Определение антигена р27 FeLv (Feline leukemia virus) (тИФА)

Вирусная лейкемия кошек вызывается FeLV (Feline Leukemia Virus) – оболочечным РНК-содержащим вирусом рода Gammaretrovirus, принадлежащим семейству Retroviridae. Инфекция FeLV является одной из ведущих причин смерти кошек, вызывая иммуносупрессию, патологии костного мозга и развитие опухолей гематопоэтической ткани.

Инфекция FeLV прогрессирует быстрее, чем FIV, и является более патогенной, поэтому кошки с прогрессирующими инфекциями обычно погибают вследствие осложнений. В отличие от FIV, у многих кошек на ранней стадии инфекции FeLV наблюдается регресс до начальной стадии латентного вирусоносительства («регрессирующая инфекция»).

Передача FeLV-A происходит преимущественно при контакте со слюной больного животного, например, при вылизывании, груминге и совместном использовании мисок для корма и воды. Также возможна передача при укусах (в том числе блошиных), переливании крови от больных животных, с молоком.

Вирус неустойчив к действию факторов внешней среды и быстро инактивируется дезинфектантами, мылом и при высушивании. Общая распространенность инфекции FeLV снизилась за последнее время благодаря широкому внедрению в практику специальных методов исследования и вакцинации. Риск развития инфекции повышен у животных, имеющих доступ на улицу, контактирующих с другими кошками, интактных котов, отличающихся агрессивностью, а также кошек с коинфекцией FIV.

Болезнь чаще отмечается у взрослых кошек, чем у молодых животных в возрасте до шести месяцев. Средний возраст инфицированных животных составляет три года, что меньше, чем для FIV. Варианты исхода инфекции FeLV могут быть разнообразными и зависят от штамма и дозы вируса, путей передачи инфекции, факторов, влияющих на функцию иммунной системы хозяина (возраста, генетики, наличия коинфекций, стресса, применения иммуносупрессивных препаратов).

Вирус проникает в организм ороназальным путем, репликация происходит в лимфоидной ткани ротовой полости, поражая моноциты и лимфоциты. Затем инфекционный агент попадает в циркуляторное русло. В этот период у некоторых кошек могут развиваться симптомы системной патологии, такие как лихорадка, летаргия и/или лимфаденопатия. Небольшое число пораженных лимфоцитов проникает в костный мозг, где вирус быстро поражает делящиеся клетки-предшественницы гемопоэза, а затем – лимфоидные и эпителиальные клетки различных органов. Поражение костного мозга считается критическим этапом патогенеза инфекции FeLV. После инфицирования эпителиальных клеток слюнных желез вирус в больших количествах выводится со слюной; небольшие количества вируса могут выводиться с мочой и фекалиями.

У некоторых кошек репликация вируса подавляется иммунной системой в течение нескольких недель после инфицирования, затем происходит поражение костного мозга. У таких животных развивается регрессирующая инфекция, при которой провирусная ДНК обнаруживается в геноме клеток хозяина, но размножения и выделения вируса не происходит. Развитие регрессирующей инфекции возможно после периода виремии, также допустимо отсутствие вирусемии. Регрессирующая инфекция может персистировать в течение всей жизни животного и активироваться при иммуносупресии, например, в период беременности или при использовании иммуносупрессивных препаратов. Впоследствии у некоторых кошек с регрессирующей инфекцией могут развиться FeLV-негативные новообразования. При абортивной инфекции виремия не наблюдается, вирус не обнаруживается лабораторными методами. Инфицирование кошек абортивной инфекцией происходит небольшими дозами вируса, поэтому, несмотря на отсутствие виремии, у них отмечается наличие антител к вирусу. Развитие прогрессирующей инфекции у животных происходит после включения в патологический процесс костного мозга, а интенсивность разрушения клеток инфекционным агентом ограничивает способность иммунной системы хозяина подавлять репликацию вируса.

