Герпесвирус кошек (инфекционный ринотрахеит, ИРТ) (Feline herpesvirus) (ПЦР)

Герпесвирус кошек FHV-1 (Feline Herpes Virus type 1) — это крупный оболочечный ДНК-содержащий вирус, который встречается у животных повсеместно.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Существует только один серотип FHV-1, изоляты вируса генетически сходны, однако разные штаммы отличаются вирулентностью. По результатам исследований методом вирусологического посева, вирус обнаруживается у 39% кошек, хотя в некоторых питомниках его распространенность может быть выше. Его встречаемость у кошек с острой инфекцией верхних дыхательных путей может достигать почти 100%. У клинически здоровых кошек выделение вируса наблюдается в 10% случаев. Практически у всех заболевших животных развивается латентная инфекция, первоначально поражающая тройничный ганглий. ДНК FHV-1 также обнаруживается в роговице и тканях носовой полости. Реактивация выделения вируса, при котором клинические признаки инфекции верхних дыхательных путей могут наблюдаться или отсутствовать, происходит менее чем у половины кошек с латентной инфекцией в течение 4–12 дней после перенесенного стресса, например, при транспортировке, лактации, наличии сопутствующих заболеваний или использовании иммуносупрессивных препаратов, таких как глюкокортикоиды. Продолжительность выделения вируса после реактивации составляет от 1 до 13 дней (в среднем 7 дней). При выделении вируса во время лактации происходит инфицирование котят.

FHV-1 может сохранять жизнеспособность во внешней среде в течение максимум 18 часов при комнатной температуре и быстро инактивируется высушиванием и большинством дезинфектантов. Передача вируса происходит, главным образом, при непосредственном контакте с инфицированным животным, хотя контаминированные предметы также являются важным фактором передачи инфекции. Воздушно-капельный путь передачи инфекции имеет меньшее значение. Имеются данные о возможности трансплацентарной передачи вируса.

Вначале репликация FHV-1 происходит в клетках слизистой оболочки верхних дыхательных путей, конъюнктиве и миндалинах. Инкубационный период для герпесвирусной инфекции составляет в среднем от двух до шести дней. Выделение вируса начинается на ранней стадии болезни и обычно продолжается в течение 1–3 недель.

Существует две основных группы клинических признаков инфекции FHV-1: симптомы, связанные с острой фазой инфекции, и симптомы хронической инфекции. Активная репликация вируса в эпителии дыхательных путей и конъюнктиве вызывает некроз, сопровождающийся нейтрофильной инфильтрацией и воспалением. Иногда используемый для обозначения данной инфекции термин «вирусный ринотрахеит» не является корректным ввиду того, что поражения трахеи не наблюдается. Могут наблюдаться поражение кожи, секвестрация роговицы, стромальный кератит, эозинофильный кератит и передний увеит. При хронической инфекции отмечаются иммунообусловленные патологии, прежде всего глаз; выраженные респираторные симптомы не характерны. При реактивации инфекции, особенно у кошек старшего возраста, клинические симптомы могут отсутствовать.

Неспецифическими признаками острой инфекции FHV-1 являются лихорадка, угнетение и анорексия. При язвенном рините вначале наблюдаются серозные выделения из носа, которые после развития вторичной бактериальной инфекции становятся слизисто-гнойными. Часто обнаруживается поражение придаточных пазух носа, костей носовых раковин и подлежащей хрящевой ткани, ведущее к развитию хронического ринита. При репликации вируса в роговице возникают блефароспазм, фотофобия, выделения из глаз, дендритные язвы. Язвообразование слизистой оболочки ротовой полости может быть выраженным и вызывать анорексию, болезненность ротовой полости и птиализм. В некоторых случаях развивается интерстициальная пневмония. Смерть больных животных наступает в результате анорексии, дегидратации и вторичных бактериальных инфекций.

Нетипичными симптомами инфекции FHV-1 являются аборты и эозинофильный язвенный дерматоз морды.

Хотя существует несколько причин чихания у кошек, при его персистировании в течение более 48 часов необходимо подозревать наличие вирусной инфекции верхних дыхательных путей, особенно у невакцинированных кошек, и животных, у которых отмечается вышеупомянутый симптом.

Проводить тестирование на наличие ретровирусов необходимо всем кошкам, здоровым и больным. Ретровирусные инфекции могут замедлять выздоровление при вирусных респираторных болезнях.

Возможна изоляция вируса FHV-1 в культуре клеток с использованием мазков из ротоглотки и с конъюнктивы. Однако данный метод исследования редко используется ввиду длительности выполнения и отсутствия стандартизации.

ПЦР позволяет обнаружить ДНК FHV-1 в соскобах с конъюнктивы, образцов секвестров роговицы и других тканей. Данный метод исследования более чувствителен, чем изоляция вируса и считается предпочтительным. Однако, ввиду высокой чувствительности данного метода, возможно обнаружение ДНК, не имеющей отношения к болезни, а также ДНК вакцинного вируса. Поэтому положительный результат ПЦР может свидетельствовать о низком уровне выделения вируса, наличии латентной инфекции, проведенной вакцинации и должен интерпретироваться с учетом результатов других исследований.

Исследуемый аналит: соскоб эпителиальных клеток конъюнктивы.

Подготовка пациента: биоматериал отбирается до применения местных и системных лекарственных препаратов; при наличии гнойного отделяемого необходимо предварительно его удалить при помощи чистой марлевой салфетки, смоченной 0,9% физиологическим раствором (NaCl).

Показания:

• наличие истечений из конъюнктивальных мешков (слизистых или гнойных);
• гиперемия конъюнктивы;
• боль в глазах (блефароспазм, животное трет лапой глаз);
• выявление объемных образований или гиперплазии конъюнктивы.

Противопоказания: наличие тяжелой патологии роговицы может приводить к ее перфорации во время процедуры.

Метод отбора биоматериала: соскоб эпителиальных клеток коньюнктивы.

Преаналитика:

1. Урогенитальный зондом набрать клеточный материал с конъюнктивы.
2. Перенести зонд в микропробирку 2 мл с транспортной средой, вращательными движениями "смахнуть" биоматериал в жидкость, зонд утилизировать.
3. Микропробирку плотно закрыть крышкой до щелчка.
4. Микропробирку маркировать Ф.И.О. владельца, кличкой животного, указать локализацию.
5. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.
6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃…+8℃ (синий пакет)

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Формат выдачи результата: качественный метод. Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК Feline herpesvirus-1 (FHV-1).

Использованная литература:

1. Gaskell R, Dawson S, Radford A, Thiry E. Feline herpesvirus. Vet Res 2007; 38: 337–354.
2. Vögtlin A, Fraefel C, Albini S, et al. Quantification of feline herpesvirus 1 DNA in ocular fluid samples of clinically diseased cats by real-time TaqMan PCR. J Clin Microbiol 2002; 40: 519–523
3. Pedersen NC. Feline herpesvirus type 1 (feline rhino- tracheitis virus). In: Appel MJ, ed. Virus infections of carnivores. Amsterdam: Elsevier, 1987: 227–37.