Прямой (конъюгированный) билирубин представляет собой растворимую фракцию общего билирубина сыворотки крови. Образовавшийся в результате разрушения эритроцитов, неконъюгированный билирубин соединяется с белками плазмы (свободный билирубин), а затем переходит в растворимую форму (прямой билирубин) путем конъюгации в гепатоцитах.
Конъюгация билирубина проходит в три этапа: поглощение билирубина клетками печени, присоединение к билирубину глюкуроновой кислоты и секреция билирубина в желчные канальцы. На первом этапе неконъюгированный билирубин отсоединяется от альбумина на поверхности гепатоцитов и захватывается клетками печени при участии специфических белков-переносчиков. Система поглощения клетками печени билирубина обладает большой емкостью и лимитируется только дальнейшими метаболическими превращениями билирубина. На втором этапе в гепатоцитах происходит последовательное присоединение двух молекул глюкуроновой кислоты к билирубину (конъюгация). Присоединение одной молекулы глюкуроновой кислоты образует билирубинмоноглюкоронид (который также может образовываться в кишечнике и почках). При присоединении второй молекулы глюкуроновой кислоты образуется билирубиндиглюкоронид (реакция происходит только в печени). На третьем этапе образовавшийся конъюгированный (прямой) билирубин с помощью механизма активного транспорта секретируется в желчные канальцы. Небольшое количество глюкуронидов может транспортироваться обратно в кровь, поэтому в крови возможно присутствие как конъюгированной, так и неконъюгированной фракции билирубина. Конъюгированный (прямой) билирубин с желчью поступает в тонкий кишечник. Под действием кишечных бактерий прямой билирубин превращается в уробилиноген и реабсорбируется кишечником. Большая часть реабсорбированного уробилиногена попадает обратно в печень и ресекретируется в желчь путем энтерогепатической циркуляции. Меньшая часть уробилиногена экскретируется почками. Уробилиноген, оставшийся в кишечнике, окисляется до стеркобилина и выводится из организма. Повышение в крови прямого билирубина обычно возникает:
- при нарушении процессов секреции конъюгированного билирубина в желчь;
- при нарушении оттока желчи в кишечник.
Конъюгированный билирубин поступает в желчь против градиента концентрации с помощью механизма активного транспорта. Секреция билирубина в желчные канальцы является скорость-лимитирующей стадией процесса метаболизма билирубина в печени. В норме небольшое количество билирубинмоноглюкуронида может присутствовать в крови. Конъюгация и секреция билирубина взаимосвязаны и активируются одними и теми же лекарственными препаратами (например, фенобарбиталом). Некоторые бактериальные эндотоксины и медиаторы ответа острой фазы подавляют мембранный механизм секреции билирубина в желчные канальцы и вызывают сепсис-ассоциированный холестаз.
При повышении концентрации конъюгированного билирубина в крови он связывается с сывороточным альбумином прочной ковалентной и нековалентной связями. Ковалентно связанный с альбумином билирубин (дельта-билирубин, или билипротеин) выводится из организма медленнее других форм билирубина, и период его полувыведения составляет около двух недель.
Показания:· заболевания печени;
· задержка оттока желчи (холестаз);
· дифференциальная диагностика желтух различной этиологии.
Противопоказания: отсутствуют.
Подготовка пациента: перед проведением исследования животное должно быть выдержано на голодной диете минимум 12 часов. Обязательно центрифугирование проб крови, не позднее 60 минут с момента взятия.
Метод отбора: венепункция.
Преаналитика:
Порядок действий:
1. Взятие крови – пробирка с красной крышкой с гелем, 2,5 мл.
2. Осторожно перевернуть пробирку 4-6 раз.
3. Пробирку оставить в вертикальном положении на 30 минут при комнатной температуре.
4. Центрифугировать при 3300 об/мин в течение 10 минут, не позднее 60 минут после взятия.
5. Стабильность пробы: 1 неделя при +2°С…+8°С (при хранении на геле), 3 месяца при -17℃…-23℃.
6. Минимальный объем крови для выполнения 20 биохимических показателей – 2,5 мл.
7. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.
8. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).
Интерпретация: Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Форма выдачи результата: количественный тест.
Единицы измерения: мкмоль/л.
Референсные значения: на данный момент отсутствуют.
Список источников:
1) CRC Handbook of Marine Mammal Medicine, 3rd Edition by Frances M.D. Gulland, Leslie A. Dierauf, Karyl L. Whitman March 2018
2) Encyclopedia of Marine Mammals, 2nd Edition. by Bernd Würsig, William Perrin, Bernd Würsig, J.G.M. Thewissen, November 2008
3) Marine mammals as health sentinels of the oceans. Michelle Lynn Reddy, Leslie A. Dierauf, and Frances M. D. Gulland.