Посев на грибы рода Candida, Malassezia с определением чувствительности к антимикотическим препаратам

Кандидоз – микоз, вызванный грибами рода Candida. C. albicans — диплоидный грибок (молочница) форма дрожжеподобных грибов, способных к спариванию, но не в форме мейоза, является наиболее распространенным видом дрожжей, вызывающих инвазию у животных. В роду Candida насчитывается более 200 видов. Эти грибы входят в состав нормальной флоры слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, носовой полости и половых органов млекопитающих. У гусей, индеек чаще инфицирует клоаку и воздухоносные пути, у коров вызывает снижение плодовитости, аборты, маститы, у кобыл приводит к развитию пиометры, у кошек к циститам и пиотораксу, итакже, как иу лошадей, к заболеванию глаз, у собак, телят, свиней и кошеквстречается генерализованная форма заболевания.

Развитию кандидоза способствуют длительное лечение антибиотиками, иммуносупрессивная терапия, понижение клеточного иммунитета любой этиологии, инфицированность вирусом иммунодефицита или лейкоза, нейтропения (у собак), сахарный диабет, парвовирусная инфекция, длительное применение глюкокортикоидов, повреждение слизистой оболочки или кожного покрова.Такжеванамнезе у пациентов с кандидозом ожоги,травмы,оперативное вмешательство, постоянный катетер. Симптомы заболевания различаются в зависимости от особенностей, локализации или диссеминации возбудителя. При локализации возбудителя в ротовой полости, обнаруживаютбелые пораженные участки на языке, слизистой оболочке, губах, кожно-слизистой кайме; при локализации в кишечнике- хроническую диарею, похудение. Поражение уха проявляется воспалением наружного слухового прохода и/или средним отитом, гениталий-белыми выделениями из влагалища или препуция, кожного покрова – незаживающим эритематозным мокнущим изъязвлением. Симптоматика системного кандидоза зависит от места образования микроабсцессов и может включать лихорадку, дерматит, передний увеит, плевральный выпот, остеомиелит, диарею, расстройства функций ствола мозга или мозжечка.

Кандидоз следует дифференцировать с другими инфекционными болезнями ротовой полости(бластомикозом,гистоплазмозом, вирусными болезнями кошек и др.), эзофагитом, острым или хроническим пищеводным рефлюксом и рвотой, последствиями травмы или внедрения чужеродного тела. Системный кандидоз дифференцируют с бактериальным сепсисом или токсемией, другими системными микозами, аутоиммунными болезнями, аллергическим дерматозом, вирусными инфекциями, новообразованиями, выраженными нарушениями метаболизма и анафилаксией.

При диссеминированных формах кандидоза развиваются обширные поражения внутренних органов, представленные множественными белыми очагами в сердце, печени, селезенке и других органах в зависимости от хода эмболизации. При микроскопическом исследовании эти очаги определяют как абсцессы или участки некроза, содержащие бластоконидии, псевдогифы и настоящие гифы.

Для подтверждения диагноза могут понадобиться соскоб или биопсия кожи. Выделение Candidaspp. из фекалий обычно недостоверно, в то время как из мочи более вероятно, чем из крови, поскольку при диссеминированных формах болезни часто наблюдается эмболизация почек. Лучше брать артериальную кровь для бактериологического исследования.

Растет Candidaalbicansв аэробных условиях при 37°С на широком спектре питательных сред, в том числе на Сабуродекстрозном агаре. Образует выпуклые колонии от белого до бежевого и кремового цветов на поверхности селективной среды. Главными признаками для идентификации являются образование "ростковой трубки" и/или псевдомицелия и хламидоспоры.

Виды Malassezia, комменсалы на коже животных и человека, являются аэробными, неферментативными, уреаз-позитивными дрожжами, которые растут при 35–37°C.  В настоящее время известно несколько видов Malassezia, выделенных из пораженной кожи животных, но основным возбудителем у животных является Malassezia, pachydermatis, которая представляет собой липофильный сапрофитный дрожжевой микроорганизм, имеющий длину до 6,5 мкм, не образующий мицелий и имеющий характерную толстостенную овальную форму или форму земляного ореха. Типичная форма земляного ореха образуется однополярным делением дочерних клеток с одного участка на клеточной мембране. Микроорганизм также содержит отчетливый спиралевидный отросток на внутренней части клеточной мембраны.Malassezia часто выделяется после взятия пробы из слухового прохода, анальной пазухи, межпальцевой области и губ, прямой кишки и влагалища у собак. Наиболее распространенным и широко известным синдромом, вызываемым Malassezia pachydermatis, является отит наружного слухового прохода, что проявляется гиперемией кожи, значительным зудом, мазевидными выделениями коричневого цвета с неприятным гнилостным запахом.

