Проба с адренокортикотропным гормоном
Синдром Кушинга (или PPID – Дисфункция промежуточной доли гипофиза)- самое распространенное эндокринологическое заболевание лошадей, связан с повышенным уровнем адренокортикотропного гормона (АКТГ), который стимулирует выработку кортизола. Заболевание вызывается дисфункцией гипофиза и, как следствие этого, избыточной продукцией кортизола. Однако у лошадей оно имеет серьезные отличия. Есть мнение, что синдром Кушинга – «возрастная» болезнь; иногда можно прочитать, что каждая пятая лошадь старше 15 лет страдает от него – но на самом деле сколько-нибудь точно определить количество лошадей с этим заболеванием проблематично. Это заболевание характеризуется дегенерацией дофаминергических нейронов, гиперплазией меланотрофов и повышенной (в 40 или более раз) выработкой проопиомеланокортина. Считается, что при этом заболевании утрачивается дофаминергическая иннервация этой области со стороны гипоталамуса. Количество дофамина у лошадей с синдромом Кушинга в промежуточной области гипофиза cоставляет лишь примерно 10% от нормы.
Повышение концентрации АКТГ в плазме у лошадей с PPID связано со снижением конверсии АКТГ в α-МСГ, так как меняется выделение ферментов PC1 и PC2, что приводит к аномальному соотношению белков, полученных из ПОМК. У лошадей с PPID отмечается повышение уровня не только АКТГ: растет и уровень β-эндорфина в плазме и спинномозговой жидкости, в 60 и 120 раз соответственно. Уровень АКТГ возрастает относительно ненамного, но его способности в производстве α-МСГ и β-эндорфина усиливаются значительно – примерно в шесть раз. Таким образом, при PPID у лошади происходит вторичная гиперплазия коры надпочечников и усиление выделения гормона кортизола. При гиперплазии промежуточной части гипофиза он оказывает различную степень компрессии на передний и задний отдел гипофиза (нейрогипофиз) или даже гипоталамус животного.
Синдром Кушинга или PPID может поражать лошадей всех пород и типов, но к группе наибольшего риска относят пони. Средний возраст заболеваемости лошадей обычно составляет от 18 до 23 лет, но отмечалось возникновение данного заболевания лошадей и в возрасте 7 лет.
Классическим клиническим признаком синдрома Кушинга является гирсутизм – образование длинного и волнистого волосяного покрова, который не подвержен линьке. Со временем иногда темноокрашенная шерсть светлеет – это реакция повышения концентрации (до 170 пмол/л) специфичного POMC-пептида, меланоцитостимулирующего гормона. У лошадей с PPID также наблюдается чрезмерное потоотделение (гипергидроз), и, реже, отсутствие потоотделения (ангидроз чаще всего в области шеи и плече-лопаточного сустава, возникающий вследствие терморегуляторной реакции на длинный волосяной покров). У лошадей с PPID также часто наблюдаются снижение массы тела, сонливость или слабая активность. Эти лошади также часто показывают чрезмерную покорность и лучше переносят боль, чем здоровые лошади. Последние признаки вызываются увеличением концентрации β-эндорфина в плазме и спинномозговой жидкости: она в 100 раз выше, чем у здоровых лошадей. Помимо действительной потери веса, метаболизм белков, вызванный повышением активности кортизола, приводит к снижению мышечной массы, особенно мускулатуры зада. Несмотря на снижение массы тела, аппетит у пораженных лошадей остается в норме или даже усиливается. Наряду с потерей мышечной массы развиваются отложения жира вдоль гребня на шее и в надглазничной области.
