АСТ (аспартатаминотрансфераза)

Аспартатаминотрансфераза принадлежит к семейству трансаминаз и катализирует обратимое трансаминирование L-аспартата и 2-оксоглутарата до оксалоацетата и глутамата, при этом в качестве кофактора требуется витамин B6 (пиридоксаль-5-фосфат). Содержание митохондриальной формы АСТ в клетках, как правило, больше цитозольной, что при патологиях может указывать на степень повреждения клеток, поскольку разрушение митохондрий происходит при более тяжелых поражениях. АСТ присутствует практически во всех клетках организма, но наибольшая ее активность отмечается в скелетных мышцах, печени, кардиомиоцитах, эпителиальных клетках слизистой оболочки кишечника. Фермент содержится также в эритроцитах, при разрушении эритроцитов активность АСТ увеличивается. Активность фермента варьирует в зависимости от вида животного.

Как и в случаях с другими внутриклеточными ферментами, по активности АСТ в сыворотке крови нельзя отличить обратимые и необратимые повреждения клеток. Фермент может высвобождаться посредством блеббинга с частичным повреждением клеточной мембраны. Поскольку основная часть АСТ содержится в митохондриях, увеличение активности фермента в следствие обратимого повреждения клетки, возможно, будет меньшим (происходит высвобождение только цитозольной АСТ), чем при необратимом повреждении (некрозе).

Наиболее распространенными причинами повышенной активности АСТ являются повреждения мышечной ткани (скелетной или сердечной), гепатоцеллюлярные заболевания и гемолиз (спонтанный или ятрогенный).

Хотя АСТ, как и АЛТ, в большом количестве представлена в гепатоцитах (в высокой концентрации в клетках околоацинарной области, окружающей центральные вены), активность сывороточной АСТ не является специфичным маркером при повреждении печени. Как правило, значительная активность АСТ свидетельствует о более серьезных повреждениях гепатоцитов, поскольку митохондрии повреждаются не так легко, как клеточная мембрана. Увеличение концентрации АСТ является показателем для измерения АЛТ с целью уточнения генеза «утечки» АСТ (значительное увеличение уровня обеих трансаминаз предполагает, что увеличение активности АСТ имеет печеночное происхождение). Также в случае повреждения гепатоцитов активность АЛТ будет немного выше, чем АСТ.

Снижение активности АСТ происходит в течение нескольких недель и, как правило, нормализуется раньше, чем АЛТ. Поэтому при мониторинге заболеваний необходимы повторные исследования активности фермента. Устойчиво повышенные значения АСТ по результатам серии биохимических исследований могут быть негативным прогностическим признаком.

Поскольку мышцы являются возможным источником сывороточной АСТ, одновременное определение активности тканеспецифических ферментов (например, КФК) позволяет подтвердить, является ли повышенная активность АСТ следствием травмы мышечной ткани.

У кошек и собак период полувыведения АСТ короче, чем АЛТ, и составляет от 4 до 12 часов у собак и около часа (77 минут) у кошек. Таким образом, АСТ может быть более чувствительным маркером при значительных повреждениях печени у кошек. Сывороточная АСТ имеет более длительный период полувыведения, чем КФК, что повышает диагностическую чувствительность во время восстановления от повреждения миоцитов или гепатоцитов.

Подготовка пациента: для получения более точных результатов животные перед исследованием должны находиться на голодной диете не менее 12 часов.

Метод отбора проб: венепункция.

Преаналитика:

1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой, с ГЕЛЕМ.

   2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз. 

   3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.

   4. Центрифугировать при 2000 g (3300об/мин) 10 мин, не позднее 60 минут после взятия.

   5. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.

   6. Стабильность пробы: 1 неделя при +2°С…+8°С (при хранении на геле); более 1 недели при -17°С…-23°С (при необходимости заморозки перенести сыворотку в пустую чистую пробирку с белой крышкой).

   7. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

ВНИМАНИЕ! Минимальный объем крови необходимый для исследования - 2.5 мл

Образец стабилен один день при комнатной температуре (+ 20… + 25 ºС), одну неделю при температуре хранения в холодильнике ( +2ºС…+8ºС) .

