Анализ гистологии биопсионного материала является лучшим методом дифференциальной диагностики. Микроскопическое исследование проводится для небольших фрагментов ткани или органов, полученных при биопсии, удаленные хирургическим путем.
Гистологический анализ начинается с визуальной оценки биоматериала и вырезки фрагментов биоматериала для проведения исследования. На этом этапе выявляются преаналитические ошибки, фрагменты костной структуры, которые в последствии отправляются на декальцинацию и т.д. Следующим этапом гистологического исследования является проводка биоматериала, на этом этапе биоматериал обезжиривается и уплотняется за счет того, что фрагменты выдерживаются в спиртах возрастающей концентрации.
Специальная подготовка и обработка биоптата проводится для того чтобы произвести заливку материала в парафиновый блок. Для этого проводятся манипуляции в виде пропитывания гистологического материала специальными средами, которые в последующем застывают с образованием однородной плотной массы, в результате которого получается парафиновый блок. Затем проводится нарезка этого блока на микротоме (микротомирование). В результате микротомирования готового парафинового блока с биоматериалом полученный тонкие срезы толщиной в несколько десятых миллиметра (около 1 микрона), готовые срезы помещаются на стекло и сушатся. Потом осуществляется этап воздействия на гистологический препарат различными красителями, для стандартного окрашивания используют краситель Гематоксилин-Эозин, для более сложных и конкретных случаев существуют различные способы окраски. Окраска производится с целью контрастирования и визуализации гистологических структур. После этих этапов подготовки биоматериала, готовые препараты отправляются к врачу-патоморфологу под микроскоп для изучения готового гистологического препарата.
Срок исполнения: 14 дней (плюс 1-2 дня для регионов)*
Исследуемый материал: операционный материал (кусочки ткани) в специальном контейнере Histopot
Метод исследования: методы световой микроскопии, также используется электронная микроскопия и другие методы микроскопии
Показания:
· Новообразование.
· Определение и характер злокачественности.
· Для установления причин гибели животного.
· Послеоперационная диагностика.
· Диагностика и оценка состояния органов и/ или системы органов.
Противопоказания: не известны.
Подготовка пациента: зависит от способа и локализации места забора биоматериала. Как правило, процедура проводится под наркозом, седацией и/или местной анестезией. Если материал берется с кожи, она должна быть очищена механически от грязи.
Методы забора материала для исследования: забор биоптата может производиться различными способами:
Преаналитика:
Этот тест для небольшого размера целых опухолей, небольших фрагментов опухолей и органов, панч-биоптатов.
Для исследования №AN511 Гистологическое заключение патолога (операционный материал (до 2 блоков) (приготовление препарата + описательная часть) подходит до 3-х фразментов ткани размером не более 4х3х1,5см.
Для неопухолевых заболеваний кожи необходимо использовать №AN523ГИЭ Гистологическое исследование кожи (приготовление препарата (до 6 блоков) + описательная часть).
Порядок действий:
Отбор материала для гистологического исследования производится согласно общепринятым стандартам. Операционная вырезка проводится на границе здоровой и пораженной ткани.
1. Выбрать участок без некроза и кровоизлияния, сделать параллельные надрезы через 0,5-1,0 см.
2. Поместить кусочек в контейнер подходящего размера (соотношение объемов 1:10).
3. Подписать контейнер (вид, кличка, фамилия владельца, номер истории болезни, локализация фрагмента ткани, помещенного в контейнер).
4. Заполнить направление (код клиента, вид, порода, возраст, пол, половой статус, кличка, фамилия владельца, фамилия и контакты лечащего врача, код теста, локализация, внешний вид поражений, анамнез).
5. Отправить в лабораторию гистопот с материалом и заполненный направительный бланк.
6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С…+8°С (синий пакет).
Небольшие опухоли (до 2 см) отправляют целиком. Опухоли размером 1-2 см надрезают для лучшей фиксации. Образования крупнее 2 см либо надрезают с шагом 1 см (разрезы располагаются параллельно), либо делят и отправляют в нескольких гистопотах. Допустимо отправлять небольшие фрагменты опухоли и отдельно – ткань с хирургического края, в последнем случае гистопоты подписывают соответствующим образом (опухоль / граница опухоли / край резекции). При этом среди фрагментов обязательно должен быть кусочек, содержащий границу с нормальной тканью.
Материал для гистологического исследования набирают до использования лазера или электрокаутера во избежание термического повреждения ткани.
Важно! Для проведения гистологического исследования в сопроводительном бланке необходимо заполнить все перечисленные строки:
• Код клиента
• ФИО владельца
• Кличка животного
• Вид животного
• Порода
• Пол
• Половой статус (кастрирован/ не кастрирован)
• ФИО врача и телефон
• № теста (AN…)
• Способ взятия гистологии
• Количество направляемых объектов
• Органо—тканевая локализация
• Макроскопическое описание процесса
• Отметить зону поражения на рисунке
• Оценка хирургических границ
Дополнительно заполнить данные анамнеза, проводимого/проведенного лечения, если проводились другие исследования крови, рентген, узи и тп, подкрепить их копии к бланку.
Интерпретация: проводится ветеринарным специалистом
Форма выдачи результата: макроскопическое и микроскопическое описание биоптата с диагностическим заключением патоморфолога.
Для вашего удобства в конце страницы опубликованы фрагменты из нашего методического пособия, которое поможет с в случае затруднения с выбором нужного теста. «Технические требования для выполнения гистологического исследования», направляются в электронном виде всем действующим клиентам лаборатории ВетЮнион. Для повторной отправки пособия свяжитесь со своим курирующим менеджером, или отправьте запрос на почту hello@vetunion.ru указав код клиента.Список литературы:
· «Цитология, гистология, эмбриология» Васильев Ю.Г., Трошин Е.И., Яглов В.В.; Издательство "Лань"; 2013
· «Цитология и общая гистология. Методика изучения препаратов» Борхунова Е. Н.; Издательство "Лань";2022
· «Пигментные опухоли кожи» Автор: Червонная Лариса Владимировна, ГЭОТАР-Медиа, 2014 г.
· https://www.kp.ru/guide/gistologicheskoe-issledovanie.html
· https://www.niioncologii.ru/patients/screening-and-diagnosis/research-types/pi
· «Атлас по гистологии» Автор: Мусиенко Н. А.; Академический проект, 2006 г.
Для вашего удобства в конце страницы опубликованы фрагменты из нашего методического пособия, которое поможет в случае затруднения с выбором нужного теста. "Технические требования для выполнения гистологического исследования", направляются в электронном виде всем действующим клиентам лаборатории ВетЮнион.