№AN25TLI

Трипсиноподобная иммунореактивность сыворотки крови собак (Trypsin-Like Immunoreactivity, TLI)

Срок исполнения
4 дня (плюс 1-2 дня для регионов)* указанный срок не включает день взятия биоматериала
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ

Исследование трипсиноподобной иммунореактивности (TLI) сыворотки крови представляет собой метод видоспецифической диагностики экзокринной недостаточности поджелудочной железы (ЭНПЖ), проводимый с помощью иммуноферментного анализа. В исследовании используются видоспецифические антитела, которые обнаруживают в сыворотке крови, а также катионный трипсин и трипсиноген (зимоген или неактивный профермент трипсина), которые связаны с протеиназным ингибитором. Трипсиноген синтезируется и хранится в ацинарных клетках поджелудочной железы, и в физиологических условиях в незначительном количестве высвобождается в сосудистое русло. Трипсиноген превращается в трипсин в тонкой кишке и является активной формой протеолитического фермента. Трипсиноген и трипсин не всасываются из кишечника. Таким образом, сывороточная TLI отражает фактическое высвобождение трипсиногена непосредственно из поджелудочной железы. Трипсин и трипсиноген очень похожи, анализ TLI может выявлять оба фермента в сыворотке. Анализ также обнаруживает часть трипсина, который связан обратимой связью с α1-протеиназным ингибитором. Все это обуславливает название данного исследования.

Синдром ЭНПЖ развивается в результате снижения количества ацинарных клеток поджелудочной железы, что чаще происходит при ацинарной атрофии поджелудочной железы (наследственная предрасположенность у немецких овчарок) или хронического панкреатита. Сокращение ацинарных клеток приводит к снижению синтеза и выхода трипсиногена в кишечник и в кровь и снижению сывороточной TLI. Клинические признаки ЭНПЖ обычно не развиваются до тех пор, пока функциональная способность поджелудочной железы не снизится до 10-15% от нормы.

Исследование TLI полезно при дифференциации мальдигестии от первичной мальабсорбции и должно быть частью стандартного исследования при диарее тонкого кишечника у собак. Следует исключить ЭНПЖ прежде, чем рассматривать диагноз первичного заболевания кишечника. В большинстве случаев при ЭНПЖ TLI заметно снижается по сравнению со здоровыми собаками или с собаками с кишечной мальабсорбцией.

Подготовка пациента: для получения более точных результатов животные перед исследованием должны находиться на голодной диете не менее 12 часов.

Метод отбора проб: венепункция.

Преаналитика:

  1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой, с ГЕЛЕМ.

    2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз.

    3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.

    4. Центрифугировать при 2000 g (3300об/мин) 10 мин, не позднее 60 минут после взятия.

    5. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.

    6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

МИНИМАЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КРОВИ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ 20 БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ 2.5 МЛ

Стабильность пробы: 1 неделя при +2°С…+8°С (при хранении на геле); 2 месяца при -17°С…-23°С (при необходимости заморозки перенести сыворотку в пустую чистую пробирку с белой крышкой).

Пероральный прием ферментов поджелудочной железы не влияет на уровень сывороточной TLI.

Интерпретация результата:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Исследование TLI, первоначально предложенное для диагностики ЭНПЖ у собак, можно использовать в качестве дополнительного теста при подозрении на панкреатит (при отсутствии заболевания почек). Обычно при панкреатите выявляют высокие значения TLI. Однако это исследование при диагностике панкреатита не так информативно, как определение панкреатической липазы у собак. Специфичность была выявлена на уровне 65%, но чувствительность составила только 33%. Чувствительность метода снижается, вероятно, из-за короткого периода полувыведения исследуемых ферментов. Значение TLI может вернуться к нормальному уже через несколько часов после возникновения панкреатита. Самое высокое значение TLI определяется при появлении клинических признаков панкреатита. При хроническом панкреатите концентрация ферментов в сыворотке может быть недостаточной для обнаружения. У некоторых собак при панкреатите может отмечаться повышение TLI при нормальных значениях уровня панкреатической липазы, а нормальное значение TLI не исключает наличия панкреатита, что доказывает необходимость измерения обоих показателей.