Хронический ламинит является самым серьезным клиническим осложнением синдрома Кушинга: он встречается у более чем 50% пораженных лошадей. Умеренная полиурия и полидипсия встречаются примерно у одной трети лошадей с PPID. Механизмы, вызывающие эти явления, связаны с нейрогенным несахарным диабетом, развивающимся из-за разрушения нейрогипофиза. Это приводит к уменьшению секреции вазопрессина, следствием чего и становится повышенная жажда. Кроме того, ощущение жажды стимулирует повышенная концентрация кортизола. У лошадей с PPID медленнее заживают раны и часто возникают вторичные бактериальные и грибковые инфекции, например свищи, рецидивирующие абсцессы, конъюнктивит, синусит, гингивит, альвеолярный периостит и бронхопневмония. Другие клинические признаки, которые отмечаются у лошадей с PPID, включают непрерывную лактацию и бесплодие, что, возможно, является последствиями нарушения выделения пролактина и гонадотропных гормонов. Периодически у лошадей наблюдаются признаки нарушения функции центральной нервной системы, в том числе атаксия, слепота и припадки. Хотя слепота, как правило, считается последствием компрессии хиазма зрительных нервов гипофизарной опухолью, взаимосвязь между размером опухоли и некоторыми клиническими признаками не была установлена у лошадей.
Введение АКТГ вызывает высвобождение кортизола из коры надпочечников, величина которого зависит от количества клеток коры надпочечников и их активности. Это считается самым безопасным из динамических тестов на кортизол с наименьшим риском вызвать ламинит. Протокол заключается в сборе исходного уровня образец сыворотки, ввести 1 мг Thyroid Releasing Гормон (TRH; Roche) внутривенно, а затем собрать дополнительные образцы сыворотки в 15 и 60 минут после этого. Типичные случаи Кушинга показывают увеличение кортизола больше более чем на 20% (до 90%) выше исходного уровня через 15 минут по сравнению с повышением примерно 17% у нормальной лошади. Концентрация кортизола возвращается к исходному уровню через 60 минут у нормальной лошади, но может оставаться на уровне около 55% выше исходного уровня в случаях Кушинга.
Данные лабораторных исследований лошадей с PPID включают слабой степени анемию, нейтрофилию и лимфопению. Наиболее распространенным нарушением, которое обнаруживается при биохимическом анализе сыворотки, бывает слабой или умеренной степени гипергликемия (повышенная концентрация глюкозы) и глюкозурия (глюкоза в моче), которая встречается в примерно 50% случаев.
Показания:
• повышенная потливость;
• повышенный аппетит;
• полидипсия и полиурия;
• угнетение / усталость;
• низкая работоспособность;
• сниженная иммунная функция приводит к повторяющимся инфекциям кожи и дыхательных путей, заболеванию зубов и повышенной восприимчивости к гельминтам;
• потеря мышечной массы и частое сильное потение живота;
• аномальный депозит жира вокруг глаз.
Противопоказания: не известны
Подготовка пациента: рекомендована голодная диета в течение 12 часов.
Важно! За два дня перед проведением исследования необходимо отменить преднизолон или любые сходные стероидные препараты, также кетоконазол и прогестагены. Применение дексаметазона и фенобарбитала на результат теста не влияет.
Метод отбора: венепункция. Два определения кортизола, Проба №1 - базальный уровень, Проба №2 - уровень кортизола после введения препарата.
Преаналитика:
1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой.
2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз.
3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.
4. Центрифугировать при 2000 g. 10 мин, не позднее 60 минут после взятия.
5. Сразу отобрать сыворотку в пустую чистую пробирку с белой крышкой.
6. Контейнеры маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, номером пробы (1, 2), заполнить направительный бланк, указав код клиента.
ВНИМАНИЕ! В лабораторию поступают ДВЕ пробирки с белой крышкой. Минимальный объем крови каждой пробы необходимый для исследования - 1.5 мл
Единицы измерения: нмоль/л
Интерпретация: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Нарушения, которые могут повлиять на результат: выраженная липемия или гемолиз; стресс или заболевания, не связанные с патологией надпочечников.
Референсные значения: базовый уровень кортизола 71- 240 нмоль/л
Форма выдачи результата: количественный тест
Список источников:
1) Конный мир №1 2021 г. Синдром Кушинга у лошадей: диагноз и лечение. Миломир Ковач.
2) The beaufort cottage laboratories Guide to equine clinical pathology. 2006 Rossdale & Partners;
3) Equine Clinical Pathology. Edited by Raquel M. Walton. C 2014 by John Wiley & Sons, Inc;
4) Interpretation of Equine Laboratory Diagnostics. Edited by Nicola Pusterla, Jill Higgins/ 2018 John Wiley & Sons, I
