Желудочно-кишечный большой профиль (парвовирус собак (CPV 2), коронавирус собак энтеральный (CCoV 1), Аденовирус 1 типа (CAV 1), вирус чумы плотоядных (CDV), гиардиа (Giardia spp.), криптоспоридии (Cryptosporidium spp.)), ротавирус (Rotavirus), сальмонелла (Salmonella spp.))

Наиболее распространенной причиной вирусной диареи у собак является парвовирус собак 2-го типа (Canine parvovirus type 2, CPV-2), принадлежащий роду Parvovirus. Собачий парвовирус-2 считают измененным вариантом другого парвовируса – возбудителя панлейкопении кошек; эти вирусы биологически сходны, но имеют небольшие антигенные различия.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Парвовирусы ‒ это небольшие безоболочечные вирусы, содержащие одну спираль ДНК. Они могут в течение длительного времени (более одного года) выживать во внешней среде. По этой причине контакт с контаминированными предметами является важным путем передачи инфекции. Функцию механических переносчиков вируса могут выполнять насекомые и грызуны. Для репликации вируса необходимо наличие митотически активных клеток. Тяжелая форма заболевания чаще всего наблюдается у молодых собак (в возрасте от шести недель до шести месяцев, как правило, менее 12 недель); однако иногда она встречается у взрослых невакцинированных собак или собак, вакцинация которых была проведена некорректно. У собак в возрасте старше шести месяцев парвовирусный энтерит в два раза чаще встречается у сук.

Возбудитель коронавирусного энтерита собак (Canine coronavirus, CCoV) принадлежит семейству вирусов Coronaviridae, которые вызывают инфекции у широкого круга видов, включая собак, кошек и людей. Геном вируса содержит одноцепочечную РНК; репликация вируса происходит в цитоплазме клеток хозяина. Коронавирусы неустойчивы к действию факторов внешней среды, но могут в течение длительного времени сохранять контагиозность при температуре ниже нуля. CCoV обладает высокой контагиозностью и быстро распространяется среди восприимчивых собак, особенно среди животных, содержащихся в питомниках.

У новорожденных щенков от серонегативных сук инфекция протекает в более тяжелой форме, чем у щенков старшего возраста и у взрослых собак. CCoV выделяется с фекалиями инфицированных собак в течение нескольких недель или месяцев, иногда ‒ более продолжительное время. Контаминированные вирусом фекалии являются основным источником инфекции.

Инфекционный гепатит ‒ заболевание, вызываемое аденовирусом собак 1-го типа (Canine Adeno Virus 1, CAV-1), который является безоболочечным вирусом, имеющим антигенное сродство с аденовирусом собак 2-го типа (CAV-2). Возбудитель может выживать в окружающей среде при комнатной температуре в течение нескольких месяцев, но быстро инактивируется дезинфектантами. Заболевание чаще всего поражает собак в возрасте до одного года; до введения массовой вакцинации сообщалось о случаях болезни у взрослых животных. Антигенное сродство вирусов CAV-1 и CAV-2 имеет большое клиническое значение, поскольку вакцины против CAV-2 обеспечивают защиту от CAV-1, и наоборот.

CAV-1 выделяется со слюной, фекалиями и мочой, передача инфекции происходит при прямом контакте с больным животным или при контакте с контаминированными вирусом предметами. Также возможна передача вируса эктопаразитами, такими как блохи и клещи.

Чума плотоядных – острая контагиозная вирусная болезнь домашних собак и диких животных (многих видов отряда хищных), имеющая большое ветеринарное значение. Заболевание вызывается вирусом чумы плотоядных (Canine Distemper Virus, CDV), который является оболочечным, плеоморфным РНК-содержащим вирусом, принадлежащим роду Morbillivirus (семейство Paramyxoviridae). CDV родственен вирусу кори и вирусу чумы крупного рогатого скота и использовался в качестве модели при изучении патогенеза кори. Вирусная оболочка состоит из трех белков: гемагглютинина (Н), белка слияния (F) и матриксного белка (М). Именно Н-белок играет определяющую роль в присоединении вируса к клеткам и проникновении в них. Инфекция у собак может протекать в форме тяжелого заболевания, поражающего различные системы организма ‒ пищеварительную, респираторную и нервную.

Хорьки восприимчивы к заболеванию, в то время как у кошек оно не встречается. Вирус, выделяемый дикими животными (например, енотами), может поражать домашних собак, а вирус, выделяемый домашними собаками, представляет значительную опасность для диких животных, вызывая вспышки заболевания с высоким уровнем смертности. Вирус чумы плотоядных также является одним из патогенов, вызывающих комплекс респираторных инфекций собак (КРИС).

Инвазии Giardia spp. широко распространены у собак и кошек. Giardia spp. встречаются в двух формах: в форме трофозоитов и в форме цист. Трофозоиты являются подвижной формой, которая локализуется в желудочно-кишечном тракте. Трофозоиты достаточно восприимчивы к действию факторов внешней среды и, как правило, не являются важным фактором распространения инвазии. Основную роль в этом играют цисты Giardia, которые являются устойчивой формой паразита. Цисты устойчивы к воздействию факторов окружающей среды и могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких месяцев во влажных, холодных условиях, но они чувствительны к высыханию и повышенной температуре. Цисты Giardia spp. передаются фекально-оральным путем, при употреблении в пищу загрязненных продуктов питания, воды или через контаминированные предметы.

