Посев на грибы рода Candida с определением чувствительности к антимикотическим препаратам

Кандидоз – микоз, вызванный грибами рода Candida. C. albicans – диплоидный грибок (молочница) форма дрожжеподобных грибов, способных к спариванию, но не в форме мейоза, является наиболее распространенным видом дрожжей, вызывающих инвазию у животных. В роду Candida насчитывается более 200 видов. Эти грибы входят в состав нормальной флоры слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, носовой полости и половых органов млекопитающих. У гусей, индеек чаще инфицирует клоаку и воздухоносные пути, у коров вызывает снижение плодовитости, аборты, маститы, у кобыл приводит к развитию пиометры, у кошек к циститам и пиотораксу, и также, как и у лошадей, к заболеванию глаз, у собак, телят, свиней и кошек встречается генерализованная форма заболевания.

Развитию кандидоза способствуют длительное лечение антибиотиками, иммуносупрессивная терапия, понижение клеточного иммунитета любой этиологии, инфицированность вирусом иммунодефицита или лейкоза, нейтропения (у собак), сахарный диабет, парвовирусная инфекция, длительное применение глюкокортикоидов, повреждение слизистой оболочки или кожного покрова. Также в анамнезе у пациентов с кандидозом ожоги, травмы, оперативное вмешательство, постоянный катетер. Симптомы заболевания различаются в зависимости от особенностей, локализации или диссеминации возбудителя. При локализации возбудителя в ротовой полости обнаруживают белые пораженные участки на языке, слизистой оболочке, губах, кожно-слизистой кайме; при локализации в кишечнике – хроническую диарею, похудение. Поражение уха проявляется воспалением наружного слухового прохода и/или средним отитом, гениталий-белыми выделениями из влагалища или препуция, кожного покрова – незаживающим эритематозным мокнущим изъязвлением. Симптоматика системного кандидоза зависит от места образования микроабсцессов и может включать лихорадку, дерматит, передний увеит, плевральный выпот, остеомиелит, диарею, расстройства функций ствола мозга или мозжечка.

Кандидоз следует дифференцировать с другими инфекционными болезнями ротовой полости (бластомикозом, гистоплазмозом, вирусными болезнями кошек и др.), эзофагитом, острым или хроническим пищеводным рефлюксом и рвотой, последствиями травмы или внедрения чужеродного тела. Системный кандидоз дифференцируют с бактериальным сепсисом или токсемией, другими системными микозами, аутоиммунными болезнями, аллергическим дерматозом, вирусными инфекциями, новообразованиями, выраженными нарушениями метаболизма и анафилаксией.

При диссеминированных формах кандидоза развиваются обширные поражения внутренних органов, представленные множественными белыми очагами в сердце, печени, селезенке и других органах в зависимости от хода эмболизации. При микроскопическом исследовании эти очаги определяют как абсцессы или участки некроза, содержащие бластоконидии, псевдогифы и настоящие гифы.

Для подтверждения диагноза могут понадобиться соскоб или биопсия кожи. Выделение Candida spp. из фекалий обычно недостоверно, в то время как из мочи более вероятно, чем из крови, поскольку при диссеминированных формах болезни часто наблюдается эмболизация почек. Лучше брать артериальную кровь для бактериологического исследования.

Растет Candida albicans в аэробных условиях при 37℃ на широком спектре питательных сред, в том числе на Сабуро декстрозном агаре. Образует выпуклые колонии от белого до бежевого и кремового цветов на поверхности селективной среды. Главными признаками для идентификации являются образование "ростковой трубки" и/или псевдомицелия и хламидоспоры.

Показания: хронические риниты, новообразования полости носа и параназальных синусов, позывы на рвоту, возможны хрипение (стертор), стридор или сухой непродуктивный кашель, хрипы, одышка в качестве дополнительного рекомендуемого теста к AN467–А или 467–Р у животных, в анамнезе у которых длительная терапия антибиотиками или иммуносупрессивными препаратами.

Противопоказания: имеются только при проведении процедуры БАЛ:

• отсутствие в клинике условий для обеспечения животного дополнительным кислородом в течение нескольких часов после проведения БАЛ;

• исследование противопоказано тем животным, у которых наблюдается затруднение дыхания даже на фоне назначения им кислородотерапии;

• любые противопоказания для проведения общей анестезии.

Подготовка пациента: перед проведением общей анестезии требуется голодная диета 6-12 часов. Отменить применение системных антимикотических средств за 7 дней до проведения анализа!

Метод отбора биоматериала: соскоб клеточного материала из ротовой и носовой полости с помощью тампона на аппликаторе (ESwab), аспирация содержимого пазух носа, бронхо-альвеолярный лаваж.

Преаналитика:

ВАЖНО! Данная транспортная пробирка позволяет сохранить биоматериал в неизмененном виде до 48 часов при температуре хранения +2°С...+8°С.

Порядок действий:

1. При взятии любого биоматериала поместить тампон на аппликаторе в среду Amies (Эймс), даже если он не использовался!

2. Надломить аппликатор в точке отлома (линия отмеченная красным цветом) и оставить его в пробирке.

3. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного.

4. Заполнить направительный бланк, указав локализацию, дату и время взятия биоматериала.

5.Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

Отделяемое ротоглотки: при наличии большого количества слизи - убрать стерильной марлевой салфеткой. Провести взятие материала на границе здоровой и пораженной ткани при помощи тампона на аппликаторе (ESwab) от комплекта транспортной среды Amies и поместить тампон на аппликаторе в среду Amies (Эймс).

Отделяемое носовой полости: при наличии гнойного отделяемого - убрать стерильной марлевой салфеткой. Тампон на аппликаторе (ESwab) от комплекта транспортной среды Amies ввести в носовой ход на глубину около 0.5 - 1 см, прижимая к слизистой поверхности в верхней части ноздри, вращать несколько секунд. Поместить тампон на аппликаторе в среду Amies (Эймс).

Аспират из пазух носа: поместить аспират непосредственно в жидкую среду Amies в объеме не более 0,3 мл. Поместить тампон на аппликаторе в среду Amies (Эймс).

Бронхоальвеолярный лаваж: после аспирации шприцом стерильного физиологического раствора из нижних дыхательных путей, обильно смочить стерильный тампон (ESwab) полученным материалом. Допускается внесение бронхоальвеолярного лаважа непосредственно в жидкую транспортную среду Amies (Эймс) в объеме не более 0,3 мл. Поместить тампон на аппликаторе в среду Amies (Эймс).

Интерпретация результата: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.    

Форма выдачи результата:

в результате даётся информация:

• об отсутствии или наличии роста;

• о количестве выросших в посеве грибов рода Candida;

• о видовой принадлежности;

• о чувствительности к антимикотическим препаратам (если количество более 10* 1 КОЕ/тампон).

Референсные значения: в норме роста Candida spp. не выявлено.

Источники:

1) Concise Review of Veterinary Microbiology. Second Edition. P.J. Quinn, B.K. Markey, F.C. Leonard, E.S. FitzPatrick, S. Fanning;

2) Veterinary Microbiology and Microbial Disease. Second Edition. P. J. Quinn, B.K. Markey, F. C. Leonard, E. S. Fitz Patric, S. Fanning, P.J. Hartigan.

3) Болезни кошек и собак: справ; (пер. с англ.). Л. Тилли, Ф. Смит мл. 2010 г.