Щелочная фосфатаза

Что такое щелочная фосфатаза

Щелочная фосфатаза – это фермент, который локализуется на клеточной мембране и синтезируется во многих органах, включая печень, почки, кишечник, поджелудочную желез, плаценту и костную ткань.

У домашних животных выделяют два изофермента ALP (кишечный изофермент и неспецифический тканевой изофермент), которые кодируются двумя разными генами. Неспецифический тканевой изофермент подвергается дальнейшей посттрансляционной модификации в тканях, что приводит к образованию изоформ фермента в печени (Liver Alkaline phosphatase, LALP), в костной ткани (Bone Alkaline phosphatase, BALP), в почках и плаценте.

Кишечный изофермент также может подвергаться дальнейшей модификации, в результате образуется уникальная индуцированная кортикостероидами изоформа (Corticosteroid-induced Alkaline phosphatase, CALP) у собак. Эти различные изоформы часто ошибочно называют изоферментами (изоферменты кодируются разными генами). За активность фермента, определяемого в сыворотке крови, в основном отвечает печеночная изоформа ALP.

Период полувыведения кишечной, почечной и плацентарной изоформ фермента у собак составляет около 6 минут, а период полувыведения кишечной изоформы у кошек составляет примерно 2 минуты. Таким образом, они вряд ли могут вызвать увеличение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови. Увеличение секреции ALP и повышение ее активности в сыворотке крови обычно происходит при холестазе, повышении активности остеобластов, в результате действия некоторых лекарственных препаратов (в первую очередь у собак), а также при некоторых хронических заболеваниях.

Подготовка пациента: для получения более точных результатов животные перед исследованием должны находиться на голодной диете не менее 12 часов.

Метод отбора проб: венепункция.

Преаналитика

1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой, с ГЕЛЕМ.
2. Осторожно перевернуть пробирку 4–6 раз.
3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.
4. Центрифугировать при 2000 g (3300 об/мин) 10 мин, не позднее 60 минут после взятия.
5. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.
6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С…+8°С (синий пакет).

ВНИМАНИЕ! Минимальный объем крови необходимый для исследования - 2.5 мл

Стабильность пробы: 1 неделя при +2°С…+8°С (при хранении на геле); 2 месяца при -17°С…-23°С (при необходимости заморозки перенести сыворотку в пустую чистую пробирку с белой крышкой).

Может быть незначительное увеличение уровня щелочной фосфатазы при хилезе, снижение – при гемолизе.

Интерпретация результата

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Роль щелочной фосфатазы в диагностике холестаза у животных

В печени ALP связывается с эпителиальными клетками желчевыводящих путей и канальцевыми мембранами гепатоцитов. Различные заболевания гепатобилиарной системы могут привести к увеличению активности ALP в сыворотке крови в результате увеличения продукции фермента, солюбилизации мембран под действием солей желчных кислот, а также из-за высвобождения мембранных пузырьков после повреждения клеток.

Холестатические состояния могут привести к заметному увеличению активности ALP в сыворотке крови у собак (больше, чем в 10 раз), но у других видов животных эти значения более вариабельны. Замедление оттока желчи способствует увеличению продукции ALP и секвестрации солей желчных кислот билиарной системы, что приводит к растворению молекул ALP, прикрепленных к клеточным мембранам, с дальнейшим высвобождением их в кровь.

Период полувыведения индуцированной изоформы фермента (LALP) в результате холестаза составляет приблизительно 3 дня у собак и только 6 часов у кошек. У кошек короткий период полувыведения фермента, в дополнение к относительно низкому содержанию ALP в печени (на грамм ткани), способствует меньшему возрастанию активности ALP в сыворотке крови, наблюдаемой при болезнях печени, по сравнению с собаками.

Тем не менее, определение активности этого фермента у кошек при холестазе остается актуальным, если принять во внимание, что даже легкое увеличение активности ALP (в 2–3 раза) может оказаться существенным.

При холестазе, наряду с повышением активности ALP, одновременно могут увеличиваться концентрации общего билирубина и желчных кислот. И зачастую активность ALP служит более чувствительным индикатором холестаза, возрастает раньше, чем выявляется увеличение уровня билирубина (у собак).

Однако повышение активности ALP, индуцированное холестазом, может сопровождаться билирубинурией при нормальном уровне билирубина в крови.

В то время как поражения, связанные с повреждениями внутри- или внепеченочной билиарной системы, являются наиболее распространенными причинами холестаза, заболевания печени, приводящие к значительному отеку гепатоцитов (например, липидоз или воспаление паренхимы печени) могут затруднить отток желчи по желчным канальцам и вызвать повышенную выработку и высвобождение ALP. Заболевания, вызывающие поражения поджелудочной железы и кишечника, иногда могут быть основной причиной холестаза в связи с развитием внепеченочной обструкции желчных протоков.