У кошек дерматит вследствие жизнедеятельности Malasseziaвстречается редко и проявляется отитом наружного слухового прохода, сопровождающимся потемнением окраски волос ушной раковины, трудноизлечимыми угрями, распространенной кератинизацией и чешуйчатым дерматитом.

Факторами, предрасполагающими к росту дрожжевых микроорганизмов, являются аллергические заболевания, нарушения, связанные с ороговением (себорея), развитие кожной патологии бактериальной этиологии, а также длительное применение кортикостероидов или антибиотиков.

Механизм развития патогенеза и точное количество микроорганизмов, необходимых для возникновения заболевания, изучены не до конца. Вероятнее всего, некоторые изменения в микроклимате кожного и волосяного покрова или изменение иммунитета хозяина вследствие эндогенного или экзогенного факторов, могут привести к повышенному и неконтролируемому росту Malassezia на поверхности кожного по кроваи волосяных фолликулах, вызывая таким образом нарушение с последующим развитием заболевания.

Исследуемый аналит: отделяемое наружного слухового прохода.

Метод исследования: микологический, бактериоскопический.

Показания: в качестве дополнительного рекомендуемого теста к AN473 -А или 473 –Р у животных, в анамнезе у которыхдлительная терапия антибиотиками или иммуносупрессивными препаратами при отитах н аружного уха.

Противопоказания: не извесны.

Подготовка пациента: отменить применение системных и местных антибактериальных средств за 7 дней до проведения анализа; при наличии гнойного отделяемого из наружного слухового прохода, предварительно удалить его марлевой салфеткой, смоченной стерильным физиологическим раствором (0,9%-ным).

Метод отбора: мазокиз наружного слухового прохода с помощью тампона на аппликаторе.

Преаналитика:

1. Тампон на аппликаторе (ESwab) от комплекта транспортной среды Amies (Эймс)ввести на глубину 0,5 -1,0смв ушной проход. Вращательными движениямипровести взятие материала на границе здоровой и пораженной ткани (если возможна визуализация);

2. Надломить аппликатор в точке отлома (линия отмечена красным цветом) и оставить его в пробирке!;

3. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента и обязательно время отбора пробы!;

4. Температурный режим хранения и транспортировки +2℃…+8 ℃ (синий пакет) в течение 48 часов.

Неприемлемые условия для исследования:

• непригоден для исследования материал, хранившийся более 48часовв транспортной среде Amies (Эймс);

• непригоден для исследования материал, собранный в неправильную транспортную среду (например, гелевая среда Amies (Эймс), среда CaryBleir));

• не принимается на исследование материал, собранный в пустой контейнер (например, шприц, пробирка).

Единицы измерения: КОЕ/тамп.

Интерпретация: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Форма выдачи результата: в результатедаётся информация:

• об отсутствии или наличии роста;

• о количестве выросших в посеве грибов рода Candida, Malassezia;

• о видовой принадлежности;

• о чувствительности к антимикотическим препаратам (если количество более10*1 КОЕ/тампон).

В случае отсутствия роста грибов выдается формулировка результата: «Роста Candidaspp., Malasseziaspp. не выявлено».

Список источников:

1) ConciseReviewofVeterinaryMicrobiology .SecondEdition.P.J. Quinn, B.K. Markey, F.C. Leonard, E.S. FitzPatrick, S. Fanning;

2) VeterinaryMicrobiologyand Microbial Disease . Second Edition. P.J.Quinn, B.K. Markey, F. C. Leonard, E. S. Fitz Patric, S. Fanning, P.J. Hartigan.

3) Болезни кошек и собак: справ; (пер. с англ.). Л. Тилли, Ф. Смит мл.. 2010 г.

4) Р. Кирк, Д. Бонагура. Современный курс ветеринарной медицины Кирка/Пер. с англ., 2005 г.