркому, злокачественный гистиоцитоз, менингиому, эпендимому, опухоли сосудистого сплетения (карцинома), также метастазы и пр. Бактерии могут присутствовать внутри нейтрофилов или в свободном состоянии. Могут присутствовать криптококки и другие патогенные грибки. Также цитологическая картина может быть смешанной: грибковые, протозойные, некоторые вирусные агенты, гранулематозный менингоэнцефалит, FIP, бактериальные инфекции могут вызывать нейтрофильный ответ на ранних стадиях, при котором может развиться смешанный ответ на поздних стадиях заболевания.

Важно! У животных с воспалительными заболеваниями ЦНС после лечения кортикостероидами может наблюдаться снижение количества лейкоцитов в ликворе. Лечение антибиотиками животных с бактериальными инфекциями может приводить к изменеию количества лейкоцитов в СМЖ.

Материал, полученный в результате БАЛ, в норме содержит реснитчатый эпителий. Указывает на то, что материал из альвеолярного пространства получен. Также, можно визуализировать макрофаги, бокаловидные клетки, слизь (спирали Куршмана) - указывает на хронический процесс. Также , контаминация материалом из ротовой полости - плоский эпителий.

При нейтрофильном воспалении – в норме до 5 % нейтрофилов, обычно с некоторыми дегенеративными изменениями. Мономорфная популяция бактерий. Наблюдают при аспирационной пневмонии.

Макрофагальное воспаление - указывает на хронический процесс. Присутствуют 2-3-, многоядерные клетки, вакуолизированная цитоплазма. Смешанное воспаление- липидная пневмония. Пиогранулематозное воспаление- макрофаги, плюс гигантские клетки, плюс нейтрофилы.

Материал, полученный из бронхиального аспирата, включает: клеточные элементы, в норме присутствующие в трахеобронхиальном дереве. Также, клетки, полученные из очага поражения. Дополнительный материал, состоящий из мокроты, белкового экссудата или дегенеративных клеток. Увеличенное количество мокроты часто обнаруживается при состоянии хронической стимуляции и раздражения эпителия органов дыхания. Некротические клетки и дегенеративные клетки часто обнаруживаются смешанными с мокротой.

В норме образец содержит несколько нейтрофилов. При воспалении количество полиморфоноядерных нейтрофилов резко увеличивается. Дегенеративные нейтрофилы не подтверждают наличие токсинов/бактерий. Если обнаруживают увеличенное количество нейтрофилов, определяют культуру клеток.

Уровень эозинофилов повышается при аллергических или паразитарных заболеваниях легких. Макрофаги фагоцитируют вдыхаемые инородные материалы. Их количество увеличивается при различных подострых и хронических заболеваниях легких и при инфекционных или неинфекционных состояниях. Эритрофагоцитоз указывает на хроническую закупорку сосудов. Примеры инородных материалов : бактерии, грибы, личинки легочных червей, пигменты, кристаллы, растительные субстанции ( пыльца и др.). Увеличение инородных субстанций, особенно при макрофагальной реакции, предполагает нарушенную выводящую способность реснитчатых клеток слизистой оболочки.

При клиническом осмотре гематомы, серомы и кисты могут неправильно диагностированы как воспалительные поражения. Цитологическое исследование этих поражений помогает правильно идентифицировать их.

Гематомы содержат много эритроцитов. Эритрофагоцитоз и отсутствие тромбоцитов отличает гематому от кровотечения, вызванного процедурой аспирации. Часто присутствуют макрофаги, содержащие продукты деградации эритроцитов (железо, гемосидерин).

Серома - со временем в результате лизиса эритроцитов из гематомы образуется серома. Серома также может возникать независимо от гематомы при хроническом раздражении (например, после ушибов). В обоих случаях наблюдаются преимущественно мононуклеарные клетки с характеристиками макрофагов или клеток, выстилающих кисты; однако, при серомах, обусловленных гематомой, наблюдается больше продуктов деградации эритроцитов или эритрофагия. Кистозная жидкость обычно бесцветная, имеет низкую плотность и содержит несколько клеток.

Цитологическое исследование пунктата лимфатических узлов.

