Микоплазмоз (Mycoplasma сynos) (ПЦР)

Микоплазмы – бактерии из класса Mollicutes, у которых отсутствует клеточная стенка, размер клетки составляет от 0,3 до 0,8 мкм. Существует более 120 видов микоплазм, однако ввиду сложности видовой идентификации, не до конца ясно, какие из них вызывают инфекции у собак и кошек. Микоплазмы являются комменсальными микроорганизмами, населяющими слизистые оболочки практически всех видов млекопитающих. У собак инфекции микоплазм обычно характеризуются поражением мочеполовой системы, а также кератоконъюнктивитом и/или патологиями верхних дыхательных путей, поражением кожи и мягких тканей, менингоэнцефалитом и артритом. Ввиду того, что микоплазмы часто обнаруживаются в верхних дыхательных путях и половых путях здоровых животных, иногда сложно установить их роль в патологиях верхних дыхательных путей и мочеполовой системы. Микоплазмы могут вызывать вторичные инфекции при нарушении функции иммунной системы вследствие таких факторов, как неоплазия или использование иммуносупрессивных препаратов.

При колонизации микоплазмы прикрепляются к клеткам слизистой оболочки хозяина. Поражение глубоких тканей и клиническое заболевание развиваются в результате иммуносупрессии или нарушения барьерной функции слизистой оболочки. Передача инфекции происходит при контакте с инфицированными животными или контаминированными предметами. Устойчивость к действию факторов внешней среды и способность выживать вне организма хозяина варьируют у разных видов микоплазм. Микоплазмы обнаруживают в верхних дыхательных путях практически у всех собак, примерно у 25% здоровых собак микоплазмы находят в трахее и легких. Факторы, предрасполагающие к развитию микоплазменной пневмонии, не всегда очевидны. Клинические признаки при этом включают лихорадку, кашель, тахипноэ, летаргию и снижение аппетита. Микоплазмы часто определяют у собак с бесплодием и гнойным эпидидимитом, а также у здоровых собак, поэтому их роль в развитии патологий половой системы неясна.

В некоторых случаях инфекции Mycoplasma spumans и M. edwardii могут вызывать полиартрит у собак, при этом в синовиальной жидкости обычно выявляют большое количество нейтрофилов. Это может приводить к ошибочному диагностированию иммунообусловленного полиартрита. Обычно у животных с микоплазменным полиартритом имеет место иммуносупрессия, вызванная неоплазией или применением глюкокортикоидов.

Клинические симптомы при микоплазмозе зависят от того, какой орган поражается инфекцией, а также от наличия сопутствующих патологий. При инфекции глаз чаще отмечаются серозные или серозно-гнойные выделения, гиперемия конъюнктивы, в некоторых случаях – кератит. При поражении верхних дыхательных путей присутствуют выделения из носа и чихание, иногда сопровождающиеся конъюнктивитом. При микоплазменной пневмонии могут наблюдаться лихорадка, тахипноэ и усиление дыхательных шумов. Инфекции мочевыводящих путей сопровождаются гематурией и странгурией. При микоплазменном артрите возможны лихорадка, суставная боль и отек суставов, в некоторых случаях – лимфаденопатия.

Диагноз при микоплазмозе ставится на основании клинических симптомов, результатов лабораторных и рентгенографических исследований, бактериологического посева и ПЦР. Существуют тест-системы ПЦР, как стандартные, так и в реальном времени, позволяющие обнаруживать ДНК микоплазм в образцах от больных животных, а также дифференцировать различные виды микоплазм. Наша лаборатория располагает тест-системами ПЦР, позволяющими дифференцировать М. сynos и M. сanis..

Исследуемый аналит: аспират, полученный  в результате бронхо-альвеолярного лаважа (БАЛ).

Метод исследования: ПЦР-РТ

Показания: чихание, кашель, выделения из носа в составе комплексной диагностики.

Противопоказания:

• отсутствие в клинике условий для обеспечения животного дополнительным кислородом в течение нескольких часов после проведения БАЛ;
• исследование противопоказано тем животным, у которых наблюдается затруднение дыхания даже на фоне назначения им кислородотерапии;
• любые противопоказания для проведения общей анестезии.

Подготовка пациента:

• утром перед исследованием животное не кормить. Так как процедура бронхо-альвеолярного лаважа проводится под общей седацией, пациента необходимо подготовить в соответствии с соблюдением всех требований, в зависимости от группы анестезиологического риска.
• Биоматериал отбирается до применения местных и системных лекарственных препаратов.
• Техника взятия должна проводиться с соблюдением правил асептики/антисептики для минимизирования возможной контаминации из верхних дыхательных путей.

Метод отбора: Бронхо-альвеолярный лаваж (БАЛ) – это метод получения образца жидкости с диагностической целью из мелких дыхательных путей – альвеол и в некоторых случаях из интерстициальных тканей. Лаваж (смыв) обычно выполняют во время бронхоскопии, что позволяет провести визуальный осмотр дыхательных путей и осуществить прицельный смыв с определенных долей легких. Кроме того, БАЛ можно выполнять и без бронхоскопа. Стерильный физиологический раствор вводят в легкие в достаточном объеме, чтобы он заполнил альвеолы. Затем раствор вместе с клетками и жидкостью с эпителиальной выстилки легких аспирируют обратно.

Преаналитика:

1. провести процедуру взятия бронхоальвеолярного лаважа;
2. перенести полученную жидкость в пробирку с сиреневой крышкой (ЭДТА);
3. после внесения жидкости, осторожно перевернуть пробирку 6-7 раз для перемешивания материала с антикоагулянтом;
4. заморозить в вертикальном положении при -17°С…-23°С;
5. пробирку маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, указать локализацию;
6. заполнить направительный бланк, указав код клиента;
7. cохранность образца при  -17°С…-23°С 2 недели.

МИНИМАЛЬНЫЙ ОБЪЕМ БАЛ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ 1 МЛ

Интерпретация результата: 

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики

Результаты исследования методом ПЦР должны интерпретироваться с учетом результатов всех остальных проведенных исследований и наличия сопутствующих патологий, ввиду того, что колонизация микоплазмами часто наблюдается у здоровых животных.

Форма выдачи результата: качественный метод

Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе ДНК Mycoplasma cynos

Список источников:

1. Ш.Ваден, Д.Нолл, Ф.Смит, Л.Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.
2. Infection diesases of the dog and cat, Fourth edition, ISBN: 978-1-4160-6130-4 Copyright © 2012, 2006, 1998, 1990 by Saunders, an imprint of Elsevier Inc.
3. A systematic review and meta-analysis of the relationship between 4 mycoplasma species and lower respiratory disease in dogs. Anisha Jambhekar, Elizabeth Robin 2, Kevin Le Boedek, PMID: 31297880 PMCID: PMC6766487 DOI: 10.1111 / jvim.15568