Креатинкиназа катализирует обратимую реакцию переноса фосфатного остатка между креатинфосфатом и АДФ. Кардиомиоциты и скелетные мышцы в условиях низких энергетических затрат накапливают энергию в виде креатинфосфата, и при возрастании энергетических потребностей (при сокращении мышц) КФК катализирует перенос высокоэнергетического фосфата от креатинфосфата к АДФ с образованием АТФ.
Небольшая активность КФК отмечается в митохондриях, где она отвечает за передачу высокоэнергетического фосфата на креатинин с образованием креатинфосфата, который переносится в цитозоль. У большинства видов животных самая высокая концентрация КФК наблюдается в мышечной ткани. В скелетной мускулатуре активность КФК в 2-4 раза выше, чем в сердечной мышце, хотя у кошек в этих тканях активность КФК почти одинаковая. Активность КФК в мозговой ткани составляет примерно 10% от таковой в скелетных мышцах. КФК обнаруживается в других тканях (почках, кишечном тракте, матке, щитовидной железе и мочевом пузыре), но в гораздо меньшей концентрации.
Выделяют четыре фракции фермента: КФК-MM, КФК-BB, КФК-MB и КФК-Mt. Скелетные мышцы большинства видов животных содержат КФК-MM (мышечный изофермент). Сердечная мышца содержит изоформу КФК-ММ, а также разное количество КФК-MB (сердечный изофермент) в зависимости от вида животных. У собак и лошадей сердечная мышца содержит приблизительно 3% и 10% КФК-МВ, соответственно. В мозговой ткани в большей концентрации содержится КФК-BB (мозговой изофермент) и небольшое количество изоформ КФК-MB и КФК-MM. BB фракция КФК присутствует в периферических нервах, спинно-мозговой жидкости и внутренних органах. При повреждениях головного мозга гематоэнцефалический барьер препятствует проникновению КФК в кровь, но не мешает проникновению фермента в цереброспинальную жидкость. В кишечнике, почках и селезенке у собак преимущественно содержится изофермент КФК-BB, в меньшей степени КФК-MB и КФК-MM. Четвертый изофермент – КФК-Mt находится в митохондриях многих тканей.
В ветеринарии исследование различных фракций фермента не нашло широкого применения, и, хотя экспериментальные исследования показали целесообразность их определения, исследование специфических изоферментов редко используются в клинической практике ввиду недостаточной прогностической значимости. У домашних животных уровень КФК чаще всего используется в качестве маркера повреждения мышечной ткани в результате травмы, хирургического вмешательства, внутримышечных инъекций или врожденной миопатии (в случаях приобретенной миопатии отмечается умеренное повышение КФК). Чувствительность и специфичность показателя активности КФК в сыворотке крови наиболее информативны в диагностике повреждений скелетных мышц, миокарда, а также при неврологических расстройствах у собак (вследствие повышения фракции КФК-ММ), но при гипертрофии миокарда активность КФК в сыворотке крови собак, как правило, не меняется. У кошек значительное повышение активности КФК в сыворотке крови отмечается в состоянии анорексии (в результате мышечного катаболизма), что дает возможность использовать оценку уровня КФК у этих животных в качестве маркера нутритивного статуса.
Увеличение активности КФК после повреждения мышц происходит быстро и достигает максимума через 6-12 часов, но в результате короткого период полувыведения уровень КФК быстро снижается (в течение 24-48 часа после травмы). Таким образом, постоянное увеличение активности КФК указывает на длительность травматического повреждения мышц. Период полувыведения КФК из крови относительно короткий у всех видов животных и составляет в среднем 6,5 часов (при мышечном повреждении).
Показания:
· заболевания скелетных мышц (миодистрофии);
· диагностика инфаркта миокарда;
· травматические поражения;
· онкологические заболевания
Противопоказания: отсутствуют.
Подготовка пациента: перед проведением исследования животное должно быть выдержано на голодной диете минимум 12 часов. Обязательно центрифугирование проб крови, не позднее 60 минут с момента взятия.
Метод отбора: венепункция.
Преаналитика:
Порядок действий:
1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой с гелем, 2.5 мл.
