Лямблиоз (Giardia lamblia spp.) (ПЦР)
Представители семейства Hexamitidae внеклеточные простейшие из рода Giardia служат причиной лямблиоза (giardiasis) человека и животных по всему миру, паразитируя в кишечном тракте.
По различным оценкам зараженность лямблиями щенков варьирует от 20 до 35%, котят от 10% до 15%. Бессимптомными носителями паразита в популяции служат 10% собак и кошек, время от времени выделяя патогенов во внешнюю среду. Клинические проявления отмечают у молодняка в виде диареи с характерным пенистым и слизистым содержимым, с частичками непереваренных жировых включений. У животных отмечают тусклый шерстный покров, метеоризм, отставание в росте. Животные младше шести месяцев с диареей, как правило, потенциальные выделители лямблий. Препатентный период лямблиоза у кошек и собак, в среднем, составляет 10 дней. Выделения цист спорадические, могут происходить с интервалами от 2 до 7 дней. Патогенез заболевания до конца не изучен, однако известно, что нарушение проницаемости в кишечнике вызывает атрофию ворсинок и повреждение слизистой оболочки. Диарея вызвана сочетанием мальабсорбции и гиперсекреции электролитов. Нарушение функций эпителиального барьера влечет к хроническим кишечным расстройствам, проявляющимся синдромом раздраженного кишечника. Механизмы поддержания хронической формы лямблиоза до конца не описаны. Диагностика лямблиоза затруднена в следствии широкой распространенности лямблий в кале у клинически здоровых животных.
Микрокопирование образцов фекалий характеризуется низкой чувствительностью. Эндоскопические методы выявления лямблий у кошек и собак требуют анестезии и не всегда дают адекватный результат. Диагностика с использованием иммуноферментных анализов разработана, но широкого применения не нашла. В настоящее время использование ПЦР наиболее доступный и быстрый метод диагностики ДНК лямблий в образцах кала от животных. К отрицательным сторонам исследования можно отнести возможность получения отрицательных результатов, так как в кале содержится большое количество веществ, ингибирующих реакцию. Как правило, на практике используется мультилокусная ПЦР, позволяющая выявить в одном исследовании несколько видов лямблий.
Исследуемый аналит: эпителий слизистой оболочки прямой кишки.
Метод исследования: ПЦР – Real-time.
Подготовка пациента: не рекомендуется взятие соскобов после применения средств, облегчающих введение термометра ; не рекомендуется взятие соскоба, если животное получает сорбенты.
Показания: хроническая или персистирующая тостокишечная диарея.
Противопоказания: не известны.
Метод отбора биоматериала: соскоб эпителиальных клеток со слизистой оболочки прямой кишки.
Преаналитика:
- урогенитальный зонд аккуратно ввести на глубину 0,5 см в прямую кишку и вращательными движениями набрать клеточный материал со слизистой оболочки.
- Перенести зонд в микропробирку с транспортной средой, вращательными движениями «смахнуть» биоматериал в жидкость, зонд утилизировать.
- Микропробирку плотно закрыть крышкой до щелчка.
- Заполнить все графы направительного бланка.
- Сохранность образца 10 дней при +2°С …+8°С.
- Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С … +8°С (синий пакет).
Интерпретация результата:
Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.
Формат выдачи результата: качественный метод.
Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК
Использованная литература:
- Bouzid M, Halai K, Jeffreys D, Hunter PR.The prevalence of Giardia infection in dogs and cats, a systematic review and meta-analysis of prevalence studies from stool samples. Vet Parasitol. 2015 Jan 30;207(3-4):181-202. doi: 10.1016/j.vetpar.2014.12.011. Epub 2014 Dec 27. Review.
- Esch KJ, Petersen CA. Transmission and epidemiology of zoonotic protozoal diseases of companion animals. Clin Microbiol Rev. 2013 Jan;26(1):58-85. doi: 10.1128/CMR.00067-12. Review.
