№AN14D-B, Билирубин прямой

Прямой (конъюгированный) билирубин представляет собой растворимую фракцию общего билирубина сыворотки крови. Образовавшийся в результате разрушения эритроцитов, неконъюгированный билирубин соединяется с белками плазмы (свободный билирубин), а затем переходит в растворимую форму (прямой билирубин) путем конъюгации в гепатоцитах. Конъюгация билирубина проходит в три этапа: поглощение билирубина клетками печени, присоединение к билирубину глюкуроновой кислоты и секреция билирубина в желчные канальцы.

На первом этапе неконъюгированный билирубин отсоединяется от альбумина на поверхности гепатоцитов и захватывается клетками печени при участии специфических белков-переносчиков. Система поглощения клетками печени билирубина обладает большой емкостью и лимитируется только дальнейшими метаболическими превращениями билирубина. На втором этапе в гепатоцитах происходит последовательное присоединение двух молекул глюкуроновой кислоты к билирубину (конъюгация). Присоединение одной молекулы глюкуроновой кислоты образует билирубинмоноглюкоронид (который также может образовываться в кишечнике и почках). При присоединении второй молекулы глюкуроновой кислоты образуется билирубиндиглюкоронид (реакция происходит только в печени). На третьем этапе образовавшийся конъюгированный (прямой) билирубин с помощью механизма активного транспорта секретируется в желчные канальцы. Небольшое количество глюкуронидов может транспортироваться обратно в кровь, поэтому в крови возможно присутствие как конъюгированной, так и неконъюгированной фракции билирубина. Конъюгированный (прямой) билирубин с желчью поступает в тонкий кишечник. Под действием кишечных бактерий прямой билирубин превращается в уробилиноген и реабсорбируется кишечником. Большая часть реабсорбированного уробилиногена попадает обратно в печень и ресекретируется в желчь путем энтерогепатической циркуляции. Меньшая часть уробилиногена экскретируется почками. Уробилиноген, оставшийся в кишечнике, окисляется до стеркобилина и выводится из организма.

Конъюгированный билирубин поступает в желчь против градиента концентрации с помощью механизма активного транспорта. Секреция билирубина в желчные канальцы является скорость-лимитирующей стадией процесса метаболизма билирубина в печени. В норме небольшое количество билирубинмоноглюкуронида может присутствовать в крови.

Подготовка пациента: для получения более точных результатов животные перед исследованием должны находиться на голодной диете не менее 12 часов.

Метод отбора проб: венепункция.

Преаналитика:

1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой, с ГЕЛЕМ.

2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз. 

3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.

4. Центрифугировать при 2000 g. 10 мин, не позднее 60 минут после взятия.

5. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.

6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

7. Срок исполнения 1 день (плюс 1-2 дня для регионов)

ВНИМАНИЕ! Минимальный объем крови необходимый для исследования - 2.5 мл

Стабильность пробы: 1 неделя при +2°С…+8°С (при хранении на геле); 3 месяца при -17°С…-23°С (при необходимости заморозки перенести сыворотку в пустую чистую пробирку с белой крышкой).

Липемия и гемолиз могут быть причиной ошибочного завышения величины содержания билирубина. Не подвергать биоматериал воздействию яркого света! Воздействие прямого солнечного света или флуоресцентного освещения может уменьшать содержание билирубина в образце на 50% в час.

Интерпретация результата:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Повышение в крови прямого билирубина обычно возникает:

• при нарушении процессов секреции конъюгированного билирубина в желчь;
• при нарушении оттока желчи в кишечник.

Конъюгация и секреция билирубина взаимосвязаны и активируются одними и теми же лекарственными препаратами (например, фенобарбиталом).

Некоторые бактериальные эндотоксины и медиаторы ответа острой фазы подавляют мембранный механизм секреции билирубина в желчные канальцы и вызывают сепсис-ассоциированный холестаз.

При повышении концентрации конъюгированного билирубина в крови он связывается с сывороточным альбумином прочной ковалентной и нековалентной связями. Ковалентно связанный с альбумином билирубин (дельта-билирубин, или билипротеин) выводится из организма медленнее других форм билирубина, и период его полувыведения составляет около двух недель.

Повышение уровня:

• Нарушение выделения прямого билирубина из печени.
• При гемолизе обычно наблюдается повышение концентрации неконъюгированного билирубина в крови, однако при «перегрузке» секреторной функции гепатоцитов может наблюдаться повышение концентрации в крови прямого билирубина.
• Вторичные повреждения печени. Воспаление, сепсис, действие бактериальных токсинов подавляют транспортные механизмы мембран клеток.
• Паразитарная инвазия.
• Первичные заболевания печени (инфекционной, неинфекционной этиологии), нарушающие процесс желчеобразования в гепатоцитах.
• Прием гепатотоксичных препаратов (острый токсический гепатит).
• Гепатоцеллюлярные заболевания, обуславливающие внутрипеченочный холестаз в результате набухания гепатоцитов при липидозе печени, возникновения неопластических процессов (первичных, вторичных).
• Патологии желчевыводящих путей (холангит, холецистит).
• Обструкции желчных протоков (внепеченочные, внутрипеченочные). Внепеченочные обструкции желчных путей вызывают увеличение прямого билирубина, но повреждения печени в результате холестаза также могут привести к увеличению концентрации неконъюгированного билирубина.
• Лептоспироз (одновременно повышается свободный билирубин).

Понижение уровня:

• Не имеет клинической значимости.

Форма выдачи результата: количественный тест.

Единицы измерения: мкмоль/л.

Референсные значения лаборатории VET UNION:

• Собаки: <5 мкмоль/л.
• Кошки: <5 мкмоль/л.

Источники литературы:

1. «Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек», Ш. Ваден, Д. Нолл, Ф. Смит, Л. Тиллей, «Аквариум»;
2. «Veterinary Hematology and Clinical Chemistry», Mary Anna Thrall, Glade Weiser, Robin W. Allison, Terry W. Campbell, «WILEY-BLACKWELL»;
3. Laboratory Profiles of Small Animal Deseases, Charles H. Sodikoff, Mosby.