Комплексное паразитологическое исследование включает в себя определение ДНКкриптоспоридий и гиардий (лямблий) в образцах фекалий животных методом ПЦР, а также паразитологическое исследование фекалий путем флотации и микроскопии нативного мазка. Подробнее о каждом виде исследования сказано в соответствующих подразделах. Проведение комплексного паразитологического исследования повышает диагностическую эффективность и экономит время, предоставляя необходимую диагностическую информацию.
Микроскопическое исследование нативного мазка
Этот метод исследования является самым простым в исполнении, но обладает низкой эффективностью, поскольку для обнаружения паразитологического материала требуется инвазия средней или высокой интенсивности. Этот метод можно использовать как дополнительный к другим методам исследования фекалий кошек и собак на простейших и гельминтов.
Тонкий слой биоматериала наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Метод подходит для поиска простейших и яиц любых гельминтов, но диагностическое значение имеет только положительный результат. Если результат обозначен как «не обнаружено», дело может быть не в отсутствии гельминтов, а в том, что яйца просто не попали в мазок.
Флотация
Принцип флотационного метода заключается в способности менее плотных, чем флотационный раствор, частичек всплывать наверх к поверхностной пленке после смешивания флотационного раствора и пробы фекалий. Этот процесс может происходить медленнее, если смесь пассивно отстаивается в течение требуемого времени, либо флотация ускоряется путем центрифугирования смеси.
Для проведения данного теста используют растворы солей, удельный вес которых больше веса яиц гельминтов, при этом происходит всплывание яиц на поверхность раствора. Тип флотационного раствора и процедура тестирования имеют определяющее значение для чувствительности проводимого теста. Цисты Giardia быстрее всего разрушаются в большинстве флотационных растворов. Для обнаружения цист Giardia оптимальной флотационной средой, в которой не происходит их быстрого разрушения, является 33% раствор сульфата цинка.
Метод ПЦР- наиболее доступный и быстрый метод диагностики ДНК лямблий и криптоспоридийв образцах кала от животных.К отрицательным сторонам исследования можно отнести возможность получения отрицательных результатов, так как в кале содержится большое количество веществ, ингибирующих реакцию.
Подготовка пациента: не рекомендуется исследование фекалий, если животное получает сорбенты; не рекомендуется исследование фекалий, если использовались местные слабительные лекарственные средства.
Показания:
хроническая или периодическая толстокишечная диарея у пациентов, находящихся в группе риска;
диспансерное обследование молодых животных, свободно гуляющих на улице.
Противопоказания: неизвестны.
Метод отбора биоматериала: сбор пробы фекалий в контейнер.
Преаналитика: ВАЖНО! В лабораторию поступают ДВА контейнера для кала с ложечкой!
Прием материала от клиента – стерильный контейнер с ложечкой.
Доставить в течение 48 часов с момента сбора биоматериала.
Контейнер маркировать Ф.И.О. владельца и кличкой животного, заполнить направительный бланк, указав код клиента.
Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С … +8°С (синий пакет).
ВНИМАНИЕ! Для исследования необходима разовая порция фекалий, помещенная в ДВА стерильных контейнера с ложечкой и крышкой (ККЛ). Объем пробы для проведения анализа должен быть размером с грецкий орех в каждом контейнере. Сохранность образца при температуре хранения +2°С…+8°С составляет три дня.
Результаты исследования: Не обнаружены или обнаружены (ДНК Giardia spp. и/или Cryptosporidium spp., яйца гельминтов, патогенные цисты и вегетативные формы простейших).
Форма выдачи результата: качественный
Референсные значения: в норме, при соблюдении правил преаналитики, ДНК Giardia spp., Cryptosporidium spp., яйца гельминтов, патогенные цисты и вегетативные формы простейших не обнаруживаются.
Источники:
А.А. Черепанов, А.С. Москвин, Г.А. Котельников, В.М. Хренов. Атлас. Дифференциальная диагностика гельминтозов по морфологической структуре яиц и личинок возбудителей.
Ш.Ваден, Д.Нолл, Ф. Смит, Л.Тиллей. Полное руководство по лабораторным и инструментальным исследованиям собак и кошек.