Дефицит эритроцитарной пируваткиназы кошек (Erythrocyte Pyruvate Kinase Deficiency, PK-def)

Гемолитическая анемия, вызванная недостаточной активностью фермента пируваткиназы – фермента, катализирующего превращение фосфоэнолпирувата в пируват и таким образом участвующего в гликолитической реакции образования АТФ. При его дефиците развивается нестабильность эритроцитов, что приводит к анемии. Данная патология в основном протекает не остро или же развивается постепенно, поэтому больное животное имеет возможность приспособиться к анемии и не демонстрировать характерные симптомы. По причине нечеткой, волнообразной клинической картины и вероятности проявления в любом возрасте без проведения генетических тестов это заболевание можно неправильно диагностировать.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Возраст появления первых клинических признаков от 1 мес. до 8 лет. Тяжесть симптомов невозможно предсказать, а летальные исходы описаны в возрасте от 1 г до 11,3 лет.

Клинические признаки могут сильно варьироваться: от снижения аппетита с потерей веса до состояния летаргии. У животных может наблюдаться бледность слизистых оболочек, отказ от еды, тахикардия, увеличение объема живота по причине спленoмегалии. В некоторых случаях развивается иктеричность, атрофия мышц, спонтанный коллапс.

Биохимический анализ крови, как правило, выявляет увеличение уровня железа – гиперферремию, повышение уровня билирубина. Клинический анализ крови может показать следующие отклонения от нормы: ретикулоцитоз, пoйкилoцитоз, пoлихромазию, тромбоцитоз, лейкоцитоз.

Породы: Абиссинская, Сомали, Бенгальская, Египетская мау, Лаперм, Мейн-кун, Норвежская лесная кошка, Ориентальная, Саванна, Сибирская кошка, Сингапурская кошка (сингапура).

Сроки исполнения: 11 рабочих дней (плюс 1-2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: сухая кровь.

Показания: выявить носителей заболевания с целью исключения из воспроизводства.

Противопоказания: Гематрансфузия. Возможна сдачи крови не ранее чем через 10 дней после проведенного переливания крови. В этот период в случае необходимости возможна сдача букального эпителия на генетическое исследование.

Подготовка пациента: не требуется.

Метод отбора: венепункция.

Метод исследования: ПДРФ

Преаналитика: после заполнения направительного бланка, к нему необходимо прикрепить копию родословной животного. При отсутствии родословной предоставляется копия метрики животного.

Порядок действий:

1. Провести идентификацию животного.

2. Подготовить чистую бумажную салфетку (не использовать туалетную бумагу и марлевые салфетки), состоящую из двух-трех слоев, но не более. Салфетка не должна содержать каких-либо пропиток и красителей.

3. Подготовить бумажный конверт для биоматериала (рекомендованный размер конверта - С6), на конверте подписать кличку животного, фамилию владельца, чип/клеймо при их наличии.

4. Подготовить чистую непромокаемую поверхность, обработанную перекисью водорода (H₂O₂), на которой будет располагаться бумажная салфетка с кровью до полного высыхания биоматериала.

5. При заборе биоматериала у нескольких животных, необходимо перед каждым новым взятием обработать поверхность перекисью водорода (H₂O₂), куда первоначально будет помещена салфетка с биоматериалом.

6. Положить салфетку на чистую непромокаемую поверхность.

7. Обработать участок кожи перед венепункцией перекисью водорода(H₂O₂),обрабатывать место забора крови 96%-м спиртом запрещено.

8. Взять у животного венозную кровь в одноразовый шприц или в вакуумную пробирку с сиреневой крышкой / Калий ЭДТА*. Достаточный объем крови в шприце – 0,5 мл, в пробирке с ЭДТА для точного соотношения кровь-антикоагулянт необходимо набрать пробирку до указанной отметки

9. Собранную кровь медленно вылить в центр салфетки до образования пятна диаметром 2-3 см.

10. Дождаться полного высыхания крови при комнатной температуре до формирования корки (1 час).

11. Вложить салфетку с пятном крови в бумажный конверт для биоматериала, закрыть и заклеить конверт.

12. Заполнить все строки направительного бланка

Интерпретация: проводится ветеринарным специалистом

Аллели:

•            N - норма

•            M - мутация

Форма выдачи результата:

NN - Не несет аллель заболевания. Заболевание, ассоциированное с исследованной мутацией, не будет развиваться. Животное не передаст аллель заболевания потомству.

NM -Носитель аллеля заболевания. Заболевание, ассоциированное с исследованной мутацией, не будет развиваться. Животное может передать аллель заболевания потомству.

ММ -Две копии аллеля заболевания. Высокая вероятность развития заболевания, ассоциированного с исследованной мутацией. Животное передаст аллель заболевания потомству.

Список источников:

1. Breed Predispositions to Disease in Dogs and Cats, 3rd Edition. by Alex Gough, Alison Thomas, Dan O'Neill, January 2018;
2. Genetics and the Behavior of Domestic Animals, 2nd Edition. by Temple Grandin, Mark J. Deesing, June 2013.