Цитологическое исследование подходит для диагностики различных новообразований, дифференцировки воспалительного и опухолевого процесса, в некоторых случаях помогает определить качество (доброкачественное или злокачественное) опухолевого процесса. В лаборатории проводится изготовление мазков (прямых и концентрированных) из присланного жидкого материала или окраска уже готовых стёкол с мазками, выполненными в клинике. Информативность цитологического исследования наиболее высока для круглоклеточных опухолей, эпителиальных и мезенхимальных новообразований (кроме новообразований молочных желёз), различных воспалительных процессов. Однако, на основании цитологии нередко сложно судить о потенциальном биологическом поведении той или иной опухоли — например, при диагностике новообразований молочных желёз; также нельзя установить стадийность мастоцитом кошек и собак, и точный тип саркомы. Многие цитологические заключения необходимо подтверждать результатами гистологического исследования.
- Подготовка пациента
- Показания и противопоказания
- Интерпретация и форма выдачи результата
Сроки исполнения: 6 дней (плюс 1-2 дня для регионов).
Исследуемый материал: пунктаты (не выпоты) из образований/полостей/кист (не с водянистым содержимым из-за плохой эксфолиации клеток); стёкла с цитологическими мазками (ТИБ/ТИАБ, мазки-отпечатки биопсийного или операционного материала; менее предпочтительны мазки-отпечатки с поверхности образований и глубокие соскобы из-за их низкой диагностической ценности); стёкла с материалом для AN501 в том случае, если к ним невозможно прислать пробирки; мазки выпотных жидкостей, подозреваемых как метастатические.
Метод исследования: цитологическое исследование окрашенных стёкол.
Показания: новообразования неясной этиологии (для кожной цитологии есть отдельный тест — AN404).
Противопоказания: при пункции новообразований кожи и мягких тканей, лимфатических узлов осложнения крайне редки; при пункции полостных органов и их образований риск может заключаться в развитии кровотечений при изменениях в свёртываемости крови животного; при пункции сосудистых образований (например, гемангиосарком) осложнения наблюдаются чаще всего.
Подготовка пациента: особая подготовка не требуется; у длинношёрстного животного можно выбрить место пункции; все проколы производятся при соблюдении правил асептики и антисептики во избежание контаминации образца.
Метод отбора:
- Тонкоигольная биопсия с аспирацией, ТИАБ (для плотных опухолей, органов с необильным кровообращением):
- Опухоль зафиксировать пальцами.
- Сделать первый прокол новообразования, следя, чтобы игла не прошла сквозь него, а оказалась внутри.
- Не вынимая иглу из новообразования, сделать несколько (2-4) дополнительных проколов в различных направлениях.
- Подсоединить к игле шприц и сделать короткое насасывающее движение поршнем, после которого необходимо снять шприц с игры; повторить 2-3 раза.
- Снять шприц с игры, вынуть иглу, после чего «выдуть» материал шприцом на стекло (следить за тем, чтобы при подсоединении шприца в нём уже был воздух, иначе есть риск «засосать» содержимое иглы в шприц).
-
Изготовить из материала мазок либо путём растягивания (как мазок крови; когда материал жидкий) или распределением между двумя стёклами (для более плотного материала, БЕЗ ДАВЛЕНИЯ!).
Категорически запрещается оставлять материал на стекле в том виде, в котором он был извлечён из шприца. Распределение для формирования мазка ОБЯЗАТЕЛЬНО, из-за плотности мазка морфология клеток не будет визуализироваться и материал окажется неинформативным!
- Тонкоигольная биопсия без аспирации, ТИБ (для хорошо эксфолиирующих клетки опухолей, лимфатических узлов, органов с богатым кровообращением — для исключения контаминации большим количеством крови) — производится аналогично с ТИАБ, но не используется аспирация: после нескольких проколов опухоли материал сразу «выдувается» на стекло шприцом и распределяется по стеклу.
- Мазок-отпечаток поверхности образования:
- Тщательно удалить экссудат во избежание попадания в материал исключительно воспалительных клеток.
- Приложить стекло к очищенному поражённому участку.
- Распределить материал между стёклами или изготовить мазки по типу мазков крови.
- Мазок-отпечаток биопсийного/операционного материала:
- В случае с крупным участком резекции отрезать от него небольшой кусочек.
- Промокнуть биоптат/кусочек салфеткой для удаления излишков крови.
- Приложить биоптат/кусочек к стеклу в разных местах несколько раз.
- Распределять материал по стеклу нужно в случае обильной эксфолиации клеток.
- Процедура ТИАБ/ТИБ органов брюшной полости под контролем УЗИ возможна тремя способами.
- Непрямой метод — в данном случае проекция на кожу и глубина залегания интересующего образования определить при процедуре УЗИ. После этого необходимо убрать датчик и произвести пункцию образования вслепую.
- Метод «свободной руки»:
- Иглу удерживать одной рукой, датчик — другой.
- Проколоть кожу иглой на расстоянии в несколько миллиметров от датчика.
- Совместить плоскость расположения иглы, плоскость сканирования датчика и одну из плоскостей, проходящих через интересующее образование.