Выраженные гемолиз и липемия могут вызвать умеренное увеличение значения АСТ в исследуемой пробе.

Интерпретация результата:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

По активности сывороточной АСТ нельзя определить, произошло ли гепатоцеллюлярное повреждение или травма мышечных клеток, часто требуется дальнейшее тестирование с исследованием активности тканеспецифических ферментов, таких как сорбит-дегидрогеназы или креатинфосфокиназы (КФК). Заметное увеличение активности сывороточной АСТ и сорбит-дегидрогеназы предполагает острое гепатоцеллюлярное повреждение, а значительное увеличение сывороточной АСТ с возрастанием от незначительной до умеренной активности сорбит-дегидрогеназы предполагает хроническое течение печеночного заболевания или восстановление после острого повреждения печени. Аналогичные выводы можно сделать, используя значения сывороточной АСТ и креатинфосфокиназы. Если АСТ повышается без увеличения КФК и без признаков гемолиза, то причиной повышения активности АСТ скорее всего является гепатоцеллюлярное повреждение. Одновременное определение ЩФ или ГГТ может помочь обнаружить сопутствующий холестатический компонент патологии печени. При повышенном уровне АСТ исследование желчных кислот или аммиака в сыворотке крови используют для оценки функции печени.

Сывороточная активность АСТ может быть в пределах нормы или слегка увеличенной при тяжелых заболеваниях печени, которые приводят к значительному снижению печеночной массы, или обусловлены действием токсинов, ингибирующих активность трансаминаз.

Метронидазол может понижать активность АСТ. Также активность АСТ уменьшается при использовании препаратов, подавляющих образование активных форм витамина В6 (например, цефалоспоринов, циклоспорина, изониазида).

Активность АСТ увеличивается в результате действия различных гепатотоксических препаратов (например, эритромицина, рифампицина, сульфаниламидов, ацетаминофена, натрия тиацетарсамида). Противосудорожные (противоэпилептические) лекарственные препараты могут индуцировать синтез фермента или обладать гепатотоксичностью. Кортикостероиды индуцируют активность АСТ у собак.

Повышение уровня:

• Гепатоцеллюлярное повреждение.
• Воспаление (гепатит).
• Действие токсических и лекарственных препаратов.
• Гепатобилиарные неоплазии.
• Применение кортикостероидов.
• Липидоз печени.
• Гипоксия (анемия, сердечно-сосудистые заболевания).
• Панкреатит.
• Повреждение мышечной ткани, мышечное перенапряжение.
• Миозит.
• Цирроз печени.
• Паразитирование печеночного сосальщика.
• Патологическое депонирование меди.
• Внутрисосудистый гемолиз.
• Иммуноопосредованная гемолитическая анемия.
• Оксидативные повреждения (действие цинка, ацетаминофена (у кошек), репчатого лука).
• Кровепаразиты, поражающие эритроциты.
• Гемолиз in vitro (артефакт).

Понижение уровня:

• Атрофия печени (как в случаях формирования хронических и врожденных портосистемных шунтов).
• Снижение концентрации пиридоксаль-5-фосфата.

Форма выдачи результата: количественный тест.

Единицы измерения: Ед/л.

Референсные значения лаборатории VET UNION:

• Собаки: неонаталы (первые три дня жизни, питание молозивом- 44-194 Ед/л; 0-6 мес. ‒ 10-23 Ед/л; 6-12 мес. ‒ 10-20 Ед/л; старше одного года ‒ 10-50 Ед/л.
• Кошки: 0-6 мес. ‒ 10-30 Ед/л; 6-12 мес. – 7-40 Ед/л; старше одного года – 10-56 Ед/л.

Источники литературы:

1. «Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек», Ш. Ваден, Д. Нолл, Ф. Смит, Л. Тиллей, «Аквариум»;
2. «Биохимия», под ред. Е.С. Северина, «ГЭОТАР-МЕД»,;
3. «Veterinary Hematology and Clinical Chemistry», Mary Anna Thrall, Glade Weiser, Robin W. Allison, Terry W. Campbell, «WILEY-BLACKWELL»;
4. Laboratory Profiles of Small Animal Deseases, Charles H. Sodikoff, Mosby.