Дирофиляриоз (Dirofilaria immitis + D. repens) (ПЦР)

Dirofilaria immitis и Dirofilaria repens – паразитические нематоды, принадлежащие к надсемейству Filarioidea. Окончательными хозяевами паразитов являются собаки, в редких случаях – кошки. Кроме собак, заражению повержены лисы, волки, койоты, дикие кошки, хорьки, ондатры, носухи, морские львы, а также люди. Промежуточными хозяевами являются комары родов Aedes, Anopheles и Culex.

После инокуляции 2-3 месяца личинки находятся в подкожной клетчатке и мышцах, за это время они два раза линяют.

Самки выделяют в кровеносное русло личинок – микрофилярий, которые могут жить в кровеносных сосудах внутренних органов в течение нескольких месяцев. Это личинки первой стадии, их еще называют «личинки стадии L1». При питании комаров на инвазированных животных микрофилярии попадают в организм насекомых, где в течение примерно двух недель происходит их последующее развитие до стадии L3 . Во время укуса комара инвазионные личинки проникают в организм окончательного хозяина, после чего мигрируют в подкожную клетчатку и мышцы. В течение последующих нескольких месяцев личинки дважды линяют, проходя стадии развития L4 и L5. Стадия L5 – незрелые взрослые особи гельминтов, достигающие длины 1-2 см. Юные особи D. repens остаются паразитировать в пределах подкожной клетчатки, иногда подвергаясь атипичной миграции (в глаза, нервную систему и др.). Особи D. immitis мигрируют в системный кровоток и током крови заносятся в легочные артерии. Как правило, через 7-9 месяцев после начала инвазии в крови циркулируют микрофилярии. Продолжительность жизни гельминтов в организме собаки может достигать семи лет от момента заражения. Юные и взрослые особи D. immitis локализуются преимущественно в каудальных легочных артериях, иногда мигрируя в главные легочные артерии, при тяжелой инвазии – в правые отделы сердца и крупные вены.

Наличие взрослых червей в легочных артериях ведет к развитию реактивных поражений сосудов, вызывающих снижение податливости сосудистой стенки и уменьшение просвета сосуда. Тяжесть поражений зависит от ряда факторов, включающих число червей, продолжительность их паразитирования и индивидуальные особенности взаимодействия «паразит–хозяин». Характерным симптомом при сердечном дирофиляриозе является ворсинчатая миоинтимальная пролиферация легочных артерий. Повреждения эндотелия сосудов вызывают тромбоз, а также периваскулярную тканевую реакцию и периартериальный отек. Развивающийся аллергический эозинофильный альвеолит может способствовать повреждению паренхимы легких. Наличие мертвых червей способствует усилению иммунного ответа и усугублению поражений легких. Части мертвых червей и тромбы вызывают тромбоэмболию и способствуют усилению воспалительной реакции, приводящих к развитию фиброза. Сердечно-легочный дирофиляриоз является одной из причин легочной гипертензии в эндемичных регионах.

Dirofilaria repens вызывает кожную форму дирофиляриоза. Взрослые черви, достигающие длины 15 см, локализуются в подкожной клетчатке. Жизненный цикл сходен с таковым D. immitis. Продолжительность препатентного периода составляет 6-8 месяцев. Инвазия обычно протекает в субклинической форме, в некоторых случаях может развиваться дерматит, сопровождающийся локальной алопецией, зудом, эритемой и образованием корочек.

В качестве основного метода исследования при проведении скрининга на сердечно-легочную форму дирофиляриоза рекомендуется использовать тесты определения антигена взрослых дирофилярий.
Обнаружение циркулирующего антигена возможно через 6,5-7 месяцев после инвазирования, но не ранее пяти месяцев.

Молекулярные методы исследования позволяют повысить точность окончательного диагноза. В настоящее время существуют тест-системы ПЦР, которые используются в нашей лаборатории, позволяющие обнаруживать ДНК дирофилярий в образцах цельной крови, а также дифференцировать инвазию D. immitis и D. repens.

Преаналитика:

1. Провести процедуру взятия крови.

2. После внесения биоматериала в пробирку с сиреневой крышкой (ЭДТА) осторожно перевернуть пробирку 6-7 раз для перемешивания материала с антикоагулянтом.

3. Заморозить в вертикальном положении при -17°С…-23°С.

4. Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного.

5. Заполнить направительный бланк, указав код клиента.

6. Срок хранения образца при -17°С…-23°С   две недели.

7. Температурный режим транспортировки в лабораторию -17°С…-23°С (красный пакет)

МИНИМАЛЬНЫЙ ОБЪЕМ КРОВИ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ 1 МЛ 

Интерпретация:

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.