Мутация в гене C-KIT
Рецептор фактора роста тучных и стволовых клеток (SCFR), или белковая тирозинкиназа Kit (CD117) — рецепторная тирозинкиназа, продукт гена KIT. Впервые описан в 1987 году. Существует несколько изоформ белка.
Мутация в гене C-KIT приводит к неадекватной сигнализации и пролиферации клеток, несущих мутантный белок. Это играет основную роль в онкогенезе. Продукт экспрессии гена - протоонкоген CD117 у здорового животного синтезируется на поверхности тучных клеток, стволовых клеток, меланоцитов, интерстициальных клеток Кахаля в стенке органов ЖКТ, клеток потовых желез и отвечает за пролиферацию, дифференцировку и выживание клеток. Измененные варианты CD117, синтез которых обусловлен прежде всего мутациями гена KIT (c-kit), играет существенную роль в образовании многих типов опухолей, в том числе гастроинтестинальных стромальных опухолей (GIST/ГИСТ), острой миелоидной лейкемии (ОМЛ), меланомы, и тд.
ГИСТ отличаются высокой экспрессией маркера CD117, возникают в разных отделах ЖКТ из предшественников интерстициальных клеток Кахаля.
Опухоли тучных клеток кожи (ТСК) являются наиболее частыми злокачественными опухолями кожи у собак. Мутации в протоонкогене c-KIT коррелируют с патогенезом и агрессивностью МСТ.
Клинические проявления тучноклеточной неоплазии и биологическое поведение значительно различаются у разных видов млекопитающих, варьируя от одиночного доброкачественного образования до агрессивного системного злокачественного новообразования.
Определенные мутации в гене КIT у собак связаны с более злокачественными и смертельными заболеваниями. У кошек и человека подобные мутации в новообразованиях тучных клеток не коррелируют с прогнозом, однако имеют значение для диагностики и планирования лечения. Данные мутации в гене плохо изучены у других видов, хотя аберрантное цитоплазматическое окрашивание белка Kit, обнаруженное в новообразованиях хорька, лошади и коровы, напоминает паттерны аберрантного окрашивания Kit, обнаруженные в опухолевых тучных клетках собак, кошек и людей.
Подготовка пациента: зависит от выбранного аналита для исследования.
Показания:
· Новообразования кожи у собак.
· Подозрение на мастоцитому.
· Прогнозирование заболевания при МСТ.
· Для определения потенциальной чувствительности опухолей к таргетной терапии при гастроинтестинальной стромальной опухоли (GIST, ГИСО), мастоцитоме.
· Диагностика заболеваний, ассоциированных с мутацией cKit.
· Перед началом химиотерапии и при дальнейшем мониторинге терапии.
· При рецидиве заболевания, ассоциированного с мутацией cKit.
Противопоказания: неизвестны.
Метод отбора биоматериала: венепункция, ТИБ/ТИАБ, биопсия.
Преаналитика:
ВАЖНО! При заказе исследования из цельной крови необходимо приложить копию результата общего анализа крови. Допускаются в работу окрашенные стекла цитологические (не гистологические) с подтвержденный диагнозом «мастоцитома».
Порядок действий:
1. Биоптат ткани: поместить в стерильный контейнер с красной крышкой заполненный 70% спиртом в соотношении ткань:спирт 1:10. Если биоптат размером до 0,5 см - в качестве контейнера использовать эппендорф (наполненить 70% спиртом, соотношение ткань:спирт то же). Плотно закрыть контейнер крышкой. Если используется эппендорф - пробирку плотно закрыть крышкой до щелчка.
2. Аспиратов ткани: использовать пробирку с розовой крышкой (ЭДТА). Поместить аспират на дно пробирки. Если срок хранения и транспортировки превышает 48 часов, материал замораживается в пробирке.
3. Цельная кровь и костный мозг: набрать биоматериал строго до отметки на этикетки пробирки с розовой крышкой (ЭДТА). Перевернуть пробирку 7-10 раз для перемешивания биоматериала с антикоагулянтом.
4. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца, кличкой животного. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.
5. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С…+8°С (синий пакет). Для аспирата – если срок хранения превысил 48 часов, температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С…-23°С (красный пакет).
Интерпретация результата: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Форма выдачи результата: качественный (обнаружена/не обнаружена мутация C-KIT)
Источники:
1) «Sensitivity for the detection of a clonally rearranged antigen receptor gene in endoscopically obtained biopsy specimens from canine alimentary lymphoma» Kenjiro Fukushima 1, Koichi Ohno, Yuko Koshino-Goto, Kazuyuki Uchida, Kohji Nomura, Masashi Takahashi, Ko Nakashima, Yasuhito Fujino, Hajime Tsujimoto.
2) PMID: 20046040 DOI: 10.1292/jvms.001673 или J Vet Med Sci. 2009 Dec;71(12):1673-6. doi: 10.1292/jvms.001673.
3) «First-time application of a PCR-based clonality assay in a large cohort of non-domestic felines» Sophia Unterkreuter 1, Annika Posautz 2, Barbara C Rütgen 3, Sandra Groiss 1, Anna Kübber-Heiss 2, Sabine E Hammer 4
4) P Res Vet Sci. 2021 Mar;135:511-516. doi: 10.1016/j.rvsc.2020.11.011. Epub 2020 Nov 19.«MID: 33243452 DOI: 10.1016/j.rvsc.2020.11.011
5) «Polymerase chain reaction for antigen receptor rearrangement: Benchmarking performance of a lymphoid clonality assay in diverse canine sample types» E. J. Ehrhart,Shukmei Wong,Keith Richter,Victoria Zismann,Carolyn Grimes,William Hendricks,Chand Khanna.
6) First published: 02 April 2019 https://doi.org/10.1111/jvim.15485.
7) «Cross Lineage Rearrangement in Feline Enteropathy-Associated T-cell Lymphoma» C. Andrews, M. Operacz, R. Maes, .First Published July 27, 2015, Veterinary Pathology.
8) « Anaplastic Large T-Cell Lymphoma in the Intestine of Dogs»Lauren W. Stranahan, Derick Whitley, Tuddow Thaiwong, Matti Kiupel, Fabiano Oliveira; First Published June 6, 2019 Veterinary Pathology.
9) «Results of histopathology, immunohistochemistry, and molecular clonality testing of small intestinal biopsy specimens from clinically healthy client-owned cats» Sina Marsilio,Mark R. Ackermann,Jonathan A. Lidbury,Jan S. Suchodolski,Jörg M. Steiner ; February 2019.
10) «Gastrointestinal stromal tumors: a comprehensive review» Trisha M. Parab, Michael J. DeRogatis, Alexander M. Boaz, Salvatore A. Grasso, Paul S. Issack2, David A. Duarte, Olivier Urayeneza, Saloomeh Vahdat, Jian-Hua Qiao, Gudata S. Hinika; JGO No 1 (February 2019).
