Изготовление стекла из парафинового блока (дорезка с окрашиванием)
В нашей лаборатории используется ротационный микротом системы Майнота с неподвижным ножом для изготовления серийных срезов. Лаборант-технолог настраивает микротом таким образом, чтобы толщина срезов в итоге получилась от 1 до 50 микрон (от 0,001 мм до 0,05 мм). В работу берется готовый и предварительно охлажденный парафиновый блок. Сначала технолог подвергает блок обрезке. Это необходимо для устранения свободного парафина и для максимальной визуализации исследуемого образца. Далее, парафиновый блок прочно закрепляют в зажиме. Предварительно обязательно выверяют угол наклона ножа таким образом, чтобы плоскость лезвия находилась параллельно верхней части блока, а также настраивают угол сечения. Величина угла сечения зависит от характера исследуемого материала. Чем образец мягче, тем меньше будет угол резания. При обработке мягких блоков предпочтение отдается косому расположению ножа. После этого, используя регулировку механизма подачи, лаборант устанавливает блок так, чтобы его поверхность находилась от лезвия ножа на расстоянии 0,5-1 мм. Технолог выполняет как можно больше срезов ткани с целью дальнейшего достижения максимально точной постановки диагноза врачом-патоморфологом.
При изготовлении срезов лаборант-технолог снимает их с микротомного ножа при помощи кисточки и препаровальной иглы таким образом, чтобы не коснуться режущей кромки ножа. По окончании работы нож тщательно очищают от остатков срезов и кусочков прилипшего парафина при помощи тряпочки, смоченной ксилолом. При загрязнении режущей кромки ее промывают ксилолом.
Срезы с ножа собирают на баню с дистиллированной водой, которую подогревают до 37-40℃, что необходимо для обеспечения хорошего расправления срезов без подплавления парафина. Расправленные срезы вылавливают на подготовленные и предварительно маркированные предметные стекла полизиновым покрытием.
После чего лаборант-технолог помещает стекло на специальный термостатируемый столик с температурой 37-38℃ для удаления излишков влаги.
Высушенное стекло подвергают окрашиванию гематоксилин-эозином. При помощи данной окраски можно получить общие сведения о морфологии тканей и составляющих ее клеток. Для более сложных случаев существуют и другие способы окраски. Окраска производится с целью контрастирования и визуализации морфологических структур ткани.
Гематоксилин (основной краситель) окрашивает хроматин клеточных ядер синим цветом, а эозин (кислый краситель) окрашивает всю протоплазму клетки красным цветом.
Сроки исполнения: 3 дня (плюс 1-2 дня для регионов).
Исследуемый аналит: парафиновый блок.
Показания: получение качественных срезов ткани органа/ов, подлежащей дальнейшему исследованию.
Противопоказания: не предусмотрены.
Преаналитика: отправить в лабораторию готовые промаркированные парафиновые блоки, заполненный направительный бланк. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃...+8℃ (синий пакет).
Форма выдачи результата: готовое окрашенное и заключенное гистологическое стекло.