Повышение ALP при костной патологии у животных

Повышение активности ALP в сыворотке крови, вызванное повышением активности остеобластов, характерно для всех видов животных. Это увеличение наиболее часто выявляется у молодых растущих животных.

Существуют несколько причин повышения активности остеобластов у взрослых животных, которые могут привести к умеренному увеличению активности ALP в сыворотке крови за счет усиления синтеза BALP.

При остеосаркоме и других костных новообразованиях (как первичных, так и вторичных) результаты активности ALP в сыворотке крови не всегда бывают однозначными, что зависит от пролиферации остеобластов при этих процессах. Собаки с остеосаркомой и повышенной активностью ALP в сыворотке крови имеют худший прогноз, чем те, у которых активность ALP остается в норме.

Сращивание костных переломов обычно приводит к локализованному увеличению активности остеобластов и незначительному увеличению активности ALP в сыворотке. Поэтому определение активности щелочной фосфатазы может оказаться полезным при мониторинге процесса заживления. Успешное заживление происходит при умеренной активности ALP.

Эндокринные причины повышения щелочной фосфатазы у собак и кошек

Различные эндокринные заболевания могут быть связаны с повышенной активностью ALP в сыворотке крови. Гиперадренокортицизм часто вызывает заметное кортикостероид-индуцированное увеличение активности ALP у собак.

Кортикостероиды вызывают выработку уникальной изоформы фермента (CALP), который отличается от изоформы, вырабатываемой гепатоцитами в ответ на холестаз (LALP). У собак после стимуляции кортикостероидами первоначально вырабатывается LALP-изоформа фермента, и только через 10 дней начинает преобладать синтез CALP.

Кроме того, имеются индивидуальные особенности степени ALP-индукции на действие кортикостероидов.

Стресс, связанный с любым хроническим заболеванием, может увеличить выработку эндогенных кортикостероидов и привести к индукции образования CALP у собак. К таким заболеваниям относят сахарный диабет, гипотиреоидизм и гиперпаратиреоз у собак и гипертиреоидизм у кошек.

Как минимум у 80% кошек с гипертиреоидизмом происходит увеличение активности ALP в сыворотке крови (как правило, менее чем в 4 раза, связанной с активностью изоформ BALP и LALP).

Повышение ALP при неоплазии у собак и кошек

Одной из причин, приводящей к повышенной активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови у кошек и собак, является неоплазия. Неоплазия печени может напрямую вызвать холестаз. Неоплазия костной ткани связана с повышенной активностью остеобластов.

Кроме того, неоплазия молочных желез без метастазов в кость или печень является причиной повышения активности ALP в сыворотке крови у собак. Сывороточное увеличение активности ALP может возникать при развитии как доброкачественных, так и злокачественных опухолей молочной железы, и, как правило, это повышение не сильное (менее чем в 8 раз) и, по всей видимости, не имеет прогностического значения.

Имеется породная предрасположенность к повышению активности ALP у сибирских хаски и шотландских терьеров.

Повышение щелочной фосфатазы у собак и кошек может свидетельствовать как о развивающемся заболевании, так и о различных нормальных состояниях организма.

• Холестаз
• Повышение эндогенной концентрации или назначение кортикостероидов
• Стресс
• Нодулярная гиперплазия печени
• Липидоз печени
• Цирроз
• Гепатит или холангиогепатит
• Желчнокаменная болезнь
• Холецистит
• Печеночная или билиарная неоплазия
• Панкреатит
• Терапия антиконвульсантами
• Гипертиреоидизм
• Болезнь накопления меди (болезнь Коновалова-Вильсона)
• Молодой возраст, растущие животные
• Период заживления перелома
• Неоплазия костной ткани.
• Метаболические заболевания костей (резорбция костной ткани)
• Беременность
• Наследственная гиперфосфатемия (у сибирских хаски, шотландских терьеров)

• Не имеет диагностической значимости.

Форма выдачи результата: количественный тест.

Единицы измерения: Ед/л.

Референсные значения лаборатории Vet Union

• Собаки:
  • Неонаталы (первые три дня жизни, питание молозивом) — 3845–8760 Ед/л
  • 0–6 мес. — 135–520 Ед/л
  • 6–12 мес. — 70–252 Ед/л
  • Старше 1 года — 10–80 Ед/л
• Кошки:
  • Неонаталы (первые три дня жизни, питание молозивом) — 1348–3715 Ед/л
  • 0–6 мес. — 184–538 Ед/л
  • 6–12 мес. — 21–197 Ед/л
  • Старше 1 года — 10–92 Ед/л

Источник литературы

• «Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек», Ш. Ваден, Д. Нолл, Ф. Смит, Л. Тиллей, «Аквариум»;
• «Veterinary Hematology and Clinical Chemistry», Mary Anna Thrall, Glade Weiser, Robin W. Allison, Terry W. Campbell, «WILEY-BLACKWELL»;
• Laboratory Profiles of Small Animal Deseases, Charles H. Sodikoff, Mosby.