Типы клеток , обычно обнаруживаемые в лимфатических узлах:

  • Зрелые лимфоциты- 90-95% клеток в нормальных лимфатических узлах- это зрелые лимфоциты. Они схожи с таковыми крови, за исключением того, что в них более туго скрученный хроматин. Эти клетки мелкие (около 190 мкм в диаметре) и обычно имеют редкую цитоплазму.
  • Лимфобласты или стволовые клетки встречаются намного реже. Эти клетки в 1,5-3 раза больше, чем лимфоциты , содержат тонкий, диффузный хроматин и могут иметь четкие ядра. Обнаруживаются как бледные, так и темные типы.
  • Макрофаги (гистиоциты) – составляют небольшой процент клеток в лимфоузле. Макрофаги имеют кругое, овальное или прдолговатое ядро с хроматином в виде сети или широко расположенный рисунок, при котором может быть одно или два ядра. При окрашивании цитоплазма бледно-голубая или серая и часто вакуолизированная. Цитоплазматические тела могут быть неразличимы.
  • Плазматические клетки – обнаруживаются в пунктате в различных количествах. Они имеют темноокрашенное, умеренно конденсированное ядро, которое обычно эксцентрическое. Цитоплазма очень базофильна и обычно имеет перинуклеарную чистую областьь (ареол).
  • Воспалительные клетки включают нейтрофилы, эозинофилы, лаброциты (тучные клетки), эритоциты и моноциты.
  • Лимфогранулярные тельца- цитоплазматические фрагменты лимфоцитов или лимфобластов. Они обычно окрашиваются в голубовато- серый цвет и варьируются по размеру от маленького тромбоцита до размера эритроцитов.
  • Размытые или лизированные клетки (т.е. свободные ядра) не следует учитывать. Заметные ядра часто видны в свободном ядре и могут вести к неправильной диагностике лимфомы.

Классификация пунктатов из лимфатических узлов:

Пунктат из лимфатических узлов можно классифицировать по его распределению и морфологии клеток. Это общая классификация и не дает информацию о точном диагнозе.

Важно! увеличение лимфатического узла не является нормой.

Реактивный лимфоузел – увеличение количества бластных клеток , плазматических клеток и, возможно, других воспалительных клеток. Если лимфоузел высокореактивный, могут наблюдаться митотические фигуры , а клетки могут быть более базофильными.

Лимфаденит (воспаление лимфатического узла) – может быть гнойным, пиогранулематозным или гранулематозным. При гнойном воспалении обнаруживают много нейтрофилов, которые часто дегенеративные (кариолизис+ вакуолизированная цитоплазма). Количество макрофагов может быть также увеличено.

Лимфосаркома – большая мономорфная популяция примитивных лимфобластов с небольшим количеством нормальных клеток. Опухолевые клетки могут варьироваться по размеру и меть ядро различного размера, многочисленные или большие ядрышки и увеличенное количество митотических фигур. Морфология злокачественных клеток может сильно варьировать. Некоторых случаях они однозначно лимфоидной природы, но преимущественно совсем незрелые лимфобласты и пролимфобласты. В других случаях могут встречаться клетки со слабым окрашиванием, обильной цитоплазмой, которая часто вакуолизирована или пенистая. Они также могут иметь ядро неправильной формы. Иногда обнаруживаются совершенно не дифференцированные клетки, которые обычно трудно идентифицировать как имеющие лимфоидное происхождение. Они имеют неправильное ядро и сильно базофильную цитоплазму, в которой может содержаться несколько заметных вакуолей. Существуют также хорошо дифференцированные лимфомы из маленьких лимфоцитов.

Метастатические опухоли – в пунктате из лимфатического узла можно обнаружить клетки разных типов метастазирующих опухолей.

Цитология злокачественных новообразований: опухоли состоят из клеток с неконтролируемым ростом. В результате клетки размножаются в увеличивающемся количестве. Из-за быстрого , неконтролируемого роста злокачественные клетки незрелые и плохо дифференцированы. Эта плохая дифференциация позволяет отличать опухолевые клетки от нормальных клеток.

  1. Морфологическая популяция клеток- вначале определяют характерный образец, а не просто воспалительные клетки. Обращают внимание на мономорфную популяцию клеток (умеренное- большое увеличение клеток одного типа).
  2. Классификация клеток – обращают внимание на форму клеток и классифицируют их как отдельные круглые клетки или мезенхимальные.
  3. Определяют злокачественность клеток:
    1. изменения ядер клеток являются лучшим показателем злокачественности.
      Злокачественные клетки варьируются по размеру и имеют большое ядро. Они имеют высокое соотношение ядро/цитоплазма (Я/Ц соотношение) вследствие быстрого роста и деления клеток. Могут наблюдаться ядра неправильной формы (например, с псевдоподиями).
    2. обращают внимание на изменения в ядре: неправильная форма (например, зубчатая); многочисленные картины митоза- предполагают быстрый рост ткани. Различия в количестве ядер (1-5) плюс множественные ядра. Увеличенный размер ядер.
    3. обращают внимание на изменения цитоплазмы. Она может быть базофильной вследствие высокого содержания РНК, которая отражает активный синтез белка в этих клетках. Цитоплазматические изменения – слабый признак злокачественности.
  4. определяют вид опухоли (карциномы, саркомы, дискретные клетки).
  5. Дополнительные возможности при диагностике:
    1. перечень опухолей, которые могут возникать в этом месте;
    2. как правило, в опухолевых клетках сохраняется некоторая активность, характерная для ткани происхождения. Обращают внимание на дифференциацию, которая может помочь идентифицировать тип опухоли.