Причины снижения TLI. TLI является тестом выбора при ЭНПЖ. Уровень TLI в сыворотке крови менее 2,5 мкг/л (у собак) обычно считается диагностическим признаком ЭНПЖ. Субклиническую форму ЭНПЖ у собак можно заподозрить при получении промежуточных результатов исследования (> 2,5 мкг/л и < 5,0 мкг/л). В таких случаях необходимо провести повторное исследование уровня TLI (через месяц). У собак с клиническими признаками мальдигестии вследствие ЭНПЖ отмечается высокая информативность метода определения сывороточной TLI. Чувствительность, специфичность и достоверность диагностического метода составляют около 100%.

Появление результатов в «серой» зоне (2,5-5,0 мкг/л) включает в себя следующие возможные причины:

  • нахождение собаки в процессе восстановления функции поджелудочной железы после перенесенного панкреатита. При повторном тестировании результаты могут быть нормальными;
  • воздействие высоких температур на образец во время транспортировки. Необходимо повторное получение образца для исследования;
  • несоблюдение условий строгой диеты (в течение 12-15 часов) до начала исследования. Повторное исследование может выявить ЭНПЖ.

Причины повышения TLI. Увеличение значения TLI больше 50 мкг/л может произойти в результате развития панкреатита (необходимо дополнительное исследование уровня панкреатической липазы), почечной недостаточности, преренальной азотемии (увеличение возможно в два раза) и недоедания. У собак TLI увеличивается в начальной стадии развития панкреатита, но затем быстро возвращается в диапазон нормальных значений.

Хотя определение уровня TLI считается чувствительным методом, возможно возникновение ложноотрицательных результатов исследования. Сопутствующий панкреатит при ЭНПЖ может увеличить поступление ферментов в кровь и, соответственно, увеличить значение TLI (до уровня или даже выше уровня референсных значений). При подозрении на ЭНПЖ и при нормальных значениях TLI следует провести дополнительные исследования функции поджелудочной железы. Почечная недостаточность также может привести к ложноотрицательным результатам исследования TLI. Снижение почечной фильтрации продлевает период циркуляции ферментов в сыворотке крови. Следовательно, концентрация TLI может быть в пределах референсных значений, даже если присутствует ЭНПЖ.

Как уже отмечалось, заболевания, вызывающие снижение СКФ, вызывают увеличение TLI и потенциально могут замаскировать аномально низкий уровень TLI в сыворотке крови. Исследование содержания кобаламина (витамина В12) и фолиевой кислоты в крови настоятельно рекомендуется проводить каждый раз, когда исследуется сывороточная TLI, с учетом того, что имеются характерные изменения содержания витаминов в сыворотке крови у собак при ЭНПЖ.

Расстройство

Фолат

Кобаламин

TLI

ЭНПЖ

↑ или N

Чрезмерный бактериальный рост микрофлоры

N

Заболевания проксимального отдела тонкого отдела кишечника

N

N

Заболевания дистального отдела тонкого отдела кишечника

N

N

Диффузное заболевание тонкого кишечника

N

N – в пределах референсных значений;

↑ – повышение показателя;

↓ – понижение показателя.

Уровень TLI остается в пределах референсных значений в случаях, когда ЭНПЖ связана либо с опухолевым процессом, вызывающим обструкцию протоков поджелудочной железы, либо с врожденной ферментативной недостаточностью, отличной от дефицита трипсиногена.

Повышение уровня:

  • Панкреатит.
  • Тяжелая почечная недостаточность, поскольку трипсиноген выводится из организма почками.

Понижение уровня:

  • Экзокринная недостаточность поджелудочной железы (ЭНПЖ).

Форма выдачи результата: полуколичественный тест.

Единицы измерения: нг/мл.

Референсные значения лаборатории VET UNION:

  • Уровень < 2.5 нг/мл является диагностическим для экзокринной недостаточности поджелудочной железы (ЭНПЖ) собак.
  • Уровень 2.5-5.7 нг/мл – собака подозрительна по ЭНПЖ, целесообразно провести повторное исследование через 1 месяц (нельзя исключить: повышение у собак с ЭНПЖ после еды, хронический панкреатит в сочетании с ЭНПЖ, низкобелковую диету).

Источники литературы:

  1. «Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек», Ш. Ваден, Д. Нолл, Ф. Смит, Л. Тиллей, «Аквариум»;
  2. «Veterinary Hematology and Clinical Chemistry», Mary Anna Thrall, Glade Weiser, Robin W. Allison, Terry W. Campbell, «WILEY-BLACKWELL»;
  3. Laboratory Profiles of Small Animal Deseases, Charles H. Sodikoff, Mosby.