Гистологический анализ начинается с визуальной оценки биоматериала и вырезки фрагментов биоматериала для проведения исследования. Следующим этапом гистологического исследования является проводка биоматериала. Для костных фрагментов она отличается, материалу необходимо растворить соли кальция на этом этапе биоматериал проводят декальцинацию.
Декальцинация происходит после полной фиксации ткани, обычно в некислых фиксаторах. После декальцинации в кислотах необходимо проводить очистку материала от кислот с помощью щелочных растворов или по крайней мере путем промывания в двух сменных спиртах. Специальная подготовка и обработка биоптата проводится для того чтобы произвести заливку материала в парафиновый блок.
Для этого проводятся манипуляции в виде пропитывания гистологического материала специальными средами, которые в последующем застывают с образованием однородной плотной массы, в результате которого получается парафиновый блок. Затем проводится нарезка этого блока на микротоме (микротомирование). В результате микротомирования готового парафинового блока с биоматериалом полученный тонкие срезы толщиной в несколько десятых миллиметра (около 1 микрона), готовые срезы помещаются на стекло и сушатся. Потом осуществляется этап воздействия на гистологический препарат различными красителями, для стандартного окрашивания используют краситель Гематоксилин-Эозин, для более сложных и конкретных случаев существуют различные способы окраски. Окраска производится с целью контрастирования и визуализации гистологических структур. После этих этапов подготовки биоматериала, готовые препараты отправляются к врачу-патомарфологу под микроскоп для изучения готового гистологического препарата.
На данный момент гистологическое исследование – одним из самых точных исследований в диагностики различных заболеваний, а также онкологий различной этиологии.
Сроки исполнения: 30 дней (плюс 1-2 дня для регионов).
Исследуемый аналит: биопсийный материал костной структуры, готовые парафиновые блоки.
Методы забора материала для исследования: забор биоптата может производиться различными способами:
Показания:
Противопоказания: не выявлено.
Подготовка пациента: зависит от способа и локализации места забора биоматериала. Обычно эту процедуру проводят под местный анестезией или седацией. Если материал берется с кожи, она должна быть очищена механически от грязи.
Метод отбора: в гистологии чаще используют методы световой микроскопии, также используется электронная микроскопия и другие методы микроскопии.
Преаналитика:
Подтверждение теста проводится на аналитическом этапе работниками лаборатории (врач-технолог или лаборант) во время вырезки. Для теста AN502 необходимы определенные параметры для взятия материал, выбранный участок должен быть без некроза и кровоизлияния, на нем необходимо сделать надрезы через 0,5см- 1,0см (для более глубокого проникновения формалина в ткани). Затем поместить кусочек в контейнер(-ы) с формалином подходящего размера (соотношением 1:10). Если в одном контейнере находятся образцы тканей из разных локализаций, отмечайте фрагменты лигатурами или чернилами с пояснением отметок в бланке-направлении. Также этот тест подходит для биоптатов при неопухолевых заболеваниях кожи. Для неопухолевых заболеваний кожи требуются дополнительные требования. Необходимо отметить направление роста волос на биоптате или разрезать вдоль направления роста волос. На контейнере необходимо написать (вид, кличка, фамилия владельца, номер истории болезни, локализация фрагмента ткани, помещенного в контейнер). Также нужно заполнить направление (код клиента, вид, порода, возраст, пол, половой статус, кличка, фамилия владельца, фамилия и контакты лечащего врача, код теста, локализация, внешний вид поражений, анамнез). В лабораторию отправляются только заполненный направительный бланк и гистопод с материалом в синем пакете. (температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃...+8℃).
Необходимо предоставлять рентгеновский снимок и/или заключение КТ/МРТ.
Порядок действий:
1. Выбрать участок без некроза и кровоизлияния из центра образования и участка лизиса кости
2. Поместить кусочек в контейнер подходящего размера (соотношение объемов 1/10).
3. Подписать контейнер (вид, кличка, фамилия владельца, номер истории болезни,
4. Локализация фрагмента ткани, помещенного в контейнер).
5. Заполнить направление (код клиента, вид, порода, возраст, пол, половой статус, кличка, фамилия владельца,
6. фамилия и контакты лечащего врача, код теста, локализация, внешний вид поражений, анамнез).
7. Отправить в лабораторию гистопот с материалом и заполненный направительный бланк.
8. Приложить рентгеновский снимок или выслать его по электронной почте.
Форма выдачи результата: макроскопическое и микроскопическое описание биоптата с диагностическим заключением патомарфолога.
Список источников: