Гемоплазма (Mycoplasma haemofelis) (количественный тест)

Гемотропные микоплазмы (гемоплазмы) – это мелкие (0,3-0,8 мкм) некультивируемые микроорганизмы, которые локализуются на поверхности эритроцитов и вызывают гемолитическую анемию различной степени тяжести у инфицированных животных. Гемоплазмы поражают широкий круг млекопитающих, включая человека, распространены повсеместно.

Минимум три вида гемоплазм вызывают инфекции у домашних и диких кошек: Mycoplasma haemofelis, Candidatus Mycoplasma haemominutum и Candidatus Mycoplasma turicensis.

M. haemofelis (ранее называемая штаммом из Огайо, или крупной формой Haemobartonella felis) является наиболее патогенным организмом, вызывающим гемолитическую анемию от умеренной до выраженной у иммунокомпетентных кошек. Данное заболевание называется инфекционной анемией кошек. При цитологическом исследовании мазков крови M. haemofelis имеют форму кокков, иногда образующих цепи по три-шесть микроорганизмов.

В группу риска по заражению гемоплазмами входят животные на свободном выгуле или имеющие доступ на улицу.

Считается, что основным путём передачи гемоплазм является передача через кровососущих членистоногих (блох, клещей). Также не отрицается и возможность передачи от матери к потомству и при переливании крови от заражённой кошки.

Появление клинических симптомов наблюдается через 2-34 дня после экспериментального инфицирования. Затем происходит развитие и персистирование анемии в течение 18-30 дней (острая фаза), однако выраженность и продолжительность симптомов на данной стадии значительно варьирует у разных кошек. Причиной анемии является преимущественно экстраваскулярный гемолиз, который сопровождается выраженным регенеративным ответом с появлением ретикулоцитоза. Микроорганизм локализуется на вдавлении поверхности эритроцита. У инфицированных кошек образование связываемых с эритроцитами антител способствует повышению хрупкости эритроцитов и снижает продолжительность их жизни. Микроорганизм также может образовывать мостики между эритроцитами, что способствует утилизации таких эритроцитов селезенкой.

Анемия может приводить к летаргии, отсутствию аппетита, бледности и слабости. Имеют место снижение массы тела и дегидратация. Быстрое развитие анемии может вызывать появление неврологических симптомов, вокализацию, потерю сознания и смерть. У некоторых инфицированных кошек наблюдаются циклические изменения гематокрита и числа пораженных эритроцитов, при этом значительное снижение гематокрита совпадает по времени с появлением большого числа микроорганизмов в мазках крови.

Количественное ПЦР-исследование позволит не только подтвердить факт обнаружения инфекционного агента, но и узнать точное количество генетического материала возбудителя в исследуемой пробе. Руководствуясь результатом количественного исследования возможно сделать выводы об эффективности проводимого лечения и выбрать максимально правильную тактику дальнейших действий.

Эффективность лечения оценивают в динамике по изменению количества микроорганизмов в биоматериале, поэтому до начала терапии необходимо установить исходное количество бактериальных копий (концентрацию ДНК гемоплазм в образце). Успех лечения следует контролировать с помощью количественного ПЦР-исследования для оценки концентрации возбудителя в крови у животного после курса терапии.

Исследуемый аналит: цельная кровь (ЭДТА).

Метод исследования: полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Подготовка пациента: биоматериал отбирается до применения системных лекарственных препаратов.

Показания: анемия, снижение активности, снижение аппетита, снижение массы тела.

Метод отбора биоматериала: венепункция.

Преаналитика:

1.    Провести процедуру взятия крови.

2.    После внесения биоматериала в пробирку с сиреневой крышкой (К3 ЭДТА) осторожно перевернуть пробирку 6-7 раз для перемешивания материала с антикоагулянтом.

3.    Заморозить в вертикальном положении при -17°С…-23°С.

4.    Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного.

5.    Заполнить направительный бланк, указав код клиента.

6.    Сохранность образца 2 недели при -17°С…-23°С.

7.    Температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С…-23°С (красный пакет).

Минимальный объем крови для выполнения исследования – 1 мл

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Формат выдачи результата: количественный метод.

Обнаружение и определение количества копий ДНК Mycoplasma haemofelis в исследуемой пробе.

Результат выдаётся в формате Х×10^Х копий ДНК/мл, где Х – точное количественное значение.