Бордетеллез (Bordetella bronchiseptica) (ПЦР)

Бордетеллы – мелкие плеоморфные грамотрицательные коккобациллы, которые передвигаются благодаря наличию ресничек. Bordetella bronchiseptica является одним из патогенов, вызывающих респираторные заболевания собак и кошек повсеместно (инфекционный трахеобронхит). К инфекции также восприимчивы человек и некоторые другие животные, такие как дикие хищники, свиньи, грызуны.

1. Подготовка пациента
2. Показания и противопоказания
3. Интерпретация и форма выдачи результата

Существует много штаммов B. bronchiseptica, которые различаются вирулентностью и кругом хозяев. Молекулярное типирование показало, что штаммы, поражающие собак, могут передаваться кошкам, и наоборот. По результатам полного секвенирования генома B. bronchiseptica было установлено наличие плазмид, отвечающих за развитие резистентности к антибиотикам.

Как и вирусные респираторные инфекции, бордетеллез чаще встречается у собак и кошек при скученном содержании в приютах, зоомагазинах и гостиницах для животных. Инфекция B. bronchiseptica часто протекает совместно с респираторными вирусными инфекциями или инфекцией Mycoplasma spp. Bordetella bronchiseptica может сохраняться во внешней среде в течение минимум 10 дней, а также размножаться в естественных водоемах, однако микроорганизм восприимчив к действию большинства дезинфектантов.

Основным путем передачи инфекции B. bronchiseptica является воздушно-капельный, однако возможна передача возбудителя через контаминированные предметы или воду. Микроорганизм характеризуется высокой контагиозностью. При вдыхании B. bronchiseptica прикрепляется к ворсинкам эпителия дыхательных путей и секретирует токсины, вызывающие повреждение респираторного эпителия. Капсула защищает бациллу от фагоцитоза и действия системы комплемента. Инфекция B. bronchiseptica сопровождается нарушением функции клеток, повышенной секрецией слизистого секрета, а также нарушением иммунного барьера, что способствует развитию оппортунистических вирусных и бактериальных инфекций. Выраженность клинических симптомов болезни может варьировать в зависимости от штамма возбудителя, особенностей иммунного ответа хозяина, а также наличия сопутствующих инфекций. Инкубационный период составляет от двух до десяти дней. Могут наблюдаться ринит и ринотрахеит, серозные и слизисто-гнойные выделения из носа, чихание, хрипы при дыхании и персистирующий тяжелый кашель. У некоторых собак развивается бронхопневмония, характеризующаяся лихорадкой, продуктивным кашлем, летаргией и снижением аппетита.

Выделение B. bronchiseptica инфицированными животными происходит периодически в течение минимум одного месяца, иногда – нескольких месяцев после инфицирования. Персистенция инфекции может быть связана со способностью микроорганизма избегать действия факторов иммунной системы и выживать в фагоцитах.

Исследуемый аналит: эпителий слизистой оболочки носовой полости

Метод исследования: ПЦР в режиме Real time.

Подготовка пациента: биоматериал отбирается до применения местных и системных лекарственных препаратов; при наличии гнойного отделяемого необходимо предварительно его удалить при помощи чистой марлевой салфетки, смоченной 0,9% физиологическим раствором (NaCl).

Показания: чихание, кашель, выделения из носа, обследование животных перед выставками, перед вязкой и перед продажей, обследование перед вакцинацией Нобивак КС (Nobivac КС) — живой сухой вакциной против бордетеллеза и парагриппа собак.

Противопоказания: неизвестны.

Метод отбора биоматериала: соскоб эпителиальных клеток слизистой носовой полости с помощью урогенитального зонда.

Преаналитика: 

1. Урогенитальный зонд аккуратно ввести на глубину 0.1-0.3 см в носовой проход и вращательными движениями набрать клеточный материал со слизистой оболочки.
2. Перенести зонд в микропробирку 2 мл с транспортной средой, вращательными движениями "смахнуть" биоматериал в жидкость, зонд утилизировать.
3. Микропробирку плотно закрыть крышкой до щелчка.
4. Микропробирку маркировать Ф.И.О. владельца, кличкой животного, указать локализацию.
5. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.
6. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃…+8℃ (синий пакет)

Интерпретация результата: результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

В ряде случаев при малой концентрации возбудителя в образце возможно получение ложноотрицательных результатов бактериологического посева, в таких ситуациях ПЦР позволяет уточнить диагноз. В течение трех недель после проведения интраназальной вакцинации возможно получение положительных результатов ПЦР.

«Обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала означает, что найден фрагмент ДНК, специфичный для комплекса Bordetella bronchiseptica, инфицирование B. bronchiseptica. 

«Не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Bordetella bronchiseptica, или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

Форма выдачи результата: качественный метод. Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК Bordetella bronchiseptica.

Литература:

1. Ш.Ваден,Д.Нолл, Ф.Смит,Л.Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.
2. INFECTIOUS DIESEASES OF THE DOG AND CAT, FOURTH EDITION ISBN: 978-1-4160-6130-4 Copyright © 2012, 2006, 1998, 1990 by Saunders, an imprint of Elsevier Inc.