Бартонеллез (Bartonella spp.) (ПЦР)

Этиологическими агентами бартонеллеза собак служат представители рода Bartonella. Зоонозное заболевание, вызываемое грамотрицательными аэробными стелс-патогенами. Представители рода Bartonella вызывают хронические, негемолитические, интраэритроцитарные бактериемии и эндотелиотропные инфекции. Несмотря на постоянную рецидивирующую бактериемию, заболевание может очень долго протекать бессимптомно. Однако случаи, когда у пораженных патогеном особей регистрируются серьезные сердечные, печеночные, неврологические нарушения, болезни опорно-двигательного аппарата не единичны.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Bartonella vinsonii вызывает бартонеллез собак и кошек. Бартонеллы передаются через слюну присосавшихся иксодовых клещей. Основным переносчиками инфекции служат клещи Rhipicephalus sanguineus. В группу риска по заражению B. vinsonii попадают животные из в сельской местности, бродячие, охотничьи. Этот вид бартонелл имеет всесветное распространение, частота встречаемости собак, зараженных патогеном, варьирует в диапазоне от 3 до 76%. Резервуарными хозяевами бартонелл служат волки. Клинические проявления бартонеллеза собак не имеет четких описаний. Как правило, на развитие инфекции оказывает влияние общее состояние организма собаки. Заболевание у иммунокомпетентных животных протекает, как правило, бессимптомно. Отягчающими факторами в ходе развития инфекции являются ко-инфицирование возбудителями трансмиссивных инфекций, передаваемые клещами.

B. henselae и B. clarridgeiae собаки могут заражаться, поедая блох. Предполагается, что источником инфицирования могут стать кошки, при скарификации кожных покровов, вызывая так называемую «болезнь кошачьей царапины». В ряде исследований показано, что B. henselae представляет, преимущественно, возбудителя оппортунистической инфекции. Для инфицирования B. henselae наблюдается сезонность и большинство случаев заражения приходится на осень. В литературе обсуждается более высокая восприимчивость золотистых ретриверов, австралийских шелковитсых и йоркширских терьеров к данному возбудителю.

B. clarridgeiae, B. quintana, B. rochalimae, B. elizabethae, B. washoeensis – виды бартонелл, о детекции которых у представителей собачьих сообщается в современной литературе. Известно, что низковирулентные штаммы Bartonella приводят к постоянной бактериемии и развитию хронической инфекции, которая сохраняется в течение длительного периода. В целом, для собак характерно наличие лихорадки, летаргии, анорексии. В тяжелых случаях могут появиться внутрисосудистые воспалительные процессы, приводящие к эндо- и миокардитам, энцефалитам. К нехарактерным признакам можно отнести гранулематозный лимфаденит, гранулематозный ринит, эпистаксис, хромоту, слабость задних конечностей, полиартрит, кожной васкулит, увеит, гифему, хореоретинит, анемию, тромбоцитопению, эндокардит с более частым поражением аортального клапана, миокардит, аритмии, кардиогенный легочной отёк, менингоэнцефалит. Крайне редко возможен летальный исход.

Постановка диагноза на бартонеллез у собак затруднена. Стандартные диагностические методы диагностики бартонеллеза часто не позволяют детектировать патогена у заболевших животных. Как правило при проведении исследований крови у заболевших животных отмечают тромбоцитопению, анемию, нейтропению или нейтрофильный лейкоцитоз, моноцитоз, гемоглобинурия без сопровождения гематурией, повышенная активность ферментов печени (щелочная фосфатаза, аланинаминотрансфераза, γ-глютамилтрансфераза). В настоящее время максимально оптимизированы и адаптированы к протеканию данной инфекции молекулярно-генетические методы, в частности ПЦР в режиме реального времени.

Исследуемый аналит: венозная цельная кровь.

Метод исследования: РТ-ПЦР.

Подготовка пациента: взятие проб крови рекомендовано до введения антимикробных препаратов во избежание получения ложноотрицательных результатов по ПЦР-исследованию.

Показания:

• общее истощение и ослабление организма;
• собака плохо ест и постепенно худеет;
• периодическая рвота и диарея;
• хронический конъюнктивит;
• эндокардит и миокардит;
• синусит и ринит, которые иногда осложняются кровотечениями из носа;
• гингивит, стоматит, язвочки в ротовой полости;
• спленомегалия;
• генерализованная лимфаденопатия;
• геморрагические диатезы на коже.

Противопоказания: не известны.

Метод отбора биоматериала: венепункция.

Преаналитика:

1. Провести процедуру взятия крови.

2. После внесения биоматериала в пробирку с сиреневой крышкой (ЭДТА) осторожно перевернуть пробирку 6-7 раз для перемешивания материала с антикоагулянтом.

3. Заморозить в вертикальном положении при -17°С…-23°С.

4. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного.

5. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.

6. Срок хранения образца при -17°С…-23°С   две недели.

7. Температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С…-23°С (красный пакет)

Интерпретация результата:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: качественный метод. Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК Bartonеlla spp.

Список источников:

1. Craig E. Greene, DVM, MS, DACVIM, Infectious dieseases of the dog and cat, fourth edition;
2. Kristin Makdonal'd. Infective endocarditis in dogs: diagnosis and therapy. PMID: 20610018 DOI: 10.1016 / j.cvsm.2010.03.010;
3. Swayed Abdullah, Chris Helps, Severin Tasker, Hanna Newbury, Richard Wall. Pathogens in fleas collected from cats and dogs: distribution and prevalence in the UK/PMID: 30728050 PMCID: PMC6366081 DOI: 10.1186 / s13071-019-3326-x.