- Не следует вводить иглу перпендикулярно плоскости сканирования, поскольку в данной ситуации игла не будет видна на всем её протяжении.
- Под непосредственным контролем УЗИ ввести иглу вплоть до интересующего образования.
- Метод с использованием биопсийной насадки:
- Иглу удерживать специальной биопсийной насадкой, помещаемой на датчик.
- Большинство УЗИ-систем имеют специальное ПО, показывающее траекторию иглы при использовании биопсийной насадки, поэтому для выполнения процедуры путем перемещения датчика визуализируется область интереса таким образом, чтобы она пересекала отображаемую траекторию биопсийной иглы.
- Иглу ввести в специальный канал биопсийной насадки, после чего продвинуть в интересующее образование.
- Люмбальная пункция: отбирать самотеком из атланто-окципитальной или люмбальной цистерны.
Преаналитика:
-
Изготовить из материала мазок либо путём растягивания (как мазок крови; когда материал жидкий) или распределением между двумя стёклами (для более плотного материала, БЕЗ ДАВЛЕНИЯ!).
Категорически запрещается оставлять материал на стекле в том виде, в котором он был извлечён из шприца. Распределение для формирования мазка ОБЯЗАТЕЛЬНО, из-за плотности мазка морфология клеток не будет визуализироваться и материал окажется неинформативным!
-
Мазок высушить на воздухе.
Нельзя складывать стёкла с материалом лицом друг к другу во избежание их слипания и нарушения целостности клеток.
-
Стекло с высушенным цитологическим мазком поместить в пластиковый транспортный контейнер, подписать сам контейнер (вид, кличка животного, фамилия владельца, тест, локализация). При отсутствии контейнера необходимо подписать сами стёкла с обратной стороны мазка.
Стёкла с различных локализаций подписываются ОБЯЗАТЕЛЬНО: либо непосредственная локализация на контейнере, либо номер каждого стекла с переносом локализации по каждому номеру в бланк/на контейнер.
- Высушенные цитологические стёкла хранятся длительное время. До отправки в лабораторию их нельзя хранить в холодильнике.
- Нежелательно отправлять только окрашенные в клинике стёкла (например, из трёх стёкол можно отправить одно окрашенное).
- Отобранные пунктаты необходимо помещать в пробирку с ЭДТА.
- Заполнить все графы направительного бланка с ОБЕИХ сторон! Без данных анамнеза материал работу не принимается!
- Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃...+8℃ (синий пакет).
Интерпретация результата:
- Воспаление:
- Нейтрофильное: бактериальное воспаление (септическое), раздражающая среда (асептическое; для полостей — моча, желчь; для тканей — например, кератин).
- Макрофагальное: обычно характеризует хронический процесс.
- Эозинофильное: реакции гиперчувствительности, аллергические реакции, аутоиммунные реакции, паразитарные инвазии.
- Лимфоцитарное (лимфоцитарно-плазмацитарное): как правило, вторично по отношению к первичному воспалению; аллергические реакции, хронические заболевания, вакцинация.
- (Пио)гранулематозное: крупные микроорганизмы (филаментные бактерии), микобактерии, грибы (бластомикоз, споротрихоз, криптококкоз, актиномикоз), инородные тела (кератин, занозы, т.д.), паразитарные узелки в тканях, кальциноз, реакции на инъекции.
- Новообразования:
- Эпителиальные: эпителиомы, аденомы, карциномы, аденокарциномы в различных локализациях; плоскоклеточный рак (ПКР).
При диагностике новообразований молочных желёз предпочтение отдаётся гистологическому методу исследования, так как на основании цитологической картины сложно судить о их биологическом поведении.
- Круглоклеточные: лимфома, мастоцитома, гистиоцитома, плазмоцитома, трансмиссивная венерическая саркома (ТВС).
- Мезенхимальные: доброкачественные (липома, фиброма, миксома и т.д.) и злокачественные (фибросаркома, остеосаркома, периваскулярные саркомы, миксосаркомы, липосаркомы —исключительно в предположительном виде).
В случае диагностики мезенхимальных новообразований целью цитологического исследования является определение (по возможности) злокачественности или доброкачественности процесса, но не типа саркомы. Они дифференцируются гистологически/иммуногистохимически.
- Реактивная фиброплазия.
- Кровотечения и гематомы.
-
Кистозные образования (фолликулярные кисты, кисты сальных желёз и т.д).
При исследовании содержимых кистозных полостей необходимо избегать «водянистых» прозрачных пунктатов, так как в этом случае материал будет малодиагностичным из-за низкой клеточности: многие кисты плохо эксфолиируют клетки внутрь полости.
Форма выдачи результата: материал и локализация, описание цитологической картины, заключение и комментарии с пояснениями.
Список источников:
- Canine and Feline Cytology, A Color Atlas And Interpretation Guide, 3th Edition (Raskin, Meyer), 2016.
- Canine and Feline Skin Cytology, 2017 (Francesco Albanese).
- Cowell and Tyler's Diagnostic Cytology and Hematology of the Dog and Cat, 4th Edition (Cowell, Tyler), 2014.
- Veterinary Hematology Atlas of Common Domestic and Non-Domestic Species 3rd Edition (Reagan, Rovira, DeNicola).