Билирубин образуется из порфириновой части гема при распаде гемоглобина, миоглобина и цитохромов в клетках ретикулоэндотелиальной системы (РЭС) селезенки, печени и костного мозга. После выхода из клеток РЭС, билирубин (неконъюгированный, свободный, непрямой) связывается с альбумином нековалентной связью и транспортируется в печень. Неконъюгированный билирубин нерастворим в воде и за счет своих липофильных свойств обладает высокой токсичностью, имеет тропизм к клеткам головного мозга (вызывает билирубиновую энцефалопатию). Превращение билирубина в растворимую форму происходит в печени и состоит из трех этапов: поглощения билирубина гепатоцитами, процесса конъюгации и секреции в желчные канальцы.
На поверхности гепатоцитов неконъюгированный билирубин отсоединяется от альбумина и захватывается клетками печени при участии специфических белков-переносчиков. Система поглощения клетками печени билирубина обладает большой емкостью и лимитируется только дальнейшими метаболическими превращениями билирубина. В гепатоцитах билирубин переходит в водорастворимую форму путем последовательного присоединения (конъюгации) двух молекул глюкуроновой кислоты. Образовавшийся конъюгированный (прямой) водорастворимый билирубин с помощью механизма активного транспорта секретируется в желчные канальцы. Небольшое количество глюкуронидов может транспортироваться обратно в кровь, поэтому в крови возможно присутствие как конъюгированной, так и неконъюгированной фракции билирубина. Конъюгированный (прямой) билирубин с желчью поступает в тонкий кишечник. Под действием кишечных бактерий прямой билирубин превращается в уробилиноген и реабсорбируется кишечником. Большая часть реабсорбированного уробилиногена попадает обратно в печень и ресекретируется в желчь путем энтерогепатической циркуляции. Меньшая часть уробилиногена экскретируется почками. Уробилиноген, оставшийся в кишечнике, окисляется до стеркобилина и выводится из организма.
Общий билирубин представляет собой комбинацию конъюгированной (прямой) и неконъюгированной (свободной, непрямой) фракций билирубина. Свободный (неконъюгированный) билирубин традиционно является расчетным показателем и представляет собой разницу между значениями общего и прямого (конъюгированного) билирубина.
Относительно уникальная особенность удаления билирубина в организме лошадей происходит в месте поглощения его гепатоцитом. Недостаток пищи обычно связан с умеренным или выраженным увеличением общего билирубина из-за увеличения неконъюгированной формы. Вероятно, что свободные жирные кислоты и другие метаболические компоненты, которые увеличиваются в голодном состоянии, конкурируют за поглощение неконъюгированного билирубина; он уменьшается, как только возвращается аппетит.
Другой причиной увеличения неконъюгированного билирубина является острый, тяжелый гемолиз. Сопутствующее умеренное или выраженное уменьшение циркулирующей массы эритроцитов, измеряемое гематокритом, указывает на гемолитический процесс.
Внутрипеченочные заболевания и внепеченочная обструкция могут вызывать увеличение общего билирубина, при этом конъюгированный билирубин составляет менее половины общего билирубина.
Подготовка пациента: перед проведением исследования животное должно быть выдержано на голодной диете минимум 12 часов.
Метод отбора: венепункция.
Преаналитика:
· взятие крови – пробирка с красной крышкой с гелем 2,5 мл;
· осторожно перевернуть пробирку 6-8 раз;
· пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре;
· центрифугировать при 3300 об\мин в течение 10 минут, не позднее 60 минут после взятия;
· стабильность пробы 3 дня при +2℃…+8℃ (при хранении на геле);
· заполнить направительный бланк, указав код клиента;
· температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃…+8℃ (синий пакет)
Интерпретация: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Липемия и гемолиз могут быть причиной ошибочного завышения величины содержания билирубина. Не подвергать биоматериал воздействию яркого света! Воздействие прямого солнечного света или флуоресцентного освещения может уменьшать содержание билирубина в образце на 50% в час.
Форма выдачи результата: количественный.
Единицы измерения: мкмоль/л.
Референсные значения: 5-51 мкмоль/л.
Литературные источникп:
«Veterinary Hematology and Clinical Chemistry», Mary Anna Thrall, Glade Weiser, Robin W. Allison, Terry W. Campbell, «WILEY-BLACKWELL»;
Equine Hematology, Cytology, and Clinical Chemistry, Second Edition. Edited by Raquel M. Walton, Rick L. Cowell, and Amy C. Valenciano. 2021 John Wiley & Sons, Inc. Published 2021 by John Wiley & Sons, Inc.
Interpretation of Equine Laboratory Diagnostics. Edited by Nicola Pusterla, Jill Higgins/ 2018 John Wiley & Sons, Inc.