Инфекция FeLV часто диагностируется во время скрининговых обследований клинически здоровых кошек. Скрининг проводится с использованием ИФА или иммунохроматографических методов обнаружения антигена FeLV в сыворотке крови ввиду их высокой чувствительности, приемлемой специфичности, быстроте выполнения и доступности.

Несмотря на то, что у многих кошек, у которых обнаруживают антиген, клинические признаки отсутствуют, необходимо проведение клинического и биохимического исследований крови, исследования мочи для выявления нарушений, которые могут указывать на наличие патологий, вызванных инфекцией FeLV. Слабо выраженные изменения состава крови, такие как эритроцитарный макроцитоз или моноцитопения, могут иметь место при отсутствии выраженных клинических симптомов и указывать на неблагоприятный исход болезни в долгосрочной перспективе.

К дополнительным тестам, рекомендованным к проведению у кошек с анемией, относятся определение количества ретикулоцитов, проба Кумбса и ПЦР на наличие гемоплазм. Для животных с панцитопенией и персистирующими нерегенеративными анемиями рекомендовано исследование аспирата костного мозга и кор-биоптата.

При проведении скрининга или диагностики FeLV необходимо избегать применения ПЦР без тестирования на наличие антигена. Врач-клиницист должен знать, используется обнаружение провирусной ДНК, вирусной РНК или обеих нуклеиновых кислот ввиду того, что клиническая значимость положительного результата на наличие вирусной РНК отличается от таковой для провирусной ДНК (которая позволяет предположить наличие непродуктивной инфекции у кошек с отрицательными результатами теста на антиген). После инфицирования возможно получение положительных результатов исследования методом ПЦР в реальном времени в течение нескольких недель до того, как могут быть получены положительные результаты теста на антиген и выделение вируса. Таким образом, ПЦР является более чувствительным методом, чем тест на наличие растворимого антигена.

Показания:

• заболевшие животные, особенно с анемией, лимфомой, поражением костного мозга или полиартритом;
• после потенциального возможного заражения;
• перед приобретением кошки;
• перед переливанием крови;
• перед вводом в новую популяцию кошки.

Противопоказания: не известны

Подготовка пациента: рекомендована голодная диета минимум 6 часов

Метод отбора: венепункция

Преаналитика:

1. взятие крови – пробирка с красной крышкой с гелем, 2.5 мл;
2. осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз;
3. пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре;
4. центрифугировать при 3300 об/мин в течение 10 минут, не позднее 60 минут после взятия;
5. стабильность образца 5 дней при +2℃...+8℃; не менее 2 месяцев при -17℃...-23℃ (при хранении более 5 дней сыворотку необходимо отлить в пластиковую пробирку);
6. заполнить направительный бланк, указав код клиента;
7. температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃...+8℃ (синий пакет).

Форма выдачи результата: качественный тест

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Результат выдается в терминах «отрицательно», «положительно». 
Положительно – антиген вируса лейкемии кошек обнаружен.
Отрицательно – антиген вируса лейкемии не обнаружен.

Список источников:

1. O'Connor, T.P. Jr.; Tonelli, Q.J.; Scarlett, J.M. Report of the national felv/fiv awareness project. J. Am. Vet. Med. Assoc. 1991, 199, 1348-1353.
2. Levy, J.K.; Scott, H.M.; Lachtara, J.L.; Crawford, P.C. Seroprevalence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus infection among cats in north america and risk factors for seropositivity. J Am Vet Med Assoc 2006, 228, 371-376.
3. Hoover, E.A.; Mullins, J.I. Feline leukemia-virus infection and diseases. Journal of the American Veterinary Medical Association 1991, 199, 1287-1297.
4. Gleich, S.; Hartmann, K. Hematology and serum biochemistry of feline immunodeficiency virus-infected and feline leukemia virus-infected cats. J Vet Intern Med 2009, 23, 552-558.
5. Addie, D.D.; Dennis, J.M.; Toth, S.; Callanan, J.J.; Reid, S.; Jarrett, O. Long-term impact on a closed household of pet cats of natural infection with feline coronavirus, feline leukaemia virus and feline immunodeficiency virus. Vet Rec 2000, 146, 419-424.