Хламидиоз (Chl. felis) (ПЦР)

Хламидии – облигатные внутриклеточные бактерии рода Chlamydiales, которые вызывают главным образом конъюнктивит у кошек, но также могут играть роль в развитии системных и репродуктивных патологий у собак и кошек, которые до настоящего времени недостаточно хорошо изучены.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Хламидии существуют в двух формах: элементарное инфекционное тельце, имеющее диаметр от 0,2 до 0,6 мкм, которое существует вне клетки, и ретикулярное тельце, имеющее больший размер (от 0,5 до 1,5 мкм), которое не является инфекционным и способно делиться в цитоплазме клеток хозяина до достижения зрелости – образования элементарного инфекционного тельца. Элементарные тельца способны выживать во внешней среде при комнатной температуре в течение всего нескольких дней и быстро инактивируются большинством дезинфектантов. Передача инфекции, в основном происходит при прямом контакте, иногда воздушно -капельным путем, возможно инфицирование котят матерью после рождения. Контаминированные предметы играют важную роль в передаче инфекции при групповом содержании кошек.

Хламидии локализуются в эпителиальных клетках зрительной, дыхательной, пищеварительной и мочеполовой систем; сообщалось об инфекциях с поражением синовии. У одних видов хламидий имеется тенденция к видоспецифичности, другие виды могут вызывать инфекции у различных видов животных.

Наиболее значимым патогеном у кошек по всему миру является Chlamydophila felis, вызывающая острый и хронический конъюнктивит. Инфекция чаще всего наблюдается в условиях группового содержания кошек, особенно в питомниках. ДНК C. felis редко обнаруживается в мазках с конъюнктивы от клинически здоровых кошек. Имеются данные, согласно которым хламидии обнаруживаются у 30% кошек с конъюнктивитом. Инфекция C. felis чаще встречается у молодых кошек, главным образом, в возрасте от 2 до 12 месяцев. Защита от инфекции котят до двух месяцев обеспечивается материнскими антителами, хотя сообщалось о случаях неонатальных инфекций. У кошек старше 5 лет развитие инфекции C. felis очень маловероятно. Часто наблюдаются коинфекции другими респираторными патогенами, такими как герпесвирус кошек 1 (FHV-1) и калицивирус кошек (FCV).

Неизвестно, возможна ли передача инфекции половым путем, как в случае с другими видами хламидий, однако у некоторых из инфицированных кошек микроорганизмы обнаруживаются в выделениях из влагалища.

После попадания элементарных инфекционных телец в организм животного они превращаются в ретикулярные тельца, которые размножаются с помощью простого деления с образованием включений, которые не подвергаются слиянию с лизосомами. Затем ретикулярные тельца вновь превращаются в элементарные тельца, которые высвобождаются во внеклеточное пространство после лизиса клетки и инфицируют другие клетки хозяина. Полный цикл репликации продолжается около двух дней.

Хламидии поражают главным образом эпителиальные клетки, однако могут инфицировать клетки эндотелия, гладкой мышечной ткани, лимфоциты, моноциты и макрофаги. C. felis размножается в цитоплазме эпителиальных клеток конъюнктивы, после чего с кровотоком микроорганизм проникает в миндалины, легкие, печень, селезенку, органы желудочно-кишечного тракта и почки. Через 2-5 дней после инфицирования обычно наблюдается острый, хронический или рецидивирующий конъюнктивит, также симптомы ринита, такие как выделения из носа и чихание. Клиническое состояние большинства кошек остается удовлетворительным, аппетит сохраняется. Симптомы поражения нижних отделов респираторного тракта, такие как кашель и диспноэ, наблюдаются в редких случаях, так же как кератит и изъязвление роговицы. Последние обычно вызываются коинфекцией таких патогенов, как FHV-1.

После периода острого конъюнктивита инфекция может персистировать в течение многих месяцев, сопровождаясь слабо выраженным конъюнктивитом, либо симптомы болезни могут отсутствовать.

В одном исследовании хламидии были выделены из конъюнктивы через 215 дней после экспериментального инфицирования. Остается неясным, является ли хроническая форма заболевания результатом реинфицирования либо персистирования хламидий в организме. Коинфекции другими патогенами, такими как FCV, FHV-1, Bordetella и Mycoplasma могут способствовать повышению тяжести заболевания и продолжительности периода выделения микроорганизма во внешнюю среду.

Остается неясным, может ли инфекция C. felis вызывать поражение репродуктивной системы у кошек. В этом могут играть роль такие факторы, как срок беременности, наличие коинфекции, например, FHV-1, наличие иммуносупрессии, путь передачи инфекции, штамм микроорганизма.

Инфекции хламидий редко встречаются у собак. Сообщалось об инфекции Chlamydia psittaci у собак с респираторными заболеваниями, сопровождавшимися пневмонией и плевральным выпотом, а также кератоконъюнктивитом. В одном исследовании у группы сук с выделениями из глаз и признаками поражения нижних отделов дыхательных путей были случаи рождения мертвых щенков и снижения размера помета. По результатам исследования мазков с конъюнктивы и глотки методом ПЦР была обнаружена C. psittaci.

Внедрение метода ПЦР в диагностике инфекций хламидий у животных было революционным прорывом ввиду его быстроты, чувствительности и специфичности. Дополнительным преимуществом является тот факт, что образцы для исследования не требуют специальных условий при транспортировке.

Существуют тест-системы ПЦР, как стандартные, так и в реальном времени, при этом в качестве образца для исследования обычно используются мазки с конъюнктивы и носовой полости и смыв, полученный путем бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ).

Необходимо иметь в виду, что после начала антибиотикотерапии в течение нескольких дней результаты ПЦР обычно остаются положительными. Использование растворов для местного применения, таких как проксиметакаин и флюоресцеин, не оказывает влияния на результаты исследования методом ПЦР в реальном времени на наличие инфекции C. felis, однако наблюдается незначительный ингибирующий эффект при использовании фузидовой кислоты. Ввиду того, что у некоторых кошек при отсутствии конъюнктивита, возможно получение положительных результатов ПЦР на C. felis, интерпретация данных должна осуществляться с учетом данных анамнеза, наблюдаемой клинической картины и реакции на проводимое лечение.

Исследуемый аналит: эпителий конъюнктивы.

Подготовка пациента: биоматериал отбирается до применения местных и системных лекарственных препаратов; при наличии гнойного отделяемого, необходимо предварительно его удалить при помощи чистой марлевой салфетки, смоченной 0,9% физиологическим раствором (NaCl).

Показания:

• наличие истечений из конъюнктивальных мешков (слизистых или гнойных);
• гиперемия конъюнктивы;
• боль в глазах (блефароспазм, животное трет лапой глаз);
• выявление объемных образований или гиперплазии конъюнктивы.

Противопоказания: наличие тяжелой патологии роговицы может приводить к ее перфорации во время процедуры.

Метод отбора биоматериала: соскоб эпителиальных клеток конъюнктивы с помощью зонда.

Интерпретация результата: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: качественный метод.

Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК Chlamydia felis

Использованная литература:

1. Sykes JE. Feline chlamydiosis. Clin Tech Small Anim Pract. 2005 May;20(2):129-34. Review.