Сальмонеллез (Salmonella spp.) (ПЦР)
Этиологическим агентом сальмонеллеза служат грамположительные факультативные анаэробные бактерии Salmonella spp., распространенные по всему миру. Salmonella spp. заражают млекопитающих, птиц, рептилий, амфибий, рыб и беспозвоночных. Здоровые кошки, живущие в хороших условиях, довольно редко инфицируются этим возбудителем. Животные, ведущие свободный образ жизни и использующие в пищу диких птиц, вероятнее всего могут быть заражены Salmonella spp.
Носителями и распространителями этой инфекции служат преимущественно молодые, ослабленные стрессовыми ситуациями и иммуносупрессивные особи. У клинически здоровых домашних кошек сальмонеллы были выделены посредством мазка из прямой кишки. Характерной особенностью детектированных патогенов было то, что по результатам анализа нуклеотидных последовательностей были детектированы микроорганизмы с приобретенными генами устойчивости к противомикробным препаратам.
Источники инфекции загрязненная пища, вода или насекомые. Возможна воздушная передача, поскольку сальмонеллы способны сохраняться в высушенном субстрате без органического материала. Одним из самых распространенных источников инфекции служит загрязненная пища, как правило, не подвергнутые термической обработке мясные продукты. Однако заражение возможно и при скармливании загрязненных сальмонеллами хорошо термически обработанных сухих кормов коммерческих производителей. Важно учитывать, что сальмонеллы способны загрязнять посуду для кормления, клетки, эндоскопические оборудование и ванны. Загрязненные фармакологические и диагностические препараты, приготовленные из экстракта поджелудочной железы, печени, желчи также могут содержать клетки Salmonella spp.
Клинически проявления сальмонеллеза у кошек довольно редки. Однако своевременно выявление возбудителей играет важную роль в предотвращении их передаче людям. Клиника сальмонеллеза зависит от степени инфицированности, иммунного статуса кошки, а также от сопутствующих заболеваний. Наиболее восприимчивы к сальмонеллам котята младше 1 года. Синдромами сальмонеллеза являются гастроэнтерит, бактериемия и эндотоксемия. Сальмонеллез следует подозревать у животных с острым или хроническими заболеваниями. Его часто игнорируют, диагностируя вирусный энтерит, вызванный вирусом панлейкопении кошек. У животных с системным заболеванием диагностируют нерегенеративную гипохромную анемию, лимфопению, тромбоцитопению, нейтропению со сдвигом ядра влево. Бактериальные клетки можно идентифицировать в лейкоцитах у животных с выраженными признаками сепсиса. Зрелый нейтрофильный лейкоцитоз более характерен для хронического инфицирования с локализацией инфекции в ткани органов. Биохимические аномалии обычно регистрируют только у животных с тяжелой клиникой: гипопротеинемия, гипоальбуминемия, гипогликемия и умеренная преренальная азотемия.
Сальмонеллы, которые выживают при прохождении через желудок способны колонизировать средние части подвздошной кишки, поражая эпителий кончиков ворсинок, размножаясь в них. Проникая в нефагоцитарные эпителиальные клетки хозяина и тем самым запуская каскад Т-клеточного иммунитета, сальмонеллы способны длительное время персистировать в организме животного. Реактивация сальмонелл или проявление клиники может быть спровоцирована стрессом, иммуносупрессией, системной инфицированностью вирусами или скученностью, поскольку они длительное время сохраняются в лимфатических узлах кишечника, печени или селезенке.
В целях диагностики сальмонеллеза используются такие методы, как культивирование возбудителя на питательной среде и цитологическое исследование мазка фекалий. Наиболее специфичный и доступный метод на сегодняшний день – это детекция ДНК возбудителя в каловых массах с использованием ПЦР в реальном времени. Этот метод характеризуется как высокоспецифичный и высокочуствительный. Экспериментально показано, что для обнаружения ДНК Salmonella достаточно приблизительно 910 колониеобразующих единиц патогена в миллилитре экстракта из образца кала.
Исследуемый аналит: фекалии.
Метод исследования: РТ - ПЦР.
Подготовка пациента: не рекомендуется исследование фекалий, если животное получает сорбенты; не рекомендуется исследование фекалий, если использовались местные слабительные лекарственные средства.
Показания:
- острая и хроническая диарея;
- лихорадка.
Противопоказания: не известны.
Метод отбора биоматериала: сбор пробы фекалий в контейнер.
Преаналитика:
1. Поместить фекалии размером с лесной орех в стерильный контейнер с ложечкой и крышкой (ККЛ)
2. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца, кличкой животного.
3. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.
4. Сохранность образца 3 дня при +2°С …+8°С.
5. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).
Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Форма выдачи результата: качественный метод.
Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК Salmonella spp.
Литература:
- Craig E. Greene, DVM, MS, DACVIM, Infectious dieseases of the dog and cat, fourth edition;