Цитология воспаления: классифицируется на гнойное, пиогранулематозное , гранулематозное.

Нейтрофильное воспаление. Нейтрофилы – главные воспалительные клетки, ассоциированные с гнойным воспалением. Они фагоцитируют как бактерии, так и некоторые грибки. Поэтому если наблюдается гнойное воспаление , обращают внимание на бактерии внутри цитоплазмы нейтрофилов. Свободные бактерии в пробе могут быть из-за контаминации краски. Бактерии на поверхности эпителиальных клеток могут быть нормальной флорой.

Септическое (инфекционное воспаление): нейтрофилы часто дегенеративные ( кариолизис, базофилия, пенистая цитоплазма) вследствие токсинов бактерий, хотя некоторые бактериальные токсины не вызывают такие повреждения. Обязательно исследуют интактные нейтрофилы на наличие дегенерации. Часто в цитоплазме могут обнаруживаться бактерии или грибки. Количество нейтрофилов часто выше при септическом воспалении, чем при асептическом воспалении. Кариолизис характеризуется опуханием ядерных долей и снижением интенсивности окраски. Он указывает на быструю смерть клетки и токсическое микроокружение клеток.

Асептическое воспаление: нейтрофилы могут быть гиперсегментированными и находиться в состоянии кариорексиса или пикноза.

Кариорексис: доли разделены +-фрагментированы.

Пикноз: характеризуется сморщиваем ядра, увеличением интенсивности окраски яда и уплотнением ядра в единую, темноокрашенную массу. Эти изменения указывают на относительно нетоксическое окружение.

Гиперсегментация ядра: указывает на то, что клетки были в тканях длительное время и были повреждены.

Пиогрнулематозное воспаление: характеризуется воспалением, вовлекающим преимущественно макрофаги или нейтрофилы плюс макрофаги. Они фагоцитируют инородные тела, продукты распада клеток, грибки и высшие бактерии (Actinimyces , Nocardia). Когда наблюдается гранулематозное воспаление, обращают внимание на фагоцитированный материал в цитоплазме макрофагов. Гранулематозное воспаление наблюдается также при FIP. Макрофаги имеют богатую цитоплазму, которая обычно вакуолизирована или пенистая. Они обычно многоядерные и могут иметь заметное ядро. Нейтрофилы обычно не дегенеративные. Они могут быть гиперсегментированными.

Хроническое воспаление: плазматические клетки являются показателем хронического процесса, который также характеризуется наличием макрофагов, лимфоцитов, нейтрофилов и иногда фибробластов.

Эозинофильное воспаление: характеризуется наличием > 20-30 % эозинофилов. Эозинофильный инфильтрат ассоциирован с аллергическим ответом, паразитарной инвазией, наличием некротических тканей, опухолями (лаброцитомой) Иногда трудно распознать клетки как эозинофилы, так как они часто сморщиваются, и их ядро становится пиктоничным. Обычно распознается несколько клеток с эозинофильными гранулами.

Продукты распада: имеются практически во всех цитологических препаратах , но наиболее часто они присутствуют в гнойном или некротическом очаге. Продукты распада также могут быть обусловлены артефактами. Дегенеративно измененные ядра видны как нити эозинофильного или базофильного вещества. Важно! Не перепутать их с грибами или слизью. Продукты клеточного распада, которые были фагоцитированы, указывают на некроз.

Форма выдачи результата: см. вложение.

Литература:

  1. Йин С. Полный справочник по ветеринарной медицине мелких домашних животных/Пер. с англ, 2008.- 1024с.
  2. Ш.Ваден, Д.Нолл, Ф. Смит, Л. Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.
  3. Canine and Feline Cytology 3rd Edition
  4. Cowell and Tyler's Diagnostic Cytology and Hematology of the Dog and Cat