2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз.
3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.
4. Центрифугировать при 3300 об/мин. 10 мин, не позднее 60 минут после взятия.
5. Стабильность пробы: Стабильность пробы: 2 недели при +2°С…+8°С (при хранении на геле); 1 месяц при -17°С…-23°С (при необходимости заморозки перенести сыворотку в пустую чистую пробирку с белой крышкой).
6. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.
7. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).
МИНИМАЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КРОВИ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ 20 БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ 2.5 МЛ
Интерпретация: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Превышение референсных значений КФК является показателем повреждения мышц, и степень увеличения показателя, как правило, пропорциональна тяжести полученной травмы. Увеличение сывороточной активности КФК следует ожидать после операционного вмешательства. Активность КФК в сыворотке крови в 2,5 раза выше, чем активность этого фермента в плазме крови у собак, и, возможно, других видов животных, в связи с высвобождением КФК из тромбоцитов во время образования сгустка. В эритроцитах содержится незначительное количество КФК, тем не менее ферменты и промежуточные продукты, высвобождаемые из эритроцитов при гемолизе, могут повлиять на результаты исследования и вызвать ложное повышение активности креатинкиназы.
У всех видов животных при повреждении мышц специфичность сывороточной активности КФК выше, чем АСТ и не зависит от гепатоцеллюлярного повреждения. Короткий период полувыведения КФК снижает диагностическую чувствительность, но является эффективным средством мониторинга ответной реакции на терапию. Увеличение активности АСТ возникает позднее увеличения КФК, такая закономерность может помочь в оценке длительности полученной травмы. У морских млекопитающих, по всей видимости, содержание CPK в плазме сильнее всего возрастает при повреждении скелетной мускулатуры, связанном с физическими перегрузками, транспортировкой, хирургическим вмешательством, выбросом на сушу, судорогами и внутримышечными инъекциями. У каланов концентрации CPK варьируют в широких пределах, возможно, под воздействием процедур взятия проб крови и сопротивления животных при поимке. Возможности использования концентраций изоферментов CPK у морских млекопитающих изучены недостаточно хорошо.
Некоторые лекарственные препараты влияют на сывороточную активность КФК. Введение кортикостероидных препаратов может увеличить значение КФК. Введение стрептокиназы и последующее реперфузионное повреждение могут увеличить активность КФК. Инсулин активирует КФК, что увеличивает значение показателя. Увеличение значения КФК при применении амфотерицина В является результатом повреждения мышц, вызванным тяжелой гипокалиемией. Препараты, которые могут быть причиной развития иммунообусловленного полимиозита, увеличивают сывороточную активность КФК (пенициллин, D-пеницилламин, сульфаниламиды и фенитоин).
Повышение показателя:
· травматическое повреждение мышц:
физическая травма;
внутримышечные инъекции;
послеоперационные травмы;
инфекционные и/или воспалительные заболевания мышц;
· другие заболевания, вызывающие мышечные повреждения:
физическая нагрузка;
дирофиляриоз;
бактериальный эндокардит;
· метаболические миопатии
поражение скелетной мускулатуры
· поражение сердечной мышцы
· поражение центральной нервной системы
· стресс, вызванный ветеринарными процедурами или выбросом на сушу
Понижение показателя: не имеет клинической значимости.
Повышения концетрации CPK могут наблюдаться при гемолизе, понижения – при использовании антикоагулянтов EDTA, оксалата и цитрата. Применение кортикостероидов может повышать концентрации CPK в плазме.
Форма выдачи результата: количественный тест
Единицы измерения: Ед/л
Референсные значения: на данный момент отсутствуют.
Список источников:
1) CRC Handbook of Marine Mammal Medicine, 3rd Edition by Frances M.D. Gulland, Leslie A. Dierauf, Karyl L. Whitman March 2018
2) Encyclopedia of Marine Mammals, 2nd Edition. by Bernd Würsig, William Perrin, Bernd Würsig, J.G.M. Thewissen, November 2008
3) Marine mammals as health sentinels of the oceans. Michelle Lynn Reddy, Leslie A. Dierauf, and Frances M. D. Gulland.