Исследование на дирофиляриоз (Dirofilaria immitis, определение АГ), собаки

Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens – паразитические нематоды, принадлежащие надсемейству Filarioidea. Окончательными хозяевами паразитов являются собаки, в редких случаях – кошки. Кроме собак, заражению повержены лисы, волки, койоты, дикие кошки, хорьки, ондатры, носухи, морские львы, а также люди. Промежуточными хозяевами являются комары родов Aedes, Anopheles и Culex.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

После инокуляции 2-3 месяца личинки находятся в подкожной клетчатке и мышцах, за это время они два раза линяют. Самки выделяют в кровеносное русло личинок – микрофилярий, которые могут жить в кровеносных сосудах внутренних органов в течение нескольких месяцев. Это личинки первой стадии, их еще называют «личинки стадии L1». При питании комаров на инвазированных животных микрофилярии попадают в организм насекомых, где в течение примерно двух недель происходит их последующее развитие до стадии L3. Во время укуса комара инвазионные личинки проникают в организм окончательного хозяина, после чего мигрируют в подкожную клетчатку и мышцы. В течение последующих нескольких месяцев личинки дважды линяют, проходя стадии развития L4 и L5. Стадия L5 – незрелые взрослые особи гельминтов, достигающие длины 1-2 см. Юные особи D. repens остаются паразитировать в пределах подкожной клетчатки, иногда подвергаясь атипичной миграции (в глаза, нервную систему и др.). Особи D. immitis мигрируют в системный кровоток и током крови заносятся в легочные артерии. Как правило, через 7-9 месяцев после начала инвазии в крови циркулируют микрофилярии. Продолжительность жизни гельминтов в организме собаки может достигать семи лет от момента заражения. Юные и взрослые особи D. immitis локализуются преимущественно в каудальных легочных артериях, иногда мигрируя в главные легочные артерии, при тяжелой инвазии – в правые отделы сердца и крупные вены.

Наличие взрослых червей в легочных артериях ведет к развитию реактивных поражений сосудов, вызывающих снижение податливости сосудистой стенки и уменьшение просвета сосуда. Тяжесть поражений зависит от ряда факторов, включающих число червей, продолжительность их паразитирования и индивидуальные особенности взаимодействия «паразит–хозяин». Характерным симптомом при сердечном дирофиляриозе является ворсинчатая миоинтимальная пролиферация легочных артерий. Повреждения эндотелия сосудов вызывают тромбоз, а также периваскулярную тканевую реакцию и периартериальный отек. Развивающийся аллергический эозинофильный альвеолит может способствовать повреждению паренхимы легких. Наличие мертвых червей способствует усилению иммунного ответа и усугублению поражений легких. Части мертвых червей и тромбы вызывают тромбоэмболию и способствуют усилению воспалительной реакции, приводящих к развитию фиброза. Сердечно-легочный дирофиляриоз является одной из причин легочной гипертензии в эндемичных регионах. Тесты с антигенами дирофилярий позволяют выявить антитела к взрослым самкам возбудителя D.immitis. Обнаружение циркулирующего антигена возможно через 6,5-7 месяцев после инвазирования, но не ранее пяти месяцев. Для диагностики применяется экспресс-тест для выявления Dirofilaria immitis: антигена дирофилярий / сердечных червей- твердофазный иммунохроматографический анализ (прямым сэндвич методом) для качественного обнаружения антигена Dirofilaria immitis. Принцип метода: антитела против Dirofilaria immitis (связывание)<–> Dirofilaria immitis антиген в образце <–> антитела против Dirofilaria immitis (

Показания:

• В рамках ежегодного ветеринарного обследования у животных старше 7 месяцев с целью выявления инфекции, возникшей в предшествующий трансмиссивный сезон;
• У животных после изменения препарата для химио-профилактики;
• У собак с клинической симптоматикой (кашель, непереносимость физической нагрузки, быстрая утомляемость), рентгенологическими или лабораторными изменениями, позволяющими заподозрить дирофиляриоз сердца;
• С целью оценки эффективности терапии, направленной против взрослых паразитов.

Противопоказания:

• Возраст животных менее 7 месяцев;
• Неизбирательное тестирование (если забор пришелся на тот период, когда обнаружение паразитов еще невозможно).

Подготовка пациента: требуется голодная диета 10-12 часов перед исследованием

Метод отбора: венепункция

Преаналитика:

Важно! Если требуется более длительное хранение, сыворотка переносится в эппендорф и замораживается! В таком случае температурный режим транспортировки в лабораторию - 17°С…-23°С (красный пакет).

1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой с гелем, 2,5 мл.
2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз.
3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.
4. Центрифугировать при 3300 об/мин в течение 10 минут, не позднее 60 минут после взятия.
5. Стабильность образца: 5 дней при +2°С…+8°С; 2 месяца при -17°С…-23°С (при хранении более 5 дней сыворотку необходимо отлить в пластиковую пробирку).
6. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.
7. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).
8. Срок исполнения 1 день (плюс 1-2 дня для регионов)

Интерпретация:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Результат тестирования для выявления антигенов обычно положителен через 6-7 месяцев после инфицирования. Ложноотрицательные результаты могут быть получены на протяжении препатентного периода, при инфицировании только самцами паразитов и при небольшом количестве гельминтов.

Форма выдачи результата: качественный метод.

В результате указывается - обнаружен/не обнаружен Ag Dirofillaria immitis

Список источников:

1. Ш. Ваден, Д.Нолл, Ф. Смит,Л.Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.
2. Craig E. Greene, DVM, MS, DACVIM, Infectionus dieseases of the dog and cat, Fourth Edition.