Лептоспироз (Leptospira spp.) (ПЦР)

Leptospires - подвижные тонкие нитевидные бактерии размером 6,0-25 мм в длину и 0,1-0,2 мм в ширину. На основании различий в углеводном компоненте бактериального липополисахарида выделяют более 250 патогенных сероваров лептоспир.

Иммунитет к лептоспирам зависит от серогруппы. Различные серовары адаптированы к различным хозяевам среди диких или домашних животных. Лептоспироз у собак вызывается в первую очередь патогенными сероварами вида Leptospirainterroganssensulato. Сообщалось также, что некоторые из этих сероваров вызывают инфекции у кошек. Лептоспиры могут оставаться инфекционными в течение нескольких месяцев при температуре около 25 ° C, влажности и нейтральный pH почвы.

Заражение лептоспирами может происходить прямым путем через мочу от зараженных животных, половым путем, трансплацентарно, при укусах или при поедании трупов инфицированных животных. Собаки чаще заражаются посредством контакта с загрязненной лептоспирами водой, при этом лептоспиры проникают в организм через раны на коже, либо через неповрежденные слизистые оболочки. Кошки, в отличие от собак, чаще всего заражаются при контакте с грызунами, которые служат естественными резервуарами лептоспир в природе.

Лептоспироз собак протекает в геморрагической или желтушной формах. Течение может быть острым, подострым, хроническим и латентным. Геморрагическая (безжелтушная) форма лептоспироза отмечается в основном у собак старшего возраста, как правило, в острой или подострой форме. Геморрагическая форма характеризуется кратковременной гипертермией до 40-41,5 °С, вялостью, анорексией, повышенной жаждой, гиперемией слизистых оболочек ротовой и носовой полости, конъюнктивы. Желтушная форма регистрируется у молодняка в возрасте 1-2 лет. Болезнь может протекать остро, подостро и хронически. Основным симптомом является ярко выраженная иктеричность – окрашивание в желтый цвет различной степени интенсивностислизистых оболочек ротовой, носовой полости, влагалища, а также кожи живота, промежности, внутренней поверхности ушей и других участков.

Лептоспироз кошек проявляется реже, чем у собак, так как протекает субклинически и вызывает полиурию/ полидипсию, легкую диарею и небольшое повышение температуры тела.

Диагноз лептоспироз подтверждают с помощью микроскопии мочи в темном поле, культивированием бактерий из мочи, крови и спинномозговой жидкости. Широко используется определение антител к различным серотипам лептоспир в реакции микроагглютинации (РМА). При использовании этого метода важно учитывать вакцинальный анамнез больного животного.

При проведении исследования важно учитывать сроки присутствия возбудителя в различных биологических жидкостях (крови либо моче) и тканях, а также проведение предварительной антибиотикотерапии.

Показания: иктеричность или гиперемия слизистых оболочек, гипертермия, анорексия, угнетение у собак с соответствующим анамнезом; у бездомных кошек в качестве дифференциальной диагностики при неспецифических признаках (гипертермия, полиурия/полидипсия, угнетение и др.).

Противопоказания:

• риск кровотечений при биопсии образований с полостью;

• риск значительных кровотечений возрастает при наличии у животного выраженной тромбоцитопении или других коагулопатий;

• противопоказания перед проведением общей анестезии, согласно степени оценки группы риска животного.

Подготовка пациента: биоматериал отбирается для исследования до применения системных антибактериальных препаратов; стандартная подготовка перед проведением общей анестезии. Перед проведением процедуры животное должно быть выдержано на 10-12 часовой диете. Перед проведением вмешательства необходимо выбрить шерсть и обработать кожу соответствующей области раствором антисептика.

Метод отбора: биопсия либо аутопсия ткани

Преаналитика:

1. Провести операционную/аутопсийную вырезку фрагмента ткани.

2. Ткань поместить в микропробирку с транспортной средой.

3. Микропробирку плотно закрыть крышкой до щелчка.

4. Пробирку промаркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.

5. Заморозить при температуре -17°С...-23°С в вертикальном положении.

6. Сохранность образца 1 месяц при -17°С…-23°С.

7. Температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С...-23°С (красный пакет).

ВНИМАНИЕ! Размер ткани не должен превышать 0,5х0,5х0,5 см.

Интерпретация: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: Результат исследования Leptospiraspp.выдается в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

«Обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты ДНК, специфичные для Leptospiraspp..

«Не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Leptospiraspp., или концентрация ДНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

Список источников:

1. Chomel BB. Emerging and Re-Emerging Zoonoses of Dogs and Cats. Animals (Basel). 2014 Jul 15;4(3):434-45. doi: 10.3390/ani4030434.

2. André-Fontaine G. Canine leptospirosis--do we have a problem? Vet Microbiol. 2006 Oct 5;117(1):19-24. doi: 10.1016/j.vetmic.2006.04.005.