Cryptosporidium – род кокцидий семейства Apicomplexa, населяющих эпителий респираторного и пищеварительного тракта различных животных. Ранее считалось, что криптоспоридиоз млекопитающих вызывается Cryptosporidium parvum, однако молекулярные исследования показали, что у кошек обычно наблюдается инвазия Cryptosporidium felis, а у собак – Cryptosporidium canis, у обоих видов иногда встречается C. parvum.

Передача C. felis и C. canis происходит при проглатывании ооцист при взаимном груминге, поглощении контаминированных корма и воды. Ооцисты выводятся с фекалиями больных животных уже спорулированными и являются инвазионными сразу после попадания во внешнюю среду. Примерно 20% ооцист, образующихся в кишечнике, имеют тонкую стенку и разрушаются в кишечнике, при этом происходит выделение спорозоитов и аутоинвазирование. Ооцисты с толстой стенкой, которые выводятся с фекалиями, устойчивы к действию факторов внешней среды. У большинства инвазированных собак и кошек какие-либо клинические симптомы отсутствуют, диарея обычно наблюдается у молодых животных, при этом фекалии обычно водянистые и не содержат слизи или крови. При наличии коинвазии другими простейшими, такими как Giardia spp. (у собак и кошек) или Tritrichomonas blagburni (foetus) (у кошек), а также иммуносупрессивных патологий, как лимфома, инфекция FeLV (Feline Leukemia Virus), чума плотоядных или парвовирусная инфекция собак, криптоспоридиоз протекает в более тяжелой форме.

Ротавирусы – РНК-содержащие вирусы, принадлежащие семейству Reoviridae, роду Rotavirus и являющиеся возбудителями ротавирусной инфекции. Геном ротавирусов включает 11 сегментов двухцепочечной РНК. Внешний белковый слой вириона состоит из двух протеинов ‒ VP4 и VP7, которые способствуют образованию нейтрализующих антител. Ротавирусы группы A являются патогенами, вызывающими кишечные инфекции у животных и людей.

Передача ротавирусной инфекции происходит фекально-оральным путем. Ротавирусы хорошо адаптированы к выживанию во внешней среде и в желудочно-кишечном тракте хозяина.

Сальмонеллы ‒ это грамотрицательные, неспорообразующие, факультативные анаэробные бактерии, имеющие форму палочек и принадлежащие семейству Enterobacteriaceae. Жизненный цикл большинства сальмонелл состоит из двух фаз, различающихся составом жгутиковых антигенов. Жгутиковые антигены (Н-антигены) представляют собой белок (флагеллин), состоящий из альфа- и бета-полипептидных цепей. Предполагают, что аминокислотный состав разных серотипов жгутиковых антигенов сальмонелл различен, это определяет их типовую специфичность. На различии в специфичности жгутиковых антигенов построена классификация серотипов сальмонелл.

Сальмонеллы обнаруживаются в желудочно-кишечном тракте большого числа видов животных и являются основной причиной энтероколита, а иногда ‒ системных инфекций животных и человека. Возможна передача инфекции между животными разных видов, а также человеку. В большинстве случаев сальмонеллы передаются через продукты питания, прежде всего, через молоко, мясо и яйца. Salmonella spp. обладают способностью в течение длительного периода времени (от нескольких недель до нескольких лет) выживать в окружающей среде, поэтому контаминированные предметы являются важным источником инфекции. Кроме того, сальмонеллы способны быстро размножаться в продуктах питания при комнатной температуре, а также выдерживать замораживание в течение нескольких недель. Род Salmonella включает два вида ‒ Salmonella enterica и Salmonella bongori, каждый из которых содержит множество серотипов. Серотипы S. bongori обычно вызывают инфекции у холоднокровных животных. Вид S. enterica охватывает 7 подвидов, включающих свыше 2 300 серотипов. Для человека и животных важнейшими из этих серотипов являются S. typhimurium и S. enteritidis. Местом первичной локализацией этих возбудителей является животное. Основной способ передачи инфекции – через зараженные сальмонеллами продукты питания животного происхождения.

Исследуемый аналит: эпителий слизистой оболочки прямой кишки.

Метод исследования: ПЦР Real-time.

Подготовка пациента: не рекомендуется взятие соскобов после применения средств, облегчающих ведение термометра ; не рекомендуется взятие соскоба, если животное получает сорбенты.

Показания: рвота, диарея или запор.

Противопоказания: не известны.

Метод отбора биоматериала: соскоб эпителиальных клеток со слизистой оболочки прямой кишки.

Преаналитика: 

1. Урогенитальный зонд аккуратно ввести на глубину 0.5 см в прямую кишку и вращательными движениями набрать клеточный материал со слизистой оболочки.
2. Перенести зонд в микропробирку 2 мл с транспортной средой, вращательными движениями "смахнуть" биоматериал в жидкость, зонд утилизировать.
3. Микропробирку плотно закрыть крышкой до щелчка.
4. Микропробирку маркировать Ф.И.О. владельца, кличкой животного, указать локализацию.
5. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.
6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃…+8℃ (синий пакет)

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: качественный анализ.

Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе: ДНК Canine parvovirus (CPV), Canine coronavirus (CCoV1), ДНК Canine Adeno Virus 1 (CAV 1), РНК Rotavirus, РНК Canine Distemper Virus (CDV), ДНК Cryptosporidium spp., ДНК Salmonella spp., ДНК Giardia spp.

Литература:

1. Craig E. Greene, Infectious dieseases of the dog and cat , fourth editionШ.Ваден, Д.Нолл, Ф.
2. Смит, Л. Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.
3. David G. Baker, DVM, MS, PhD, DACLAM, is Director and Professor, Division of Laboratory Animal Medicine, School of Veterinary Medicine at Louisiana State University, Baton Rouge.